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효소역학을 이용한 산화형·환원형 글루타치온의 정량적고속측정방법

  • 기술번호 : KST2015170334
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 트리펩타이드 수황(tripeptide sulfhydryl) 화합물인 글루타치온(Glutathione : γ-glutamylcysteinylglycine)의 신규한 정량적 측정방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 5,5'-디치오비스(2-니트로벤조산)(5,5'-dithiobis(2-ni-trobenzoic acid), DTNB)와 같은 산화제와 글루타치온 환원효소(glutathione reductase)를 이용한 글루타치온 분석 방법에 N-에틸말레이마이드(N-ethylmaleimide, NEM)와 같은 수황화물 불활성화제 처리 과정을 도입하여 환원형 글루타치온(GSH)과 산화형 글루타치온(GSSG)을 동시에 정확히 정량하고, 다중 홈 플레이트(multi well plate)를 사용하여 다량의 시료를 한번에 손쉬운 방법으로 측정할 수 있는 분석 시스템의 개발에 관한 것이다.
Int. CL C12Q 1/00 (2006.01)
CPC C12Q 1/26(2013.01) C12Q 1/26(2013.01)
출원번호/일자 1020000005954 (2000.02.09)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2001-0078585 (2001.08.21) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2000.02.09)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 한미영 대한민국 대전광역시유성구
2 박영미 대한민국 서울특별시양천구
3 최은미 대한민국 경기도안양시동안구
4 최진희 대한민국 서울특별시서대문구
5 김성훈 대한민국 서울특별시강남구
6 백선희 대한민국 서울특별시강서구
7 이상섭 대한민국 대전광역시서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2000.02.09 수리 (Accepted) 1-1-2000-0023133-39
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2001.01.17 수리 (Accepted) 4-1-2001-0006012-52
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2002.02.27 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2002.03.26 수리 (Accepted) 9-1-2002-0040497-19
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2002.06.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2002-0234289-51
6 의견서
Written Opinion		 2002.08.21 수리 (Accepted) 1-1-2002-0270005-00
7 명세서 등 보정서
Amendment to Description, etc.		 2002.08.21 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2002-0270004-54
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2003.01.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2003-0027256-90
9 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2003.05.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2003-0177913-18
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2005.05.09 수리 (Accepted) 4-1-2005-0016474-59
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2008.04.10 수리 (Accepted) 4-1-2008-5054980-73
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
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번호 청구항
1 1

산화제(oxidizing agent)와 글루타치온 환원효소(glutathione reductase)를 이용한 효소학적 글루타치온 측정방법에 GSH 불활성화제(trapping agent)처리 과정을 도입한 산화형·환원형 글루타치온(GSH·GSSG)의 정량적 측정방법

2 2

제 1항에 있어서, 산화제는 5,5'-디치오비스(2-니트로벤산)(5,5'-dithiobis

-(2-nitrobenzoic acid), DTNB)인 것을 특징으로 하는 산화형·환원형 글루타치온의 정량적 측정방법

3 3

제 1항에 있어서, GSH 불활성화제는 N-에틸말레이마이(N-ethylmaleimide,

NEM)인 것을 특징으로 하는 산화형·환원형 글루타치온의 정량적 측정방법

4 4

제 1항에 있어서,

ⅰ) 조직시료를 적출하여 대사작용을 중지시킨 균질액을 준비하는 단계 ;

ⅱ) GSH 불활성화제를 첨가하여 환원형 글루타치온을 불활성화 시키는 단계 ;

ⅲ) 글루타치온 환원효소와 산화제 혼합액을 첨가하는 단계 ; 및,

ⅳ) 분광광도계로 흡광도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 산화형·환원형 글루타치온의 정량적 측정방법

5 5

제 4항에 있어서, 단계 ⅰ)의 대사작용을 중지시킨 균질액은 조직 적출 직후 -70℃에서 동결건조 시키고, 5% PCA(perchloric acid)를 첨가하여 균질화시키는 것을 특징으로 하는 글루타치온의 정량적 측정방법

6 6

제 1항에 있어서, 산화형·환원형 글루타치온의 정량적 측정방법은 다중 홈 플레이트(multi well plate)를 이용하는 것을 특징으로 하는 글루타치온의 정량적 측정방법

7 7

제 6항에 있어서,

ⅰ) 인산염 완충용액, 증류수 및 NADPH를 포함하는 혼합용액을 다중 홈 플레이트에 분주하는 단계 ;

ⅱ) 각 홈에 NEM 처리 시료 및 NEM 미처리 시료를 분주하여 글루타치온 환원효소 및 DTNB를 포함하는 혼합용액을 가하여 반응시키는 단계 ; 및,

ⅲ) 상기 반응액을 마이크로 플레이트 분석기를 이용하여 분광광도계로 흡광도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 산화형·환원형 글루타치온의 정량적 측정방법

8 8

제 4항 및 7항에 있어서, 분광광도계로 글루타치온의 흡광도를 측정하는 파장은 405 nm인 것을 특징으로 하는 산화형·환원형 글루타치온의 정량적 측정방법

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
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DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN1392901 CN 중국 DOCDBFAMILY
2 JP2004518426 JP 일본 DOCDBFAMILY
3 JP2004518426 JP 일본 DOCDBFAMILY
4 JP2004518426 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 WO02103036 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
6 WO02103036 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
국가 R&D 정보가 없습니다.