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슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens)의 tliDEF를 암호화하는 핵산서열, 재조합 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열, 및리파제 ABC 트랜스포터 인식 도메인 (LARD)을 암호화하는 핵산서열이 작동 가능하게 연결된 발현 카세트를 포함하며, 산성 pI 값을 갖는 분비용 단백질을 발현함을 특징으로 하는, 그람 음성균에서 목적 단백질을 발현하고 분비하기 위한 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 분비용 단백질의 산성 pI 값은 7 미만인 것인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 재조합 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열은 목적 단백질 서열에 6 내지 20개의 아미노산으로 이루어진 산성 펩타이드를 암호화하는 핵산서열을 추가로 포함하는 것인, 발현 벡터
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제3항에 있어서, 상기 산성 펩타이드는 아스파라트산(aspartic acid) 및 글루탐산(glutamic acid)으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 아미노산으로 이루어진 것인, 발현 벡터
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제3항에 있어서, 상기 산성 펩타이드를 암호화하는 핵산서열은, 서열번호 33(Asparatic acid 10개; D10)의 염기서열을 포함하는 것인, 발현 벡터
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제3항에 있어서, 상기 산성 펩타이드를 암호화하는 핵산서열은, 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열의 3'-말단 또는 5'-말단에 위치하는 것인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 재조합 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열은 목적 단백질을 암호화하는 핵산서열을 구성하는 염기성 아미노산을 암호화하는 핵산서열 중 1개 이상을 제거한 것인, 발현벡터
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제7항에 있어서, 상기 염기성 아미노산은 리신(lysine) 또는 아르기닌(arginine)인 것인, 발현벡터
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제1항에 있어서, 상기 재조합 목적 단백질은 과음전하화(negatively supercharged)된 목적단백질인 것인, 발현 벡터
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제9항에 있어서, 상기 과음전하화된 목적단백질은 AvNAPSA(Average Neighbor Atoms per Sidechain Atom) 알고리즘을 이용해 단백질 표면을 리모델링하여 제조한 것인, 발현 벡터
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제1항에 있어서, 상기 리파제 ABC 트랜스포터 인식 도메인은 LARD 1, LARD 2, 또는 LARD 3 인 것인, 발현 벡터
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제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따른 발현 벡터를 포함하는, 그람음성균 세포
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제12항에 있어서, 상기 그람 음성균은 슈도모나스(Pseudomonas) 속 균주, 크산토모나스(Xanthomonas) 속 균주 및 버크홀데리아(Burkholderia) 속 균주로 이루어진 군에서 선택되는 것인, 세포
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제13항에 있어서, 상기 슈도모나스속 균주는 슈도모나스 플루오레슨스, 슈도모나스 프라기, 슈도모나스 푸티다, 슈도모나스 시린게 또는 슈도모나스 에루기노사인, 세포
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제14항에 있어서, 상기 슈도모나스속 균주는 슈도모나스 플루오레슨스(Pseudomonas fluorescens)인 세포
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제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따른 벡터로 형질전환된 그람음성균 세포를 제조하는 단계,상기 세포를 배양하여 분비용 단백질을 생산하는 단계, 및상기 생산된 분비용 단백질을 분리 또는 정제하는 단계를 포함하는, 그람음성균에서 목적 단백질을 생산하는 방법
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상기 청구항 1항 내지 11항 중 어느 한 항의 벡터를 세포에 삽입하는 단계를 포함하는, 그람 음성균에서 목적 단백질의 세포 외 분비를 증가시키는 방법
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