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글리코겐 및 효모 유래 tRNA 첨가에 의한 혈중 내 miRNA의 추출 효율의 증가 방법

  • 기술번호 : KST2018007051
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 글리코겐 및 효모 유래 tRNA 첨가에 의한 혈장 내 극소량 존재하는 miRNA 검출 효율을 증가시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 시료 내 극소량으로 존재하는 miRNA를 빠른 시간에 정량적으로 분석이 가능하다. 또한, 본 발명의 글리코겐 및 효모 유래 tRNA를 추가한 miRNA 검출방법은 글리코켄(Glycogen) 단독, 효모 유래 tRNA 단독으로 첨가한 경우와 대비하여 최소 3배 이상 높기 때문에, 다양한 miRNA 검출하는데 효율적으로 활용될 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01) C12N 15/10 (2017.01.01)
CPC C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01)
출원번호/일자 1020160158170 (2016.11.25)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0059046 (2018.06.04) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.11.25)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 송은주 대한민국 서울특별시 성북구
2 반은미 대한민국 서울특별시 성북구
3 채동규 대한민국 서울특별시 성북구
4 유영숙 대한민국 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 한라특허법인(유한) 대한민국 서울시 서초구 강남대로 ***(서초동, 남강빌딩 *층)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2016.11.25 수리 (Accepted) 1-1-2016-1155737-00
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2018.01.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0041040-93
3 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2018.02.05 수리 (Accepted) 1-1-2018-0123477-85
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2018.02.05 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0123476-39
5 등록결정서
Decision to grant		 2018.07.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0477544-40
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번호 청구항
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다음의 단계를 포함하는 글리코겐 및 효모 유래 tRNA 첨가에 의한 혈중 내 존재하는 miRNA의 추출 효율을 증가시키는 방법:(a) 혈장 시료 내 트리졸 시약을 넣고 원심분리한 후 상층액을 분리하는 단계;(b) 상기 상층액에 글리코켄(Glycogen) 및 효모 유래 tRNA를 운반체(carrier)로 첨가하고 인큐베이션하여 혈중 내 miRNA를 침전시키는 단계;(c) 원심분리하여 침전된 miRNA 펠릿 추출물을 수득하는 단계; 및(d) miRNA 펠릿 추출물로부터 miRNA를 검출하는 단계
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제 1 항에 있어서, 상기 글리코겐의 농도는 혈장 시료 250 ㎕에 대해 10 ~ 100 ug이고, 효모 유래 tRNA는 300 ~ 1200 ng인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 인큐베이션은 -60 ~ -100℃에서 30분 ~ 3시간인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)는 다음의 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법: (d-1) miRNA 펠릿 추출물과 혈중 내에 존재할 것으로 예상되는 miRNA에 특이적인 형광물질이 결합된 유리 DNA를 혼성화 버퍼에서 혼성화 시키는 단계;(d-2) LIF(laser induced fluorescence) 검출기가 장착된 모세관 전기영동(CE/LIF) 시스템을 이용하여 DNA-miRNA 복합체를 분리 및 확인하는 단계; 및(d-3) 상기 단계 (d-2)의 결과 DNA-miRNA 복합체 피크를 확인하여 혈중 내 miRNA의 존재를 확인하는 단계
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제 4 항에 있어서, 상기 LIF 검출기는 여기 파장이 400-500 ㎚이고 방출 파장이 500-600 ㎚인 것을 특징으로 하는 방법
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제 4 항에 있어서, 상기 DNA-miRNA 복합체의 분리는 미코팅 모세관(uncoated capillary)을 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 6 항에 있어서, 상기 미코팅 모세관은 내경이 50-100 ㎛이고 길이가 20-60 ㎝인 것을 특징으로 하는 방법
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제 4 항에 있어서, 상기 분리는 트리스-보레이트 버퍼를 사용하여 미코팅 모세관 내에서 10-20kV의 전압을 적용하여 분리하는 것을 특징으로 하는 방법
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삭제
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삭제
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삭제
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국과학기술연구원 핵심융합연구사업 Splicing 관련 단백질-RNA 복합체 상호작용 구조 분석 및 조절 기전 규명을 통한 항암 표적 발굴