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카타닌 p60 단백질과 카타닌 p80 단백질, 이를 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합벡터와 이들로 동시에 형질전환된 대장균 및 이로부터 수용성 및 결정성을 갖는 변형된 카타닌 단백질의 제조방법(katanin p60 protein and katanin p80 protein, recombinant vector comprising the gene coding the protein, cells transformed by the vector and preparing method for modified katanin protein using the same)

  • 기술번호 : KST2018002806
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인간 카타닌 단백질을 안정적인 3차원 구조를 그대로 유지하도록 대장균 내 발현을 유도하고, 대량으로 카타닌 단백질을 생산할 수 있는 방법에 관한 것으로서, 인간 카타닌 단백질을 구성하는 p60 단백질과 p80 단백질에서 3차원 구조로 결합되는 부분의 유전자를 발굴하고, 이를 이용하여 3차원 구조의 수용성 카타닌 단백질을 대량 얻을 수 있다.이렇게 얻어진 3차원 구조의 수용성 카타닌 단백질은 미세소관의 조절에 있어 중요한 역할을 수행할 것으로 기대된다.
Int. CL C07K 14/47 (2016.10.01) C12N 15/70 (2016.10.01)
CPC C07K 14/47(2013.01) C07K 14/47(2013.01) C07K 14/47(2013.01)
출원번호/일자 1020160112357 (2016.09.01)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0025550 (2018.03.09) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.09.01)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김은경 미국 서울특별시 성북구
2 김은지 대한민국 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인충현 대한민국 서울특별시 서초구 동산로 **, *층(양재동, 베델회관)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2016.09.01 수리 (Accepted) 1-1-2016-0852388-49
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2017.04.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2017.06.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2017-0145416-06
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2017.10.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0728689-37
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2017.12.20 수리 (Accepted) 1-1-2017-1269272-01
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2018.01.22 수리 (Accepted) 1-1-2018-0069905-79
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2018.02.13 수리 (Accepted) 1-1-2018-0158856-95
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2018.03.19 수리 (Accepted) 1-1-2018-0271023-53
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2018.03.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0271022-18
10 등록결정서
Decision to grant		 2018.07.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0513089-12
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번호 청구항
1 1
다음의 구조적 특성을 갖는 것을 특징으로 하는 수용성과 결정성을 갖는 3차원 구조를 갖는 변형된 카타닌 단백질:결정의 공간군: 육방정계 공간군(P65 2 2)격자 단위:a=105
2 2
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3 3
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4 4
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9 9
제1항에 따른 변형된 단백질을 발현하기 위한, 서열번호 3의 아미노산 서열로 표현되는 카타닌 p60 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터; 및 서열번호 4의 아미노산 서열로 표시되는 카타닌 p80 단백질을 코팅하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터로 동시에 형질전환된 미생물
10 10
제9항에 있어서,상기 카타닌 p60 단백질을 코딩하는 유전자는 서열번호 4로 표시되는 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하고,상기 카타닌 p80 단백질을 코딩하는 유전자는 서열번호 6으로 표시되는 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 형질전환된 미생물
11 11
제9항에 있어서,상기 미생물은 Rosetta(DE3) 대장균인 것을 특징으로 하는 형질전환된 미생물
12 12
제11항에 있어서,상기 카타닌 p60 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터는 도 7의 개열지도이고, 상기 카타닌 p80 단백질을 코팅하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터는 도 8의 개열지도인 것을 특징으로 하는 형질전환된 미생물
13 13
ⅰ) 상기 제9항에 따른 형질전환된 미생물을 탄소원으로 함유하는 배양배지에서 배양하는 단계;ⅱ) 상기 배양된 형질전환된 미생물 내에서 카타닌 p60 단백질과 카타닌 p80 단백질이 동시에 발현되어 카타닌 p60-p80 단백질 복합체를 형성하는 단계; ⅲ) 상기 배양된 형질전환된 미생물로부터 상기 형성된 카타닌 p60-p80 단백질 복합체를 정제하는 단계; 및 ⅳ) 상기 정제된 카타닌 p60-p80 단백질 복합체를 저수조 용액을 사용하여, 방울 혼합 증기 평형법으로 결정화하는 단계;를 포함하는 수용성 및 결정성을 갖는 변형된 카타닌 단백질의 제조방법
14 14
제13항에 있어서,상기 ⅰ) 단계와 상기 ⅱ) 단계 사이에, 상기 형질전환된 미생물의 세포 농도 즉, 600 ㎚에서 흡광도가 0
15 15
제13항에 있어서,상기 ⅱ) 단계와 상기 ⅲ) 단계 사이, 또는 상기 ⅲ) 단계와 상기 ⅳ) 단계 사이에, 상기 정제된 카타닌 p60-p80 단백질 복합체를 단백질 분해효소로 처리하여 히스텍(His tag)를 제거하는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 수용성 및 결정성을 갖는 변형된 카타닌 단백질의 제조방법
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제13항에 있어서,상기 ⅳ) 단계에서 상기 저수조 용액은 0
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제13항에 있어서,상기 ⅳ) 결정화 단계는 15 내지 25 ℃에서 1 내지 20일 동안 수행되는 것을 특징으로 하는 수용성 및 결정성을 갖는 변형된 카타닌 단백질의 제조방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국과학기술연구원 대통령 Post-Doc. 펠로우십 미세소관 절단 효소 기작 규명을 위한 생화학적 연구