요약 | 본 발명은 목적 단백질이 폴딩(folding)되어 활성을 나타내는 부피가 큰 단백질 특히, 내부에 막전위 도메인이 존재하는 단백질인 경우에 산성 또는 염기성의 pI 값 및 높은 친수도 값을 가지는 선도 폴리펩티드를 연결하거나, 또는 목적 단백질의 N-말단에 존재하는 수 개의 아미노산을 산성 또는 염기성 pI 값과 높은 친수도를 갖는 아미노산으로 대체시킴으로써 상기와 같은 목적 단백질의 수용성 발현 및 분비를 향상시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 재조합 단백질의 불용성 침전을 방지하고, 세포질 밖 또는 페리플라즘으로의 재조합 단백질의 분비 효율을 향상시킴으로써, 재조합 외래단백질의 생산에 유용하게 사용할 수 있을 뿐만 아니라, 유용 치료용 단백질의 이동(transduction)에까지 유용하게 이용될 수 있다. |
---|---|
Int. CL | C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) |
CPC | |
출원번호/일자 | 1020100043855 (2010.05.11) |
출원인 | 대한민국(관리부서:국립수산과학원) |
등록번호/일자 | 10-1184011-0000 (2012.09.12) |
공개번호/일자 | 10-2011-0124471 (2011.11.17) 문서열기 |
공고번호/일자 | (20120927) 문서열기 |
국제출원번호/일자 | |
국제공개번호/일자 | |
우선권정보 | |
법적상태 | 등록 |
심사진행상태 | 수리 |
심판사항 | |
구분 | 신규 |
원출원번호/일자 | |
관련 출원번호 | |
심사청구여부/일자 | Y (2010.05.11) |
심사청구항수 | 21 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 대한민국(관리부서:국립수산과학원) | 대한민국 | 부산광역시 기장군 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 이상준 | 대한민국 | 부산광역시 수영구 |
2 | 김영옥 | 대한민국 | 부산광역시 남구 |
3 | 남보혜 | 대한민국 | 부산광역시 남구 |
4 | 공희정 | 대한민국 | 부산광역시 해운대구 |
5 | 김경길 | 대한민국 | 부산광역시 연제구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 김남식 | 대한민국 | 서울특별시 서초구 남부순환로***길 *-*, *층 (양재동, 가람빌딩)(율민국제특허법률사무소) |
2 | 한윤호 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **(삼성동) 명지빌딩, *층(선정국제특허법률사무소) |
3 | 박기원 | 대한민국 | 서울 강남구 언주로 **길 **, *층, **층, **층, **층(도곡동, 대림아크로텔)(리앤목특허법인) |
4 | 양기혁 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **(삼성동) 명지빌딩, *층(선정국제특허법률사무소) |
5 | 이인행 | 대한민국 | 서울특별시 서초구 남부순환로***길 *-*, *층 (양재동, 가람빌딩)(율민국제특허법률사무소) |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 대한민국 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2010.05.11 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0301577-86 |
2 | [대리인사임]대리인(대표자)에 관한 신고서 [Resignation of Agent] Report on Agent (Representative) |
2010.11.01 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0709792-43 |
3 | [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서 [Appointment of Agent] Report on Agent (Representative) |
2010.11.15 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0742375-36 |
4 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2011.01.19 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
5 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2011.02.14 | 수리 (Accepted) | 9-1-2011-0007791-19 |
6 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2011.06.23 | 수리 (Accepted) | 4-1-2011-5128289-93 |
7 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2011.11.01 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0639459-60 |
8 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief) |
2012.01.02 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0000417-32 |
9 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief) |
2012.02.01 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0083560-21 |
10 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2012.02.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0169557-88 |
11 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2012.02.29 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2012-0169558-23 |
12 | 수수료 반환 안내서 Notification of Return of Official Fee |
