| 1 |
1
다음 단계를 포함하는 헤어핀 자기조립을 이용한 리보뉴클레아제 H (RNase H) 활성의 검출 방법:(a) B-RNA와 상보적인 염기서열을 가지는 T-DNA와 T-DNA와 상보적인 염기서열을 가지는 B-RNA를 T-DNA/B-RNA 이중가닥으로 형성시킨 다음, RNase H에 의해 B-RNA를 분해하여, 단일가닥의 T-DNA를 생성시키는 단계;(b) 상기 생성된 단일가닥의 T-DNA와 ① 루프; 스템(stem); 및 구아닌이 풍부한 3'말단과 5' 말단으로 구성되고, 상기 스템의 발판가닥은 T-DNA와 상보적인 서열을 가지는 헤어핀 프로브 1과 ② 루프; 스템; 및 구아닌이 풍부한 3'말단과 5'말단으로 구성되고, 상기 루프 및 스템은 헤어핀 프로브 1의 루프 및 스템과 상보적인 서열을 가지는 헤어핀 프로브 2를 반응시켜 헤어핀 자기조립 유도를 통한 5' 및 3' 말단에 G-쿼드러플렉스 (G-quadruplex) 구조를 가지는 헤어핀 프로브 1과 헤어핀 프로브 2의 복합체를 형성하는 단계; 및(c) 상기 복합체의 G-쿼드러플렉스 (G-quadruplex) 구조에 특이적으로 결합하는 형광분자를 도입하여 발생하는 형광신호를 측정하여 RNase H 활성을 검출하는 단계:여기서, 상기 G-쿼드러플렉스 (G-quadruplex)에 특이적으로 결합하는 형광분자는 N-메틸 메소포피린 IX (N-methyl mesoporphyrin IX), 프로토포르피린 IX (Protoporphyrin IX,), 티오플라빈 티 (Thioflavin T), 크리스털 바이올렛 (Crystal violet), 말라카이트 그린 (Malachite green) 및 [Ir(ppy)2(biq)]+으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 함
|
| 2 |
2
삭제
|
| 3 |
3
제1항에 있어서, 상기 T-DNA는 서열번호 1로 표시되고, 상기 B-RNA는 서열번호 2로 표시되는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 4 |
4
제3항에 있어서, 상기 헤어핀 프로브 1은 서열번호 3으로 표시되며, 상기 헤어핀 프로브 2는 서열번호 4로 표시되는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 5 |
5
제1항에 있어서, 상기 (a) 내지 (c) 단계는 Tris-HCl (pH 7
|
| 6 |
6
다음을 포함하는 리보뉴클레아제 H (RNase H) 활성 검출용 조성물
|
| 7 |
7
제6항에 있어서, 상기 T-DNA는 서열번호 1로 표시되고, 상기 B-RNA는 서열번호 2로 표시되는 것을 특징으로 하는 조성물
|
| 8 |
8
제7항에 있어서, 상기 헤어핀 프로브 1은 서열번호 3으로 표시되며, 상기 헤어핀 프로브 2는 서열번호 4로 표시되는 것을 특징으로 하는 조성물
|
