| 1 |
1
에스트로겐 수용체의 리간드 결합 부위 (ER LBD)와 상호작용하는 공동조절인자를 코딩하는 유전자가 λCI 단백질을 코딩하는 유전자와 접합된 염기서열을 포함하는 플라스미드 A; 및에스트로겐 수용체의 리간드 결합 부위 (ER LBD)를 코딩하는 유전자가 αNTD 단백질을 코딩하는 유전자와 접합된 플라스미드 B에 의해서 형질전환 (transformed)되고,상기 에스트로겐 수용체의 리간드 결합 부위 (ER LBD)와 상호작용하는 공동조절인자는 RIP140 단백질 또는 TIF2 단백질인,에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 2 |
2
제1항에 있어서, 상기 RIP140 또는 TIF2 단백질을 코딩하는 유전자, 또는 상기 ER LBD를 코딩하는 유전자는, 인간 게놈 DNA로부터 mRNA를 전사하고, 상기 mRNA에 대한 스플라이싱 과정을 통해서 인트론이 제거된 mRNA를 제조한 다음, 상기 인트론이 제거된 mRNA에 대한 역전사 과정을 통해서 합성된 cDNA를 주형으로 하여 PCR 증폭된 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 3 |
3
제1항에 있어서,상기 TIF2 단백질을 코딩하는 유전자의 3' 말단에는 상기 TIF2 단백질 및 상기 λCI 단백질의 발현을 확인하기 위한 FLAG 서열이 접합된 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 4 |
4
제1항에 있어서,상기 RIP140 단백질을 코딩하는 유전자의 3' 말단에는 상기 RIP140 단백질 및 상기 λCI 단백질의 발현을 확인하기 위한 FLAG 서열이 접합된 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 5 |
5
제1항에 있어서,상기 플라스미드 A는 서열번호 1의 핵산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 6 |
6
제1항에 있어서,상기 에스트로겐 수용체의 리간드 결합 부위 (ER LBD)를 코딩하는 유전자의 3' 말단에는 상기 ER LBD 및 상기 αNTD 단백질의 발현을 확인하기 위한 FLAG 서열이 접합된 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 7 |
7
제1항에 있어서,상기 플라스미드 B는 서열번호 2의 핵산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 8 |
8
제1항에 있어서,상기 박테리아 균주는 대장균 (Escherichia coli) 균주, 고초균 (Bacillus subtilis), 바실러스 리체니포르미스 (Bacillus licheniformis) 및 유산균으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 균주인 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 9 |
9
제1항에 있어서,상기 에스트로겐성 화합물은 노레틸노드렐 (norethylnodrel), 5α-안드로스탄 (5α-androstane), 노닐페놀, 도데실페놀, 옥틸페놀, 비스페놀 A, 비스페놀 S, 비스페놀 F, 2-에틸헥실-4-히드록시벤조에이트 (2-ethylhexyl-4-hydroxybenzoate), 4,4'-디히드록시벤조페논, 2,4-디히드록시벤조페논, 디히드록시메톡시클로르올레핀, o,p'-DDT, 디히드록시메톡시클로르 (HPTE), 2',3',4',5'-테트라클로로-4-비페닐올, 노르디히드로구아이 아레틱산 (Nordihydroguaiaretic acid), 아우린 (aurin), 페놀프탈레인, 페놀 레드 및 그 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주
|
| 10 |
10
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 에스트로겐성 화합물의 검출능을 갖는 박테리아 균주를 제조하는 단계;상기 박테리아 균주에 에스트로겐성 화합물을 함유한 시료를 첨가하고 배양하는 단계;상기 배양된 박테리아 균주를 용균한 다음, 리포터 단백질의 발현 정도를 분석하는 단계를 포함하는 에스트로겐성 화합물의 검출방법
|
| 11 |
11
제10항에 있어서,상기 리포터 단백질은 베타-갈락토시다아제, 형광 발광 단백질 또는 항생제 내성 부여 단백질인 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출방법
|
| 12 |
12
제11항에 있어서,상기 형광 발광 단백질은 녹색 형광 단백질 (GFP), 황색 형광 단백질 (YFP), 적색 형광 단백질 (RFP) 또는 루시퍼라아제인 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출방법
|
| 13 |
13
제10항에 있어서,상기 리포터 단백질의 발현 정도는 UV-VIS 스펙트로포토미터에 의해서 수행하는 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출방법
|
| 14 |
14
제11항에 있어서,상기 베타-갈락토시다아제의 발현 정도는 상기 용균 이후에, 발색 시약으로서 O-니트로페닐-β-D-갈락토피라노시드 (O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside, ONPG)를 첨가해 주고, 발현 정도를 분석함으로써 수행하는 것을 특징으로 하는 에스트로겐성 화합물의 검출방법
|