2012.03.07 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 1-5-2012-0023488-39 |
13 | 등록결정서 Decision to grant |
2012.08.16 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0475002-52 |
14 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.11.06 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5245973-82 |
번호 | 청구항 |
---|---|
1 |
1 1) 프로모터; 및,2) 상기 프로모터에 작동가능하도록 연결된 선도 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드로 구성된 유전자 컨스트럭트를 포함하는 발현벡터에 있어서, 상기 선도 폴리펩티드는 신호서열의 N-말단으로부터 1 내지 10개의 아미노산으로 구성된 pI 값이 2 |
2 |
2 제 1항에 있어서, 2)의 선도 폴리펩티드는 신호서열 단편의 변이체 및 동일한 1개 내지 30개의 친수성 아미노산이 순차적으로 연결되어 이루어지고, 상기 신호서열 단편의 변이체는 상기 신호서열 단편의 N-말단으로부터 2번째 및 3번째 아미노산이 각각 Asp 또는 Glu 중 어느 하나로 치환된 것이고, 상기 친수성 아미노산은 Arg 또는 Lys 중 어느 하나인 발현벡터 |
3 |
3 삭제 |
4 |
4 제 1항에 있어서, 2)의 선도 폴리펩티드는 서열번호 101번, 서열번호 102번 또는 서열번호 103번으로 기재되는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 발현벡터 |
5 |
5 제 1항에 있어서, 2)의 선도 폴리펩티드는 Met 및 1개 내지 30개의 친수성 아미노산이 순차적으로 연결되어 이루어진 것을 특징으로 하는 발현벡터 |
6 |
6 제 5항에 있어서, 상기 친수성 아미노산은 Asp 또는 Glu 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 발현벡터 |
7 |
7 제 1항에 있어서, 2)의 선도 폴리펩티드는 서열번호 106번 또는 서열번호 107번으로 기재되는 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 발현벡터 |
8 |
8 제 1항에 있어서, 상기 폴딩(folding)되는 활성 단백질은 GFP(green fluorescent protein)인 것을 특징으로 하는 발현벡터 |
9 |
9 1) 신호서열의 N-말단으로부터 1 내지 10개의 아미노산으로 구성된 N-말단 pI 값이 2 |
10 |
10 제 9항에 있어서, 상기 내부에 하나 이상의 막전위 도메인이 존재하고 폴딩되는 활성 단백질은 전장인 것을 특징으로 하는 방법 |
11 |
11 제 10항에 있어서, 단계 1)의 선도 폴리펩티드는 신호서열 단편의 변이체 및 1 내지 30개의 친수성 아미노산이 순차적으로 연결되어 이루어지고, 상기 변이체는 상기 신호서열 단편의 N-말단으로부터 2번째 및 3번째 아미노산이 각각 Asp 또는 Glu 중 어느 하나로 치환된 것이고, 상기 친수성 아미노산은 Arg 또는 Lys 중 어느 하나인 방법 |
12 |
12 삭제 |
13 |
13 제 10항에 있어서, 단계 1)의 선도 폴리펩티드는 Met 및 1 내지 30개의 친수성 아미노산이 순차적으로 연결되어 이루어진 것을 특징으로 하는 방법 |
14 |
14 제 13항에 있어서, 상기 친수성 아미노산은 Asp 또는 Glu 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법 |
15 |
15 제 10항에 있어서, 상기 내부에 하나 이상의 막전위 도메인이 존재하고 폴딩(folding)되는 활성 단백질은 GFP(green fluorescent protein)인 것을 특징으로 하는 방법 |
16 |
16 제 9항에 있어서, 상기 내부에 하나 이상의 막전위 도메인이 존재하고 폴딩되는 활성 단백질은 상기 단백질의 N-말단에 존재하는 1개 내지 30개의 아미노산이 결실된 것을 특징으로 하는 방법 |
17 |
17 제 16항에 있어서, 단계 1)의 선도 폴리펩티드는 Met 및 1개 내지 30개의 Glu로 구성된 것을 특징으로 하는 방법 |
18 |
18 제 16항에 있어서, 상기 내부에 하나 이상의 막전위 도메인이 존재하고 폴딩(folding)되는 활성 단백질은 GFP(green fluorescent protein)인 것을 특징으로 하는 방법 |
19 |
19 제 10항 또는 제 16항에 있어서, 추가적으로 단계 5)의 선별된 수용성 발현이 가장 높은 형질전환체의 배양액으로부터 내부에 하나 이상의 막전위 도메인이 존재하고 폴딩되는 활성 단백질을 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법 |
20 |
20 1) 프로모터; 및,2) 상기 프로모터에 작동가능하도록 연결된 선도 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드로 구성된 유전자 컨스트럭트를 포함하는 발현벡터에 있어서, 상기 선도 폴리펩티드는 메티오닌에 6 내지 30개의 친수성 아미노산이 연결되어 구성되고, 그 pI 값이 9 |
21 |
21 제 20항에 있어서, 2)의 선도 폴리펩티드는 서열번호 108번, 서열번호 112번 또는 서열번호 114번으로 기재되는 아미노산 서열 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 발현벡터 |
22 |
22 1) 메티오닌 및 6 내지 30개의 친수성 아미노산으로 구성되고, 그 pI 값이 9 |
23 |
23 제 22항에 있어서, 2)의 선도 폴리펩티드는 서열번호 108번, 서열번호 112번 또는 서열번호 114번으로 기재되는 아미노산 서열 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법 |
24 |
24 삭제 |
25 |
25 삭제 |
26 |
26 삭제 |
27 |
27 삭제 |
28 |
28 삭제 |
29 |
29 삭제 |
30 |
30 삭제 |
31 |
31 삭제 |
지정국 정보가 없습니다 |
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순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
