| 1 |
1
폴리에틸렌글리콜과 트리스 완충용액을 포함하는 저수조(reservior) 용액에 글리세롤, ATP 및 DTT를 혼합하는 완충액 내의 인간 AMPK α 1 도메인 용액을 포함하여 방울 혼합 증기 평형법(hanging-drop vapour diffusion method)에 의해 결정화시키는 것을 특징으로 하는, 활성화된 인간 AMPK α 1 도메인의 결정화 방법
|
| 2 |
2
제 1항에 있어서, 상기 활성화된 인간 AMPK α 1 도메인은 ATP, 인산기 및 글리세롤 분자와의 복합체 형태인 것을 특징으로 하는 방법
|
| 3 |
3
제 1항에 있어서, 방울 혼합 증기 평형법이 4 내지 30℃에서 수행됨을 특징으로 하는 방법
|
| 4 |
4
제 1항에 있어서, 방울 혼합 증기 평형법이 pH 7
|
| 5 |
5
제 1항에 있어서, 저수조 용액은 트리스 완충용액(50mM, pH 7
|
| 6 |
6
제 1항 내지 제 5항중 어느 한 항에 따라 생성된 인간 AMPK α 1 도메인의 결정을 0
|
| 7 |
7
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 방법으로 생성된, 결정의 공간군이 P212121, 직방정계; a = 66
|
| 8 |
8
제 7항에 있어서, 표 2의 원자좌표로 표시되는 인간 AMPK α 1 도메인의 결정체
|
| 9 |
9
제 7항에 있어서, 상기 결정체는 ATP, 인산기, 글리세롤 및 물 분자와 결합된 복합체 형태인 것을 특징으로 하는 결정체
|
| 10 |
10
삭제
|
| 11 |
11
삭제
|
| 12 |
12
삭제
|
| 13 |
13
하기 단계를 포함하는, 활성화된 인간 AMPK α 1 도메인에 결합하는 인간 AMPK의 활성 물질을 스크리닝하는 방법:
1) x-선 결정화법(x-ray crystallography)으로부터 수득한 데이터를 컴퓨터-판독 매체로 구동시켜, 활성화된 인간 AMPK α 1 도메인의 3차원 구조를 제공하는 단계; 및
2) 인간 AMPK α 1 도메인에 대한 활성 조절 후보 물질이 단계 1)에서 제공된 활성화된 인간 AMPK α 1 도메인의 3차원 구조에 결합하는지를 컴퓨터-판독 매체를 통하여 확인하는 단계
|
| 14 |
14
하기 단계를 포함하는, 인간 AMPK α 1의 활성을 조절하는 활성 조절물질을 설계하는 방법:
1) x-선 결정화법으로부터 수득한 데이터를 컴퓨터-판독 매체로 구동시켜, 인간 AMPK α 1 도메인의 3차원 구조를 제공하는 단계;
2) 컴퓨터를 이용하여 입체구조를 가진 조절물질의 3차원 구조를 생성하는 단계; 및
3) 단계 2)에서 생성된 조절물질이 단계 1)에서 제공된 인간 AMPK α 1 도메인의 활성부위에 결합하는지를 컴퓨터-판독 매체를 통하여 확인하는 단계
|
| 15 |
15
제 13항 또는 제 14항에 있어서, 단계 1)의 인간 AMPK α 1 도메인이 표 2의 원자 좌표로 나타내어지는 것인 방법
|
