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표적 유전자 검출용 미세 유동 장치, 이의 제조방법 및 이를 이용한 검출 방법(Microfluidic device for detection of target gene, method of preparing the same and detection method using the same)

  • 기술번호 : KST2016009965
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 표적 유전자를 증폭시켜 유로를 선택적으로 막음으로써 육안으로 식별이 가능한 표적 유전자, 특히 병원균 유전자를 검출하는 미세 유동 장치 및 이를 이용한 검출 방법을 제공한다. 따라서 본 발명은 복잡한 기계 장치 없이도 단일 표적 유전자, 예컨대 단일 병원균 또는 동시에 여러 표적 유전자, 예컨대 여러 병원균을 간편하게 검출 할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) B01L 3/00 (2006.01) B01L 7/00 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)
CPC C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01) C12Q 1/6837(2013.01)
출원번호/일자 1020150151941 (2015.10.30)
출원인 이화여자대학교 산학협력단, 한국과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0052400 (2016.05.12) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020140149495   |   2014.10.30
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.10.30)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구
2 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이혁진 대한민국 서울특별시 마포구
2 이해신 대한민국 대전광역시 유성구
3 이호연 대한민국 대전광역시 서구
4 정일영 대한민국 세종특별자치시 나리로 **,

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 안소영 대한민국 서울특별시 강남구 논현로 ***, *층 (역삼동, 운기빌딩)(안소영국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구
2 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.10.30 수리 (Accepted) 1-1-2015-1057237-72
2 보정요구서
Request for Amendment
2015.11.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2015-0170430-10
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2015.12.07 수리 (Accepted) 1-1-2015-1196345-76
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.11.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0854372-13
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.01.25 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0090274-15
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.01.25 수리 (Accepted) 1-1-2017-0090273-70
7 등록결정서
Decision to grant
2017.06.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0442396-35
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1
기판;상기 기판 상에 형성된 시료용액이 외부로부터 유입되는 유입구; 상기 시료 유입구와 연결되어 유입된 시료용액을 수용하는 제 1 유로;상기 제 1 유로와 연결된 제 2 유로; 상기 제 2 유로와 연결된 배출구; 상기 제 2 유로 상의 코팅, 상기 제 2 유로의 코팅 상에 고정된 프라이머; 및 상기 프라이머에 상보적으로 결합된 템플레이트를 포함하고,상기 템플레이트는 표적 유전자와 상보적으로 결합하는 결합 부위, 상기 프라이머에 상보적으로 결합하는 결합 부위, 덤벨 형태를 형성하기 위한 템플레이트 내 상보적인 결합 부위를 포함하고,상기 표적 유전자와 상보적으로 결합하는 결합부위는 템플레이트의 양 말단에 분리되어 형성되고, 상기 프라이머에 상보적으로 결합하는 결합 부위는 분리되어 형성된 상기 덤벨 형태를 형성하기 위한 템플레이트 내 상보적인 결합 부위 사이에 형성된 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
2 2
제1항에 있어서, 상기 제 2 유로는 1 내지 20개인 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
3 3
제1항에 있어서, 상기 제 2 유로는 2 내지 20개이며, 제 1 유로의 말단에서 각각의 제 2 유로가 분지되고,각각의 제 2 유로 상에 고정된 프라이머에 결합된 표적 유전자 검출용 템플레이트는 서로 같거나 다른 유전자에 결합하는, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
4 4
제1항에 있어서, 상기 제2 유로는 5-히드록시도파민 염산, 노르에피네프린, 에피네프린, 파이로갈롤아민, DOPA(3,4-Dihydroxyphenylalanine), 카테킨, 탄닌류, 파이로갈롤, 파이로카테콜, 헤파린-카테콜, 키토산-카테콜, 폴리에틸렌글리콜-카테콜, 폴리에틸렌이민-카테콜, 폴리메틸메타크릴레이트-카테콜, 히알루론산-카테콜, 폴리라이신-카테콜 (polylysine-catechol), 및 폴리라이신 (polylysine)으로 이루어진 군으로부터 선택된 1 이상으로 코팅된 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
5 5
제1항에 있어서, 상기 프라이머는 티올(thiol), 아민(amine), 하이드록실(hydroxyl), 카복실(carboxyl), 이소티오시아네이트(isothiocyanate), NHS 에스테르, 알데히드(aldehyde), 에폭시드(epoxide), 카보네이트(Carbonate), HOBt 에스테르, 글루타르알데히드(Glutaraldehyde), 카바메이트(carbamate), 이미다졸 카바메이트(imidazole carbamate), 말레이미드(maleimide), 아지리딘(aziridine), 설폰(sulfone), 비닐설폰(vinylsulfone), 하이드라진(hydrazine), 페닐 아자이드(phenyl azide), 벤조페논(benzophenone), 안트라퀴논(anthraquinone), 및 디엔(Diene) 기로 이루어진 군으로부터 선택된 1 이상으로 말단이 변형된 것인, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
