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기판의 표면에 세포층을 부착하는 단계;상기 세포층에 나노물질을 노출하고 염색하는 단계;상기 나노물질에 노출되고 염색된 세포층에 대하여 세포 이미지 분석 또는 유세포 분석을 수행하는 단계; 및 상기 분석 결과에 의해 세포사멸 정도를 정량화하는 단계를 포함하고,상기 나노물질에의 노출은 상기 기판의 표면에 부착된 세포층을 상향으로 노출시킬 수 있는 정립 노출장치와 상기 기판의 표면에 부착된 세포층을 하향으로 노출시킬 수 있는 역립 노출장치를 이용하는 것을 특징으로 하는 in vitro 나노물질 위해성 평가방법
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제1항에 있어서, 상기 세포층은 미세유체 세포칩, 멀티 웰 또는 슬라이드 글라스에 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 세포층은 단일 또는 다층의 세포층인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 정립 및 역립 노출장치를 이용하여, 세포배지에서 나노물질의 응집 또는 침전에 의해 발생하는 농도 구배에 따른 비균질성에 대한 농도보정을 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 정립 및 역립 노출장치는 폴리디메틸실록산(polydimethylsiloxane, PDMS), 폴리메틸메타클릴레이트(polymethylmethacrylate, PMMA), 폴리아크리레이트(polyacrylates), 폴리카보네이트(polycarbonates), 폴리시클릭 올레핀(polycyclic olefins), 폴리이미드(polyimides) 및 폴리우레탄(polyurethanes)으로 구성된 군에서 선택된 1종 이상의 고분자 재질로 제작되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 역립 노출장치는 배양된 세포층이 바닥을 향하도록 장착하여 나노물질에 노출시키고, 상기 노출된 나노물질의 농도보정에 이용되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 나노물질은 금나노, 은나노, SWCNT(single-walled carbon nanotube), MWCNT(multi-walled carbon nanotube),풀러린(fullerene, C60), 철 나노입자, 카본블랙, 이산화티탄, 산화알루미늄, 산화세륨, 산화아연, 이산화규소, 폴리스틸렌, 덴드리머, 나노클레이로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 나노물질인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서 상기 염색은 흡광염색법 또는 형광염색법을 이용하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
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제9항에 있어서, 상기 흡광염색은 MTT(3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)), MTS(5-(3-caroboxymethoxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt), WST(4-[3-(4-Iodophenyl)-2(4-nitrophenyl)-2H-5-tetrazolio]1,3-benzene disulfonate) 및 트립판 블루(trypanblue)로 이루어진 군으로부터 선택되는 흡광염료를 이용하여 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제9항에 있어서, 상기 형광염색은 유기형광 염료, 무기나노입자 또는 형광단백질을 이용하여 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 세포 이미지 분석은 MTT 분석을 포함하는 형광 및 흡광법을 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제15항에 있어서, 상기 세포 이미지 분석은 MTT 분석에 의해 세포 내 포마잔(formazan)이 형성되어 있는 채로 명시야(bright field) 이미지를 수득하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 유세포 분석은 산란광 데이터 및 형광신호 데이터를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제17항에 있어서, 상기 산란광 데이터는 나노 물질을 흡수(uptake)한 세포를 구별하는데 이용되고, 상기 형광신호 데이터는 상기 나노 물질을 흡수한 세포에 대한 세포사멸 정도를 평가하는데 이용되는 것을 특징으로 하는 방법
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