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1)세균의 타입 1 분비 시스템(Type 1 Secretion System, T1SS)의 ATP-결합 카세트 (ATP-binding Cassette, ABC) 수송체를 암호화하는 핵산서열, 2) 리파제 ABC 트랜스포터 인식 도메인 (Lipase ABC transporter recognition domain, LARD)을 암호화하는 핵산서열, 및 3)목적 단백질을 암호화하는 핵산서열이 작동 가능하게 연결된 발현 카세트를 포함하는, 세균에서 목적 단백질의 발현 및 세포외 분비용 발현 벡터로서, 상기 LARD와 목적 단백질은, 산성 pI 값을 가지며 세포 외로 분비되는 융합 단백질로 발현되는 것이고, (i) 상기 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열의 3'-말단 또는 5'-말단에 6 내지 20개의 아미노산으로 이루어진 산성 펩타이드를 암호화하는 핵산서열을 추가하는 것;(ii) 상기 목적 단백질에 포함된 염기성 아미노산을 1개 이상 제거하거나, 중성 아미노산 또는 산성아미노산으로 치환하는 것; 및(iii) 목적 단백질의 3차원 구조에서 작용기가 외부로 돌출되어 있어 치환되어도 목적 단백질의 구조에 영향을 미치지 않는 아미노산을 선별하는 단계, 및 상기 선별된 아미노산이 염기성 아미노산인 경우, 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 아미노산으로 치환하여 과음전하화(negatively supercharged)된 목적 단백질인 것으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 것으로 상기 LARD3와 목적 단백질의 융합 단백질을 산성 pI 값을 가지도록 하는 것인, 세균에서 목적 단백질의 발현 및 세포외 분비용 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 세균의 타입 1 분비 시스템의 ABC 수송체는 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens)의 TliDEF, 슈도모나스 에루기노사(Pseudomonas aeruginosa)의 AprDEF(PaAprDEF), 딕케야 다단티(Dickeya dadantii)의 PrtDEF(DdPrtDEF), 또는 대장균(Escherichia coli)의 HlyBD 및 TolC인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 산성 펩타이드는 아스파라트산(aspartic acid) 및 글루탐산(glutamic acid)으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 아미노산으로 이루어진 것인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 산성 펩타이드는 서열번호 33(Asparatic acid 10개; D10) 의 아미노산 서열을 포함하는 것인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 산성 펩타이드를 암호화하는 핵산서열은, 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열의 3'-말단 또는 5'-말단에 위치하는 것인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 염기성 아미노산은 리신(lysine) 및 아르기닌(arginine)로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 리파제 ABC 트랜스포터 인식 도메인은 LARD 1, LARD 2, 또는 LARD 3 인 것인, 발현 벡터
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제1항, 제7항, 제9항, 제10항, 제11항, 제13항 및 제16항 중 어느 한 항에 따른 발현 벡터를 포함하는, 원핵 세포
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제17항에 있어서, 상기 세포는 타입 1 분비 시스템(Type 1 Secretion System, T1SS)의 ABC 수송체를 포함하는 세균인 것인, 원핵 세포
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제19항에 있어서, 상기 세포는 슈도모나스(Pseudomonas) 속 균주, 딕케야(Dickeya) 속 균주, 대장균(Escherichia) 속 균주로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것인, 원핵 세포
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제1항, 제7항, 제9항, 제10항, 제11항, 제13항 및 제16항 중 어느 한 항에 따른 벡터로 형질전환된 원핵 세포를 제조하는 단계,상기 원핵 세포를 배양하여 분비용 단백질을 생산하는 단계, 및상기 생산된 분비용 단백질을 분리 또는 정제하는 단계를 포함하는, 원핵 세포에서 목적 단백질을 생산하는 방법
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제1항, 제7항, 제9항, 제10항, 제11항, 제13항 및 제16항 중 어느 한 항에 따른 벡터를 원핵 세포에 삽입하는 단계를 포함하는, 원핵 세포에서 목적 단백질의 세포 외 분비를 증가시키는 방법
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