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하기의 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유전자의 핵산 서열의 올리고뉴클레오티드 또는 그의 상보가닥 분자가 집적된 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인용 마이크로어레이(microarray):서열번호 1로 기재되는 유전자(Acetyl-CoA hydrolase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(L-Asparaginase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(Cadherin EGF LAG seven-pass G-type receptor), 서열번호 4로 기재되는 유전자(Calpain small subunit 1), 서열번호 5로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(Dynactin subunit 1), 서열번호 7로 기재되는 유전자(FAD-dependent oxidoreductase), 서열번호 8로 기재되는 유전자(Ficolin), 서열번호 9로 기재되는 유전자(Myosin light polypeptide 6), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(Phosphoserine aminotransferase), 서열번호 12로 기재되는 유전자(polyketide synthase), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 12A), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Pyrroline-5-carboxylate reductase), 서열번호 15로 기재되는 유전자(Transferrin receptor protein 2), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(Alcohol dehydrogenase 1), 서열번호 17로 기재되는 유전자(Aquaporin TIP2-3), 서열번호 18로 기재되는 유전자(Deoxyribose-phosphate aldolase), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Guanidinoacetate N-methyltransferase) 또는 서열번호 20으로 기재되는 유전자(Protein tyrosine phosphatase type IV A3)
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제 1항에 있어서, 상기 유전자는 큰수지맨드라미(Dendronephthya gigantea)로부터 유래되는 것을 특징으로 하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인용 마이크로어레이
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제 1항에 있어서, 상기 산성화된 해수는 pH 6 내지 7
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1) 산성화된 해수에 노출된 실험군인 큰수지맨드라미와 대조군인 큰수지맨드라미에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA에서 cDNA를 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각각 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 마이크로어레이와 혼성화시키는 단계;4) 반응한 마이크로어레이를 분석하는 단계; 및5) 분석한 데이터에서 제 1항의 마이크로어레이에 집적된 유전자 발현정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인 방법
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제 4항에 있어서, 단계 2)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인 방법
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1) 산성화된 해수에 노출된 실험군인 큰수지맨드라미와 대조군인 큰수지맨드라미에서 각각 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 RNA를 주형으로 하고, 하기 각각의 유전자에 상보적이며 유전자 증폭이 가능한 프라이머 쌍을 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계:서열번호 1로 기재되는 유전자(Acetyl-CoA hydrolase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(L-Asparaginase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(Cadherin EGF LAG seven-pass G-type receptor), 서열번호 4로 기재되는 유전자(Calpain small subunit 1), 서열번호 5로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(Dynactin subunit 1), 서열번호 7로 기재되는 유전자(FAD-dependent oxidoreductase), 서열번호 8로 기재되는 유전자(Ficolin), 서열번호 9로 기재되는 유전자(Myosin light polypeptide 6), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(Phosphoserine aminotransferase), 서열번호 12로 기재되는 유전자(polyketide synthase), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 12A), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Pyrroline-5-carboxylate reductase), 서열번호 15로 기재되는 유전자(Transferrin receptor protein 2), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(Alcohol dehydrogenase 1), 서열번호 17로 기재되는 유전자(Aquaporin TIP2-3), 서열번호 18로 기재되는 유전자(Deoxyribose-phosphate aldolase), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Guanidinoacetate N-methyltransferase) 또는 서열번호 20으로 기재되는 유전자(Protein tyrosine phosphatase type IV A3); 및3) 단계 2)의 유전자 산물을 대조군과 비교하여 발현 정도를 확인하는 단계를 포함하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인 방법
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제 1항의 마이크로어레이를 포함하는 것을 특징으로 하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인용 키트(kit)
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제 7항에 있어서, 상기 산성화된 해수는 pH 6 내지 7
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제 7항에 있어서, 스트렙타비딘-알칼리 탈인화효소 접합물질(streptavidin-like phosphatase conjugate), 화학형광물질(chemifluorescent) 및 화학발광물질(chemiluminescent)로 이루어진 형광물질 군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인용 키트
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제 7항에 있어서, 혼성화에 사용되는 완충용액, RNA로부터 cDNA를 합성하기 위한 역전사효소, dNTP 및 rNTP(사전 혼합형 또는 분리 공급형), 표식시약, 및 세척 완충용액으로 이루어진 반응시약 군으로부터 선택되는 어느 하나를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인용 키트
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하기 각각의 유전자에 상보적이고, 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 포함하는 산성화된 해수에 대한 노출 여부 확인용 키트:서열번호 1로 기재되는 유전자(Acetyl-CoA hydrolase), 서열번호 2로 기재되는 유전자(L-Asparaginase), 서열번호 3으로 기재되는 유전자(Cadherin EGF LAG seven-pass G-type receptor), 서열번호 4로 기재되는 유전자(Calpain small subunit 1), 서열번호 5로 기재되는 유전자(DNA-directed RNA polymerase III subunit), 서열번호 6으로 기재되는 유전자(Dynactin subunit 1), 서열번호 7로 기재되는 유전자(FAD-dependent oxidoreductase), 서열번호 8로 기재되는 유전자(Ficolin), 서열번호 9로 기재되는 유전자(Myosin light polypeptide 6), 서열번호 10으로 기재되는 유전자(Phosphoenolpyruvate carboxykinase), 서열번호 11로 기재되는 유전자(Phosphoserine aminotransferase), 서열번호 12로 기재되는 유전자(polyketide synthase), 서열번호 13으로 기재되는 유전자(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 12A), 서열번호 14로 기재되는 유전자(Pyrroline-5-carboxylate reductase), 서열번호 15로 기재되는 유전자(Transferrin receptor protein 2), 서열번호 16으로 기재되는 유전자(Alcohol dehydrogenase 1), 서열번호 17로 기재되는 유전자(Aquaporin TIP2-3), 서열번호 18로 기재되는 유전자(Deoxyribose-phosphate aldolase), 서열번호 19로 기재되는 유전자(Guanidinoacetate N-methyltransferase) 또는 서열번호 20으로 기재되는 유전자(Protein tyrosine phosphatase type IV A3)
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제 11항에 있어서, 상기 산성화된 해수는 pH 6 내지 7
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