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해충저항성 GM 배추의 특이 프라이머, 프로브 및 표준플라스미드를 이용한 검정분석법

  • 기술번호 : KST2015150620
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 해충 저항성 농작물의 검정용 프라이머, 프로브 및 이를 이용한 검정 방법에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 프라이머, 프로브 및 플라스미드는 해충 저항성 농작물의 계통을 특이적으로 검출하는 것이 가능하고, 해충 저항성 유전자 변형 농작물을 정성적, 정량적 분석에 이용될 수 있을 뿐만 아니라 상기 계통과 관련된 후대 및 교배 계통들에 대하여 검출이 가능하다. 또한, 본 발명의 프라이머, 프로브 및 표준플라스미드는 해충 저항성 유전자 변형 농작물의 동형접합체(homozygote)를 선별하는데 이용될 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/6895(2013.01) C12Q 1/6895(2013.01) C12Q 1/6895(2013.01)
출원번호/일자 1020110001907 (2011.01.07)
출원인 대한민국(농촌진흥청장)
등록번호/일자 10-1303783-0000 (2013.08.29)
공개번호/일자 10-2012-0089971 (2012.08.16) 문서열기
공고번호/일자 (20130909) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2011.01.07)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국(농촌진흥청장) 대한민국 전라북도 전주시 덕진구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 신공식 대한민국 경기도 수원시 권선구
2 임선형 대한민국 경기도 안양시 만안구
3 조현석 대한민국 경기도 수원시 장안구
4 서석철 대한민국 경기도 화성시 병점*로 ***,
5 권순종 대한민국 경기도 수원시 권선구
6 우희종 대한민국 경기도 수원시 장안구
7 이시명 대한민국 경기도 수원시 권선구
8 이기종 대한민국 경기도 수원시 권선구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인필앤온지 대한민국 서울특별시 서초구 서초중앙로 **, *층(서초동, 준영빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2011.01.07 수리 (Accepted) 1-1-2011-0014948-02
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2012.05.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2012.06.29 수리 (Accepted) 9-1-2012-0053512-56
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2013.01.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0045557-95
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2013.03.20 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0241850-64
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2013.03.20 수리 (Accepted) 1-1-2013-0241848-72
7 등록결정서
Decision to grant
2013.07.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0526112-96
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.30 수리 (Accepted) 4-1-2014-5159891-99
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2017.06.13 수리 (Accepted) 4-1-2017-0030830-54
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.13 수리 (Accepted) 4-1-2018-5134139-02
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 7 및 서열번호 8의 염기서열로 표시되는 CaLB41602 프라이머 세트 또는 서열번호 9 및 서열번호 10의 염기서열로 표시되는 CaLB41605 프라이머 세트; 서열번호 3 및 서열번호 4의 염기서열로 표시되는 TaCry2 프라이머 세트; 및서열번호 5 및 서열번호 6의 염기서열로 표시되는 35SCr 프라이머 세트를 포함하는, CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통의 검정용 조성물
2 2
제 1항에 있어서, 상기 해충은 배추 좀나방 유충인 것을 특징으로 하는 조성물
3 3
삭제
4 4
삭제
5 5
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 내재유전자 검출용 프라이머를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물
6 6
제 5항에 있어서, 상기 내재유전자 검출용 프라이머는 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 CGR 프라이머 세트인 것을 특징으로 하는 조성물
7 7
CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통의 DNA 단편을 주형으로 하여, 서열번호 9 및 서열번호 10의 염기서열로 표시되는 CaLB41605 프라이머 세트로 증폭된 PCR 증폭 산물 및 서열번호 1 및 서열번호 2로 표시되는 CGR 프라이머 세트로 증폭된 내재유전자 PCR 증폭 산물을 포함하는, CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통의 검정용 플라스미드
8 8
제 7항에 있어서, 상기 플라스미드는 서열번호 1의 염기서열, 서열번호 13의 염기서열, 서열번호 2의 염기서열과 상보적 염기서열, 서열번호 15의 SmaI/SrfI 제한효소 절단부위의 염기서열, 서열번호 9의 염기서열, 서열번호 14의 염기서열, 및 서열번호 10의 염기서열과 상보적 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통의 검정용 플라스미드
9 9
서열번호 7 및 서열번호 8의 염기서열로 표시되는 CaLB41602 프라이머 세트 또는 서열번호 9 및 서열번호 10의 염기서열로 표시되는 CaLB41605 프라이머 세트; 서열번호 3 및 서열번호 4의 염기서열로 표시되는 TaCry2 프라이머 세트; 서열번호 5 및 서열번호 6의 염기서열로 표시되는 35SCr 프라이머 세트; 및서열번호 14로 표시되는 염기서열로 표시되는 TaCaLB416 프로브를 포함하는,실시간(Real Time)-PCR을 위한 CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통 검정용 조성물
10 10
제 9항에 있어서, 내재유전자 검출용 프라이머 세트 및 프로브로서, 서열번호 1 및 서열번호 2의 염기서열로 표시되는 CGR 프라이머 세트 및 서열번호 13의 염기서열로 표시되는 TaCGR 프로브를 추가로 포함하는 조성물
11 11
제 1항 또는 제 9항을 포함하는 해충 저항성 유전자 변형 농작물의 검정용 키트
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서열번호 7 및 서열번호 8의 염기서열로 표시되는 CaLB41602 프라이머 세트 또는 서열번호 9 및 서열번호 10의 염기서열로 표시되는 CaLB41605 프라이머 세트; 서열번호 3 및 서열번호 4의 염기서열로 표시되는 TaCry2 프라이머 세트; 및서열번호 5 및 서열번호 6의 염기서열로 표시되는 35SCr 프라이머 세트를 사용하여, CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통을 검정하는 방법
13 13
제 12항에 있어서, 상기 TaCry2 프라이머 세트는 Cry1Ac1 유전자 검출, 상기 35SCr 프라이머 세트는 35S::Cry 검출, 상기 CaLB41602 프라이머 세트 및 상기 CaLB41605 프라이머 세트는 레프트 보더(left border, LB) 인접서열 부위 검출을 위한 것임을 특징으로 하는 방법
14 14
제 12항에 있어서, 글루타티온 환원효소(Glutathione reductase, GR1) 검출을 위한 서열번호 1 및 서열번호 2의 염기서열로 표시되는 CGR 프라이머 세트를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제 12항에 있어서, 서열번호 14로 표시되는 염기서열로 표시되는 TaCaLB416 프로브를 추가로 포함하여 실시간-PCR 방법에 사용하기 위한 것을 특징으로 하는 방법
16 16
제 15항에 있어서, 내재유전자 검출용 프라이머 세트 및 프로브로서, 서열번호 1 및 서열번호 2의 염기서열로 표시되는 CGR 프라이머 세트 및 서열번호 13의 염기서열로 표시되는 TaCGR 프로브를 추가로 포함하여 실시간-PCR 방법에 사용하기 위한 것을 특징으로 하는 방법
17 17
(a) 제 7항의 플라스미드를 카피수 별로 희석하여 DNA 표준물질로 하는 단계; (b) 상기 (a) 단계에서 수득한 표준물질을 주형으로 제 10항의 조성물을 사용하여 실시간-PCR을 수행하여 유전자 카피수를 나타내는 표준곡선을 작성하는 단계;(c) CryIAc1 유전자 포함 해충 저항성 유전자 변형 배추 416-3 계통으로부터 수득한 DNA를 주형으로 제 10항의 조성물을 사용하여 실시간-PCR을 수행하고 그 반응 결과를 표준곡선에 대입하여 유전자 카피수를 산출하는 단계;(d) 상기 (c) 단계에서 산출한 유전자 카피수를 계산식 1에 대입하여 보정계수를 산출하는 단계; (e) 대상 농작물 시료 또는 이의 가공품으로부터 수득한 DNA를 주형으로 제 10항의 조성물을 사용하여 실시간-PCR을 수행하고 그 반응 결과를 표준곡선에 대입하여 유전자 카피수를 산출하는 단계; 및(f) 상기 (e) 단계에서 산출한 유전자 카피수를 계산식 2에 대입하여 유전자 혼입율을 측정하는 단계를 포함하는 대상 농작물 시료 내 도입유전자의 혼입율 정량방법(계산식 1)보정계수 = 도입유전자 또는 도입유전자 인접서열 부위 카피수/내재유전자 카피수(계산식 2)도입유전자 도입율(%) =(도입유전자 또는 도입유전자 인접서열 부위 카피수/내재유전자 카피수)/보정계수 X 100
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(a) 제 7항의 플라스미드를 카피수 별로 희석하여 DNA 표준물질로 하는 단계; (b) 상기 (a) 단계에서 수득한 표준물질을 주형으로 제 10항의 조성물을 사용하여 실시간-PCR을 수행하여 유전자 카피수를 나타내는 표준곡선을 작성하는 단계;(c) 대상 농작물 시료 또는 이의 가공품으로부터 수득한 DNA를 주형으로 제 10항의 조성물을 사용하여 실시간-PCR을 수행하고 그 반응 결과를 표준곡선에 대입하여 유전자 카피수를 산출하는 단계; 및(d) 상기 (c) 단계에서 산출한 유전자 카피수를 계산식 3에 대입하여 도입율을 측정하여 그 값이 1인 경우 동형접합체, 0
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농업생명자원부 생물안전성과 국립농업과학원 GMO 유전정보 조사 분석 및 판별기술 개발 연구 GM 작물의 판별기술 개발