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Cas9 단백질 및하나 이상의 염색질 조절 펩타이드(Chromatin-modulating peptides: CMP)를 포함하는 유전자 교정용 융합단백질
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제1항에 있어서, 상기 CMP는 고-이동성 그룹 뉴클레오솜 결합 도메인 1 (high-mobility group nucleosome binding domain 1: HN1), 히스톤 H1 중심 구형 도메인 (histone H1 central globular domain: H1G), 및 이의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 사이토신 디아미네이즈(cytidine deaminase)를 추가로 포함하고,상기 Cas9 단백질은 dead Cas9 (dCas9)인 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 tRNA 아데노신 디아미네이즈(tRNA adenosine deaminase: TadA)을 추가로 포함하고, 상기 Cas9 단백질은 nickase Cas9 (nCas9) 또는 dead Cas9 (dCas9)인 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제3항 또는 제4항에 있어서, 상기 융합단백질은 핵 위치화 신호(nuclear localization signals: NLS) 펩타이드를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제5항에 있어서, 상기 융합단백질은 N-말단에서 C-말단의 순서로 [NLS 펩타이드]-[Cas9 단백질]-[NLS 펩타이드]가 위치하며, CMP는 융합단백질의 C-말단 및/또는 상기 NLS 펩타이드와 Cas9 단백질 사이에 위치하는 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제6항에 있어서, 상기 융합단백질은 N-말단에서 C-말단의 순서로 [NLS 펩타이드]-[HN1]- [Cas9 단백질]-[H1G]-[NLS 펩타이드]가 위치하거나, N-말단에서 C-말단의 순서로 [NLS 펩타이드]-[HN1]- [Cas9 단백질]-[NLS 펩타이드]-[H1G]가 위치하는 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제3항에 있어서, 상기 융합단백질은 하나 이상의 UGI(uracil DNA-glycosylase inhibitor) 펩타이드를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제8항에 있어서, 상기 UGI 펩타이드는 dCas9 단백질의 C-말단에 직접적으로 연결된 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제9항에 있어서, 상기 융합단백질은 N-말단에서 C-말단의 순서로 [NLS 펩타이드]-[HN1]- [dCas9 단백질]-[UGI 펩타이드]-[UGI 펩타이드]-[NLS 펩타이드]-[H1G]가 위치하거나, N-말단에서 C-말단의 순서로 [NLS 펩타이드]-[HN1]- [dCas9 단백질]-[UGI 펩타이드]-[UGI 펩타이드]-[H1G]-[NLS 펩타이드]가 위치하는 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 융합단백질
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제1항의 융합단백질, 상기 융합단백질을 암호화하는 plasmid DNA 또는 mRNA, 또는 상기 plasmid DNA 또는 mRNA를 포함하는 벡터; 및 비표적 DNA 가닥과 혼성화하여 표적 DNA 가닥의 절단을 유도하는 sgRNA(single guide RNA), 상기 sgRNA를 발현할 수 있는 플라스미드, 또는 상기 플라스미드를 포함하는 벡터;를 포함하는 유전자 교정용 조성물
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제11항에 있어서, 상기 조성물은 UGI를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 유전자 교정용 조성물
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제11항의 유전자 교정용 조성물을 in vitro 또는 ex vivo 상에서 표적 핵산 서열을 포함하는 표적 영역 (region)과 접촉시키는 단계를 포함하는, 유전자 교정 방법
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제1항의 융합단백질을 암호화하는 mRNA 및 sgRNA(single guide RNA)를 포함하는 렌티바이러스 벡터
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제14항에 있어서, 상기 sgRNA는 10~30 뉴클레오티드 (nt) 길이인 것을 특징으로 하는, 렌티바이러스 벡터
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제14항의 렌티바이러스 벡터를 포유동물 세포와 접촉시키는 단계를 포함하는 형질전환 세포주 제조방법
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제14항의 렌티바이러스 벡터로 감염된 형질전환 세포주
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