6 6
제1항에 있어서, 상기 코팅은 5-하이드록시도파민 염산이고, 상기 프라이머는 말단이 티올 또는 아민 기로 변형된 것인, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
7 7
제1항에 있어서, 상기 표적 유전자는 조류독감, 사스(SARS), 대장균 O157:H7 (Escherichia coli O157:H7), 결핵(Mycobacterium tuberculosis), 탄저병(Bacillus anthracis), 폐렴(Streptococcus pneumonia), 말라리아(Plasmodium), 살모넬라(Salmonella), 간염(Hepatitis A, B, C, D 또는 E virus), 야토병균(Francisella tularensis), 페스트균(Yersinia pestis), 에르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 및 출혈열(Ebola virus), 및 메르스 코로나 바이러스(MERS-Cov virus)로 이루어진 군으로부터 선택된 1 이상으로부터 유래된 표적 유전자인, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
8 8
제1항에 있어서, 상기 템플레이트는 서열번호 1 내지 4, 서열번호 10, 서열번호 11 및 서열번호 16으로 이루어진 군으로부터 선택된, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치
9 9
제1항의 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치;dNTP;리가아제;및 등온 핵산 중합효소를 포함하는, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
10 10
제9항에 있어서, 상기 리가아제는 DNA 리가아제이고, 상기 등온 핵산 중합효소는 phi 29 폴리머라제인, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
11 11
제9항에 있어서, 염색 시약, 고염 용액(high salt solution), 또는 형광 시약을 더 포함하는, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
12 12
제9항에 있어서, 제1항의 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치의 상기 템플레이트는 서열번호 1 내지 4, 서열번호 10, 서열번호 11 및 서열번호 16으로 이루어진 군으로부터 선택된, 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치 키트
13 13
다음 단계를 포함하는 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치를 제조하는 방법: (S1) 기판, 상기 기판 상에 형성된 외부로부터 유입되는 유입구, 상기 유입구와 연결되어 유입된 시료용액을 수용하는 제 1 유로, 상기 제 1 유로와 연결된 제 2 유로, 상기 제 2 유로와 연결된 배출구를 포함하는 미세 유동 장치를 제공하는 단계;(S2) 상기 미세 유동 장치의 제2 유로를 코팅하는 단계; (S3) 상기 코팅된 제 2 유로 상에 템플레이트와 결합할 수 있는 프라이머를 고정화하는 단계; 및(S4) 표적 유전자와 상보적으로 결합하는 결합 부위, 상기 프라이머에 상보적으로 결합하는 결합 부위, 덤벨 형태를 형성하기 위한 템플레이트 내 상보적인 결합 부위를 포함하는 템플레이트를, 상기 프라이머에 결합시키는 단계,여기서, 상기 표적 유전자와 상보적으로 결합하는 결합부위는 템플레이트의 양 말단에 분리되어 형성되고, 상기 프라이머에 상보적으로 결합하는 결합 부위는 분리되어 형성된 상기 덤벨 형태를 형성하기 위한 템플레이트 내 상보적인 결합 부위 사이에 형성된다
14 14
다음 단계를 포함하는 제1항의 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치를 이용하여 표적 유전자를 검출하는 방법: (S1) 제1항의 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치를 제공하는 단계; (S2) 제 1 유로에 시료용액을 유입시키는 단계; 및(S3) 상기 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치의 제 2 유로에 dNTP, 리가아제, 및 등온 핵산 중합효소를 첨가하는 단계
15 15
제14항에 있어서, (S4) 증폭된 유전자 산물이 엉기어 직경 50 μm 내지 5 mm의 크기를 가지는 하이드로겔이 제 2 유로 및 배출구에 형성되는 단계를 포함하는, 표적 유전자를 검출하는 방법
16 16
제15항에 있어서, (S5) 염색 시약, 고염 용액(high salt solution), 또는 형광 시약을 주입하는 단계를 더 포함하는, 표적 유전자를 검출하는 방법
17 17
제14항에 있어서, 제1항의 표적 유전자 검출용 미세 유동 장치의 상기 템플레이트는 서열번호 1 내지 4, 서열번호 10, 서열번호 11 및 서열번호 16으로 이루어진 군으로부터 선택된, 표적 유전자를 검출하는 방법
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1 CN107002006 CN 중국 FAMILY
2 EP03214164 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 EP03214164 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
4 JP06643347 JP 일본 FAMILY
5 JP30500927 JP 일본 FAMILY
6 US10731208 US 미국 FAMILY
7 US20170314070 US 미국 FAMILY
8 WO2016068663 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 AU2015340134 AU 오스트레일리아 DOCDBFAMILY
2 AU2015340134 AU 오스트레일리아 DOCDBFAMILY
3 BR112017008931 BR 브라질 DOCDBFAMILY
4 CN107002006 CN 중국 DOCDBFAMILY
5 CN107002006 CN 중국 DOCDBFAMILY
6 EP3214164 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
7 EP3214164 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
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9 JP6643347 JP 일본 DOCDBFAMILY
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11 US2017314070 US 미국 DOCDBFAMILY
12 WO2016068663 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 이화여자대학교 산학협력단 바이오의료기술개발사업 유전 전달물질을 이용한 편도유래 유도만능 줄기세포 제작 및 분화 조절
2 보건복지부 이화여자대학교 산학협력단 보건의료기술연구개발사업 자기조립 핵산 나노입자를 이용한 유도 만능 줄기세포 개발
3 미래창조과학부 한국과학기술원 도약연구자지원사업 Bioinspired카테콜아민 고분자의 인터페이스 특이적 화학현상 연구 및 이의 혁신적 이용