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1 | CN101374949 | CN | 중국 | FAMILY |
2 | CN101952438 | CN | 중국 | FAMILY |
3 | EP01981979 | EP | 유럽특허청(EPO) | FAMILY |
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14 | WO2007089093 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
15 | WO2007089093 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
16 | WO2009069862 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
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13 | WO2011142529 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | DOCDBFAMILY |
국가 R&D 정보가 없습니다. |
---|
특허 등록번호 | 10-1184011-0000 |
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표시번호 | 사항 |
---|---|
1 |
출원 연월일 : 20100511 출원 번호 : 1020100043855 공고 연월일 : 20120927 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20120816 청구범위의 항수 : 21 유별 : C12N 15/63 발명의 명칭 : 폴딩되는 큰 활성 단백질의 수용성 발현 존속기간(예정)만료일 : |
순위번호 | 사항 |
---|---|
1 |
(승계권리자) 대한민국 |
1 |
(관리청) 특허청장 |
1 |
(승계청) 국립수산과학원장 |
제 1 - 20 년분 | 금 액 | 0 원 | 2012년 09월 12일 | 납입 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | [특허출원]특허출원서 | 2010.05.11 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0301577-86 |
2 | [대리인사임]대리인(대표자)에 관한 신고서 | 2010.11.01 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0709792-43 |
3 | [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서 | 2010.11.15 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0742375-36 |
4 | 선행기술조사의뢰서 | 2011.01.19 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
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6 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2011.06.23 | 수리 (Accepted) | 4-1-2011-5128289-93 |
7 | 의견제출통지서 | 2011.11.01 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0639459-60 |
8 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2012.01.02 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0000417-32 |
9 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2012.02.01 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0083560-21 |
10 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2012.02.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0169557-88 |
11 | [명세서등 보정]보정서 | 2012.02.29 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2012-0169558-23 |
12 | 수수료 반환 안내서 | 2012.03.07 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 1-5-2012-0023488-39 |
13 | 등록결정서 | 2012.08.16 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0475002-52 |
14 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.11.06 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5245973-82 |
기술정보가 없습니다 |
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과제고유번호 | 1545002123 |
---|---|
세부과제번호 | 10-BT-01 |
연구과제명 | 수산생물 유용유전자 개발 및 산업화 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 농림수산식품부 |
연구관리전문기관명 | 농림수산식품부 |
연구주관기관명 | 국립수산과학원 |
성과제출연도 | 2010 |
연구기간 | 200201~201112 |
기여율 | 1 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1545002930 |
---|---|
세부과제번호 | R2011017 |
연구과제명 | 친환경 수산자재 및 어구어법 개발 |
성과구분 | 등록 |
부처명 | 농림수산식품부 |
연구관리전문기관명 | 농림수산식품기술기획평가원 |
연구주관기관명 | 국립수산과학원 기반연구부 시스템공학과 |
성과제출연도 | 2011 |
연구기간 | 200701~201612 |
기여율 | 1 |
연구개발단계명 | 응용연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
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