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기판;상기 기판 상에 형성된 시료용액이 외부로부터 유입되는 유입구; 상기 유입구와 연결되어 유입된 시료용액을 수용하는 제 1 유로;상기 제 1 유로와 연결된 제 2 유로; 상기 제 2 유로와 연결된 배출구를 포함하는 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치로서,상기 제 2 유로 표면은 코팅되어 있고;상기 코팅 상에 프라이머가 고정되고;상기 고정된 프라이머에는 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트가 결합되어 있으며,상기 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트는 상기 프라이머에 상보적으로 결합하는 프라이머 결합부, 상기 프라이머 결합부의 일 말단에 결합된 제 1 템플레이트 내 상보적인 결합 부위-제 1 표적 돌연변이 유전자 결합 부위, 및 상기 프라이머 결합부의 다른 말단에 결합된 제 2 템플레이트 내 상보적인 결합 부위-제 2 표적 돌연변이 유전자 결합 부위를 포함하는, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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제1항에 있어서, 상기 제 2 유로는 1 내지 20개인 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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제1항에 있어서, 상기 제 2 유로는 2 내지 20개이며, 제 1 유로의 말단에서 각각의 제 2 유로가 분지되고,각각의 제 2 유로 상에 고정된 프라이머에 결합된 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트는 서로 같거나 다른 돌연변이 유전자에 결합하는, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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4 |
4
제1항에 있어서, 상기 돌연변이 유전자는 암 특이적인 돌연변이 유전자인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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5
제4항에 있어서, 상기 암 특이적인 돌연변이 유전자는 EGFR(epidermal growth factor receptor) 19번 엑손 결실이 일어난 유전자인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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6
제5항에 있어서, 상기 EGFR 19번 엑손 결실이 일어난 유전자는 서열번호 5로 기재되는 유전자인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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7
제1항에 있어서, 상기 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트의 제 1 표적 돌연변이 유전자 결합 부위 및 제 2 표적 돌연변이 유전자 결합 부위는 돌연변이 유전자에만 상보적으로 결합하고 정상 유전자에는 결합하지 않는, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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8
제1항에 있어서, 상기 돌연변이 유전자는 정상 유전자와 비교하여 1 이상의 염기가 치환, 결실 또는 부가된 것인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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9
제1항에 있어서, 상기 표적 돌연변이 유전자는 점 돌연변이를 포함하는 유전자이고, 상기 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트의 제 1 표적 돌연변이 유전자 결합 부위 또는 제 2 표적 돌연변이 유전자 결합 부위의 말단 염기가 상기 점 돌연변이가 일어난 염기에 상보적으로 결합하는 것인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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10
제1항에 있어서, 상기 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트는 서열번호 6으로 기재되는 것인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치
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제1항의 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치;dNTP;리가아제; 등온 핵산 중합효소; 및추가 프라이머를 포함하는, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
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제11항에 있어서, 상기 추가 프라이머는 상기 표적 돌연변이 유전자 검출용 템플레이트의 프라이머 결합부의 전체 서열, 또는 10~25개 염기 길이의 일부 서열인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
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14
제11항에 있어서,상기 리가아제는 T7 리가아제 또는 써클리가아제™(CircLigase™)인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
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제11항에 있어서,상기 등온 핵산 중합효소는 phi 29 폴리머라제인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
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제11항에 있어서,상기 키트는 디티오트레이톨(DTT) 또는 파이로포스파타제(phyrophosphatase)를 더 포함하는 것인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
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제11항에 있어서,상기 키트는 염색 시약, 고염 용액(high salt solution), 또는 형광 시약을 더 포함하는 것인, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
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a) 제1항의 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치를 제공하는 단계;b) 시료 용액을 상기 미세 유동 장치의 유입구로 주입하는 단계; 및c) 상기 미세 유동 장치의 제 2 유로에 dNTP, 리가아제, 등온 핵산 중합효소, 및 추가 프라이머를 첨가하는 단계를 포함하는, 표적 돌연변이 유전자 검출용 미세 유동 장치를 이용하여 표적 돌연변이 유전자를 검출하는 방법
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제18항에 있어서, 상기 표적 돌연변이 유전자 검출방법은 추가 프라이머를 첨가함으로써 2차 증폭이 일어나는 것인, 표적 돌연변이 유전자를 검출하는 방법
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제18항에 있어서, 상기 표적 돌연변이 유전자는 동물, 동물, 식물, 세균, 바이러스, 진균, 환경에서 유래된 것인, 표적 돌연변이 유전자를 검출하는 방법
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제18항에 있어서, 상기 표적 돌연변이 유전자는 조류독감, 사스(SARS), 대장균 O157:H7(Escherichia coli O157:H7), 결핵(Mycobacterium tuberculosis), 탄저병(Bacillus anthracis), 폐렴(Streptococcus pneumonia), 말라리아(Plasmodium), 살모넬라(Salmonella), 간염(Hepatitis A, B, C, D 또는 E virus), 야토병균(Francisella tularensis), 페스트균(Yersinia pestis), 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 및 출혈열(Ebola virus), 및 메르스 코로나 바이러스(MERS-Cov virus)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 이상으로부터 유래된 표적 돌연변이 유전자인, 표적 돌연변이 유전자를 검출하는 방법
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제18항에 있어서,상기 표적 돌연변이 유전자는 EGFR 엑손 19번 결실이 일어난 유전자인, 표적 돌연변이 유전자를 검출하는 방법
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