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a) 바이오물질을 함유하는 시료를 상기 바이오물질에 대한 고정능을 갖는 복합 나노구조체와 접촉시켜 상기 시료에 비하여 증가된 밀도의 바이오물질을 상기 복합 나노구조체 상에 포집시키는 단계;b) 상기 포집된 바이오물질을 세포 용해(lysis)시키는 단계;c) 상기 바이오물질의 세포 용해물(lysate)을 소광 상태에 있는 프로브와 접촉시켜 상기 세포 용해에 의하여 방출되는 뉴클레아제에 의하여 상기 프로브 내 사슬을 절단하는 단계, 여기서 상기 프로브는 상기 방출되는 뉴클라아제에 대하여 응답성을 갖는 핵산 프로브로서, 상기 사슬에 의하여 연결된 각각 말단에 형광체 및 소광체를 포함하며, 사슬의 절단 전에는 소광체의 작용에 의하여 형광체의 발색이 억제되어 있음;d) 상기 프로브의 절단에 따라 유리된 형광체로부터 생성된 형광에 대하여 정량적 분석 및 정성적 분석 중 적어도 하나를 수행하는 단계;를 포함하며,상기 복합 나노구조체는, (i) 상측에 복수의 나노필라가 형성된 제1 고분자 재질의 나노 패턴 구조물, (ii) 상기 나노 패턴 구조물의 표면에 부착된 표면 개질용 금속층, 및 (iii) 상기 금속층이 부착된 나노 패턴 구조물 상에 형성된 제2 고분자 재질의 나노 웹 구조를 포함하고,상기 나노 웹 구조는 나노필라의 측면의 적어도 일 지점으로부터 횡 방향으로 성장한 제2 고분자 재질의 스트랜드가, 이와 인접하는 나노필라의 적어도 일 지점으로부터 횡 방향으로 성장한 제2 고분자 재질의 스트랜드와 합쳐져 상호 연결되어 있고, 그리고제2 고분자 재질의 나노 웹 구조 내 스트랜드의 직경은 10 내지 200 nm 범위인 시료 내 바이오물질의 포집 및 진단 방법
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제1항에 있어서, 상기 제1 고분자는 폴리우레탄(Poly urethane, PU)계, 폴리디메틸실록산(Polydimethylsiloxane; PDMS)계, NOA(Noland Optical Adhesive)계 및 에폭시(Epoxy)계로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 제2 고분자는 폴리에테르케톤(PEK), 폴리에테르에테르케톤(PEEK), 폴리에테르에테르케톤케톤(PEEKK), 폴리설폰, 폴리에테르 설폰, 폴리페닐에테르설폰, 폴리페닐렌, 폴리이미다졸, 폴리이미드, 폴리아미드이미드, 폴리아닐린, 폴리아세틸렌(polyacetylene), 폴리피롤(polypyrrole), 및 폴리티오펜(polythiophene)으로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 제1 고분자는 폴리우레탄 아크릴레이트(PU)와 NOA계 접착제의 블렌드이고, 상기 블렌드 내 폴리우레탄 아크릴레이트 및 NOA계 접착제 각각의 함량은 20 내지 80 중량% 및 80 내지 20 중량%인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 복수의 나노필라의 직경 및 높이는 각각 100 내지 1000 nm 및 100 내지 1500 nm 범위이고, 상기 복수의 나노필라 사이의 간격은 100 내지 3500 nm 범위인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 표면 개질용 금속층은 Ni, Zn, Pd, Ag, Cd, Pt, Ga, In 및 Au로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제6항에 있어서, 상기 표면 개질용 금속층과 상기 나노 패턴 구조물 사이에 Ti, V, Cr, Sc, Nb, Mo 및 W으로 이루어진 군으로부터 적어도 하나가 선택되는 중간층을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 표면 개질용 금속층 및 중간층 각각의 재질은 Au 및 Ti인 것을 특징으로 하는 방법
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제3항에 있어서, 상기 제2 고분자는 폴리아닐린인 것을 특징으로 하는 방법
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제3항에 있어서, 상기 제2 고분자 재질의 나노 웹 구조의 평균 메쉬 사이즈는 1 내지 1,500 nm 범위인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 프로브는 이중 스트랜드 DNA 프로브인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 바이오물질은 박테리아로서, 그람-양성 박테리아 및 그람-음성 박테리아 중 적어도 하나인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 b)는 세포용해 완충액을 사용하여 수행되며, 여기서, 상기 세포용해 완충액은 리소자임(lysozyme) 및 리소스타핀(lysostaphin)을 함유하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 형광체는 FAM, HEX, JOE, TET, MAX 및 VIC으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 상기 소광체는 DABCYL, ROX, Black Hole 및 Quencher(BHQ), Eclipse, TAMRA, QSY-6 및 금 나노입자로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제14항에 있어서, 상기 형광체는 FAM이고, 상기 소광체는 BHQ-1인 것을 특징으로 하는 방법
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제11항에 있어서, 상기 프로브 내 형광체와 소광체 간 거리는 25 내지 60개의 염기로 이루어지고, 상기 프로브는 상기 방출되는 뉴클라아제에 응답하여 형광체와 소광체 사이의 사슬이 절단되도록 염기 서열 내 미스매치를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 생성된 형광은 공초점 현미경(confocal microscope), 형광 현미경(fluorescence microscope), 형광계(fluorometer), 형광 스캐너(fluorescence scanner), 플로우사이토메터(flow cytometer), 광전자증폭관(photo multiplier tube), 또는 포토다이오드(photo diode)에 의하여 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
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시료 내 바이오물질의 포집 및 진단 시스템으로서,a) (i) 상측에 복수의 나노필라가 형성된 제1 고분자 재질의 나노 패턴 구조물, (ii) 상기 나노 패턴 구조물의 표면에 부착된 표면 개질용 금속층, 및 (iii) 상기 금속층이 부착된 나노 패턴 구조물 상에 형성된 제2 고분자 재질의 나노 웹 구조를 포함하는 복합 나노구조체;b) 상기 바이오물질로부터 유래된 뉴클레아제에 대하여 응답성을 갖는 핵산 프로브, 여기서 상기 프로브는 사슬에 의하여 연결된 각각 말단에 형광체 및 소광체를 포함하며, 뉴클라아제에 의하여 사슬이 절단되기 전에는 소광체의 작용에 의하여 형광체의 발색이 억제되어 있음; 및c) 상기 사슬의 절단에 의하여 상기 프로브로부터 유리되는 형광체의 형광 및 형광 세기 중 적어도 하나를 검출하는 장치;를 포함하고,상기 나노 웹 구조는 나노필라의 측면의 적어도 일 지점으로부터 횡 방향으로 성장한 제2 고분자 재질의 스트랜드가, 이와 인접하는 나노필라의 적어도 일 지점으로부터 횡 방향으로 성장한 제2 고분자 재질의 스트랜드와 합쳐져 상호 연결되어 있고, 그리고제2 고분자 재질의 나노 웹 구조 내 스트랜드의 직경은 10 내지 200 nm 범위인 포집 및 진단 시스템
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제18항에 있어서, 상기 포집 및 진단 시스템의 검출 한계(LOD)는 103 내지 107 CFU인 것을 특징으로 하는 포집 및 진단 시스템
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제18항에 있어서, 상기 프로브는 이중 스트랜드 DNA 프로브로서, 하기 표 3에 따른 염기서열의 5'-말단에 형광체로서 FAM이 부착되어 있고, 3'-말단에 소광체로서 BHQ-1이 부착되어 있는 것을 특징으로 하는 포집 및 진단 시스템:[표 3]
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