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엔도글루칸아제-이 또는 소형 셀룰로오스 결합단백질-에이 유전자가 도입된 재조합 벡터, 그 재조합벡터를 포함하는 형질전환체 및 이를 이용한 소형-셀룰로좀의 생산 방법

  • 기술번호 : KST2015131941
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 코리네박테리움 글루타미쿰 (Corynebacterium glutamicum) 균의 저산소 고세포 집적 프로세스를 이용한 셀룰로오스 및 소형 셀룰로오스 결합단백질의 생산과 이를 이용한 셀룰로오스 분해효소 복합체인 소형 셀룰로좀 (mini-cellulosome)의 생산하기 위한 코리네박테리움 글루타미쿰 균에 클로스트리디움 속 (Clostridium sp.) 박테리아 유래의 셀룰라아제 엔도-베타-1,4-글루칸아제-이 (endo-베타-1,4-glucanase E, 1,4-베타 D-glucan glucanohydrolase, carboxymetylcellulase, CMCase, CelE; EC 3.2.1.4))와 엔도-베타-1,4-글루칸아제-비 ((endo-베타1,4-glucanase B, EngB; EC 3.2.1.4)의 도커린 (dokerin) 부위를 갖는 키메라 엔도-베타-1,4-글루칸아제-이 (chimeric CelE) 유전자와 셀룰로오즈 분해효소 골격단백질 소형 셀룰로오즈 결합단백질 에이 (mini cellulose binding protein A, miniCbpA) 유전자가 도입된 재조합 벡터 및 그 재조합벡터를 포함하는 코리네박테리움 글루타미쿰 형질 전환체 그리고 그 형질전환체로부터 발현된 단백질의 어셈블리를 통한 셀룰로좀의 생산에 관한 것이다. 본 발명의 클로스트리디움 속 미생물로부터 유래한 키메라 엔도-베타-1,4-글루칸아제-이와 소형 셀룰로오즈 결합단백질 에이의 어셈블리를 통해 생성된 셀룰로좀은 효소 소단위체의 바이오매스 분해 효율을 극대화시키는 효소 복합체로 결정형 셀룰로오스 (crystalline cellulose)를 직접 분해할 수 있는 능력이 있어 이 유전자를 경제적으로 대량 생산하게 되면 공장에서의 바이오에탄올 공정 시 생산단가를 크게 절감할 수 있는 장점이 있다. 또한 본 발명의 재조합 벡터는 대장균-코리네박테리움 글루타미쿰 셔틀 발현 벡터 pMT1-s (E. coli-Corynebacterium shuttle expression vector pMT1-s)를 사용함으로 코리네박테리움 균에서 안정적으로 발현되는 유전자 (House keeping gene) 의 프로모터를 이용하여 별도의 발현유도제 없이 안정적으로 유전자를 발현할 수 있도록 하여 상기 제시한 목적에 부합시켰다. 코리네박테리움 글루타미쿰, 키메라 엔도-베타-1,4-글루칸아제-이, 소형 셀룰로오즈 결합단백질 에이, 소형 셀룰로좀, 코리네박테리움
Int. CL C12N 15/31 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12R 1/145 (2006.01)
CPC C12N 15/77(2013.01) C12N 15/77(2013.01) C12N 15/77(2013.01)
출원번호/일자 1020090101056 (2009.10.23)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1102458-0000 (2011.12.28)
공개번호/일자 10-2011-0044410 (2011.04.29) 문서열기
공고번호/일자 (20120105) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.10.23)
심사청구항수 4

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 한성옥 대한민국 서울특별시 성북구
2 한가희 대한민국 인천광역시 부평구
3 조현영 대한민국 경기도 광주시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 구현서 대한민국 서울특별시 서초구 강남대로**길 **-**(서초동)(특허법인키)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2009.10.23 수리 (Accepted) 1-1-2009-0649657-88
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2009.11.12 수리 (Accepted) 1-1-2009-0696216-58
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2010.08.12 수리 (Accepted) 4-1-2010-5149278-93
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2011.03.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2011.04.15 수리 (Accepted) 9-1-2011-0033678-12
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.04.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0224619-57
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.06.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0480384-14
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.06.23 수리 (Accepted) 1-1-2011-0480391-23
9 등록결정서
Decision to grant		 2011.12.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0751201-04
10 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2012.03.02 수리 (Accepted) 1-1-2012-0174304-62
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.11 수리 (Accepted) 4-1-2014-5018243-16
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.04.22 수리 (Accepted) 4-1-2014-5049934-62
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.10.10 수리 (Accepted) 4-1-2019-5210941-09
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번호 청구항
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클로스트리디움 서머셀럼의 CelE의 활성부위와 클로스트리디움 셀룰로보란스의 EngB의 도커린 부위의 키메라 엔도-베타-1,4-글루칸아제-이 (chimera-CelE) 유전자가 삽입된 재조합 벡터로 형질 전환된 코리네박테리움 글루타미쿰 KCCM 11040P
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클로스트리디움 속 (Chlostridium sp
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a) 제 9항의 형질전환체; 및 b)제 12항의 형질전환체를 포함하는 소형-셀룰로좀 생성용 조성물
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a) 제 9항의 형질전환체를 배양하는 단계; b) 상기 a) 단계의 배양액으로부터 키메라 엔도-베타-1,4-글루칸아제-이 (chimera-CelE)를 수득하는 단계; c) 제 12항의 형질전환체를 배양하는 단계; d) 상기 c) 단계의 배양액으로부터 셀룰로좀 기본골격 소단위 소형 셀룰로오즈 결합 단백질 에이를 수득하는 단계; 및 e) 상기 b)와 d) 단계에서 수득한 단백질을 혼합하는 단계를 포함하는 소형-셀룰로좀의 대량 생산방법
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패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 한국과학재단 씨제이제일제당(주) 21C뉴프론티어연구개발사업 Corynebacterium glutamicum의 고효율 바이오프로세스 개발을 위한저산소(oxygendeprivation) 및 고세포집적(highcell density onpseudo-exponential phase)환경에따른 고발현유전자 연구