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앵귈라 뱀장어 종들의 판별을 위한 DNA 마커

  • 기술번호 : KST2015207268
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명의 뱀장어 유전자 감별법은 뱀장어 종간의 다형성 및 특정 서열의 반복횟수를 PCR을 이용하여 정확하게 구분할 수 있으므로 미량의 뱀장어 조직을 이용하여 간편하고 신속한 방법으로 국내산 실뱀장어와 외국산 실뱀장어를 정확하게 판별할 수 있다. 뱀장어, 유전자 감별법, RAPD, SCAR, PCR, 다형성
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/6844(2013.01)
출원번호/일자 1020090056632 (2009.06.24)
출원인 대한민국(관리부서:국립수산과학원)
등록번호/일자 10-1047322-0000 (2011.07.01)
공개번호/일자 10-2010-0138208 (2010.12.31) 문서열기
공고번호/일자 (20110713) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.06.24)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국(관리부서:국립수산과학원) 대한민국 부산광역시 기장군

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김우진 대한민국 부산시 사상구
2 김경길 대한민국 부산시 연제구
3 김영옥 대한민국 부산시 남구
4 남보혜 대한민국 부산시 남구
5 공희정 대한민국 부산시 해운대구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국 대한민국
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.06.24 수리 (Accepted) 1-1-2009-0384172-53
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2010.12.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.01.14 수리 (Accepted) 9-1-2011-0002239-77
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2011.04.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0204707-19
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.06.02 수리 (Accepted) 1-1-2011-0417463-56
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.06.02 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0417464-02
7 등록결정서
Decision to grant
2011.06.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0332739-83
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.06.23 수리 (Accepted) 4-1-2011-5128289-93
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.11.06 수리 (Accepted) 4-1-2020-5245973-82
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번호 청구항
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서열번호 9(A1F)로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10(A1R)으로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍, 서열번호 11(A2F)로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 12(A2R)로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍, 서열번호 13(A3F)으로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 14(A3R)로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍, 상기 프라이머 쌍으로부터 수득한 PCR 산물을 절단하기 위한 제한효소, 및 뱀장어 내재유전자 증폭용 프라이머 쌍을 포함하는 앵귈라 뱀장어 종의 판별용 키트
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제 19항에 있어서, 상기 제한효소는 TaqI, MaeI 및 Tru9I인 것을 특징으로 하는 앵귈라 뱀장어 종의 판별용 키트
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1) 뱀장어로부터 DNA를 분리하는 단계; 2) 상기 DNA를 주형으로 제19항의 키트를 사용하여 PCR을 수행하는 단계; 3) 단계 2)의 PCR 산물을 대상으로, ⅰ) 서열번호 9로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10으로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여, 단계 2)의 PCR 산물 중 290 bp 또는 303 bp의 PCR 산물의 길이 또는 염기서열을 분석; ⅱ) 서열번호 11로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 12로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍, 및 뱀장어의 내재유전자 증폭용 프라이머 쌍에 관하여, 단계 2)의 PCR 산물의 증폭 여부 및 길이를 분석; 및, ⅲ) 서열번호 13으로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 14로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여, 단계 2)의 PCR 산물을 Tru9Ⅰ으로 절단하여 DNA 절편의 길이를 분석하는 단계; 및, 4) 상기 분석 결과로부터 ⅳ) 서열번호 9로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10으로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여: 길이가 290 bp이거나 염기서열이 서열번호 15로 구성된 경우, 앵귈라 자포니카로; 길이가 303 bp이거나 염기서열이 서열번호 16으로 구성된 경우, 앵귈라 바이칼라 바이칼라로; 길이가 303 bp이거나 염기서열이 서열번호 17로 구성된 경우, 앵귈라 로스트라타로; 및, 길이가 303 bp이거나 염기서열이 서열번호 18로 구성된 경우, 앵귈라 앵귈라로 판별; ⅴ) 서열번호 11로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 12로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍, 및 뱀장어의 내재유전자 증폭용 프라이머 쌍에 관하여: 뱀장어의 내재유전자만 증폭되었을 경우, 앵귈라 자포니까로; 및 길이가 243 bp인 경우, 앵귈라 바이칼라 바이칼라, 앵귈라 로스트라타 또는 앵귈라 앵귈라로 판별; 및 ⅵ) 서열번호 13으로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 14로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여: DNA 절편의 길이가 71 bp, 34 bp 및 25 bp인 경우, 앵귈라 로스트라타로; DNA 절편의 길이가 96 bp 및 34 bp인 경우, 앵귈라 자포니카, 앵귈라 바이칼라 바이칼라 또는 앵귈라 앵귈라로 판별하는 단계를 포함하는, 앵귈라 뱀장어 종의 판별 방법
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제 22항에 있어서, 서열번호 9로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10으로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여, 상기 단계 3) 이후에 3-1) 상기에서 분석한 DNA를 TaqI으로 절단하는 단계; 3-2) 절단 여부 및 DNA 절편의 길이를 분석하는 단계; 3-3) 상기 분석 결과로부터 ⅰ) 절단되지 않으면 앵귈라 자포니카로, ⅱ) DNA 절편의 길이가 171 bp 및 132 bp인 경우, 앵귈라 바이칼라 바이칼라, 앵귈라 로스트라타, 또는 앵귈라 앵귈라로 판별하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 앵귈라 뱀장어 종의 판별 방법
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제 22항에 있어서, 서열번호 9로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10으로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여, 상기 단계 3)이후에 3-1) 상기에서 분석한 DNA를 MaeI으로 절단하는 단계; 3-2) 절단 여부 및 DNA 절편의 길이를 분석하는 단계; 3-3) 상기 분석 결과로부터 ⅰ) 절단되지 않으면 앵귈라 자포니카, 앵귈라 로스트라타, 또는 앵귈라 앵귈라로, ⅱ) DNA 절편의 길이가 274 bp 및 29 bp인 경우, 앵귈라 바이칼라 바이칼라로 판별하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 앵귈라 뱀장어 종의 판별 방법
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제 22항에 있어서, 서열번호 11로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 12로 기재되는 역방향 프라이머로 구성된 프라이머 쌍에 관하여, 상기 단계 3) 이후에 3-1) 서열분석을 추가로 실시하는 단계; 및, 3-2) 상기 분석 결과로부터, ⅰ) 염기서열이 서열번호 19로 구성된 경우, 앵귈라 바이칼라 바이칼라로; ⅱ) 염기서열이 서열번호 20으로 구성된 경우, 앵귈라 로스트라타로; 및, ⅲ) 염기서열이 서열번호 21로 구성된 경우, 앵귈라 앵귈라로 판별하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 앵귈라 뱀장어 종의 판별 방법
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