1 |
1
(a) 생물학적 시료로 부터 엑소좀을 분리하는 단계; (b) 상기 분리된 엑소좀과 알킬기를 포함하는 지방족 및 형광체로 구성된 지질막 염색제를 반응시켜, 엑소좀을 염색시키는 단계; 및 (c) 형광 편광(fluorescence polarization) 값을 측정하여 엑소좀을 정량하는 단계;를 포함하는 형광 편광법을 이용한 엑소좀 염색 및 정량 방법
|
2 |
2
제1항에 있어서, 상기 (a) 단계의 생물학적 시료는 전혈, 혈청, 혈장, 타액, 뇨, 객담, 림프액 및 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 엑소좀 염색 및 정량 방법
|
3 |
3
삭제
|
4 |
4
제1항에 있어서, 상기 형광체는 플루오레세인(fluorescein), 플루오레세인 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸로다민(tetramethylrhodamine), 플루오레세인 아이소싸이오사이아네이트(Fluorescein isothiocyanate; FITC) 오레곤 그린(Oregon green), 알렉사 플루오로(Alexa Fluor), JOE, ROX, HEX, 텍사스 레드(Texas Red), TET, TRITC, TAMRA, 시아닌(Cyanine) 계열 염료 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine) 염료로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 엑소좀 염색 및 정량 방법
|
5 |
5
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 지질막 염색제는 플루오레세인 아이소싸이오사이아네이트-컨쥬게이티드 페길레이티드 모노아실 리피드(Fluorescein isothiocyanate conjugated PEGylated monoacyl lipid; FITC-C18-PEG), 1, 2-디스테아로일-에스엔-글리세로-3-포스포에탄올아민-폴리에틸렌 글리콜(1, 2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-Polyethylene glycol; DSPE- PEG), 콜레스테롤-폴리에틸렌 글리콜(cholesterol-Polyethylene glycol; Cholesterol-PEG), PKH67 레드 플루오레센트 셀 링커(Red Fluorescent Cell Linker), 펑션 스페이서 리피드-플루오레세인(Function Spacer Lipid-Fluorescein; FSL-Fluorescein), 엔-(플루오레세인-5-티오카르바모일)-1,2-디헥사데칸오일-에스엔-글리세로-3-포스포에탄올아민(N-(fluorescein-5-thiocarbamoyl)-1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine; Fluorescein DHPE) 및 5-도데카노일아미노 플로오레세인(5-dodecanoylamino fluorescein ; C12-FAM)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 엑소좀 염색 및 정량 방법
|
6 |
6
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (ⅰ) 엑소좀 표준물질을 농도별로 희석하여 준비한 다음, 지질막 염색제와 함께 반응시킨 후, 형광 편광을 측정하여 표준 곡선을 작성하는 단계; 및 (ⅱ) 시료에서 분리한 엑소좀에 대한 형광 편광 값을 표준 곡선에 대입하여 엑소좀 수를 정량하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 엑소좀 염색 및 정량 방법
|
7 |
7
삭제
|
8 |
8
(a) 환자의 생물학적 시료로부터 엑소좀을 분리하는 단계; (b) 상기 분리된 엑소좀과 알킬기를 포함하는 지방족 및 형광체로 구성된 지질막 염색제를 반응시켜, 엑소좀을 염색시키는 단계; 및 (c) 형광 편광(fluorescence polarization) 값을 측정하여 엑소좀을 정량하는 단계; 를 포함하는 암 진단을 위한 정보 제공 방법
|
9 |
9
제8항에 있어서, 상기 암은 대장암, 치종암, 혈액암, 후두암, 식도암, 구강암, 기저세포암, 담도암, 갑상선암, 직장암, 위암, 전립선암, 유방암, 신장암, 간암, 뇌종양, 폐암, 자궁암, 결장암, 방광암 및 췌장암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 암 진단을 위한 정보 제공 방법
|
10 |
10
제8항에 있어서, 상기 (a) 단계의 생물학적 시료는 전혈, 혈청, 혈장, 타액, 뇨, 객담, 림프액 및 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 암 진단을 위한 정보 제공 방법
|
11 |
11
삭제
|
12 |
12
제8항에 있어서, 상기 형광체는 플루오레세인(fluorescein), 플루오레세인 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸로다민(tetramethylrhodamine), 플루오레세인 아이소싸이오사이아네이트(Fluorescein isothiocyanate; FITC) 오레곤 그린(Oregon green), 알렉사 플루오로(Alexa Fluor), JOE, ROX, HEX, 텍사스 레드(Texas Red), TET, TRITC, TAMRA, 시아닌(Cyanine) 계열 염료 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine) 염료로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 암 진단을 위한 정보 제공 방법
|
13 |
13
제8항에 있어서, 상기 (b) 단계의 지질막 염색제는 플루오레세인 아이소싸이오사이아네이트-컨쥬게이티드 페길레이티드 모노아실 리피드(Fluorescein isothiocyanate conjugated PEGylated monoacyl lipid; FITC-C18-PEG), 1, 2-디스테아로일-에스엔-글리세로-3-포스포에탄올아민-폴리에틸렌 글리콜(1, 2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-Polyethylene glycol; DSPE- PEG), 콜레스테롤-폴리에틸렌 글리콜(cholesterol-Polyethylene glycol; Cholesterol-PEG), PKH67 레드 플루오레센트 셀 링커(Red Fluorescent Cell Linker), 펑션 스페이서 리피드-플루오레세인(Function Spacer Lipid-Fluorescein; FSL-Fluorescein), 엔-(플루오레세인-5-티오카르바모일)-1,2-디헥사데칸오일-에스엔-글리세로-3-포스포에탄올아민(N-(fluorescein-5-thiocarbamoyl)-1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine; Fluorescein DHPE) 및 5-도데카노일아미노 플로오레세인(5-dodecanoylamino fluorescein ; C12-FAM)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 암 진단을 위한 정보 제공 방법
|
14 |
14
제8항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (ⅰ) 엑소좀 표준물질을 농도별로 희석하여 준비한 다음, 지질막 염색제와 함께 반응시킨 후, 형광 편광을 측정하여 표준곡선을 작성하는 단계; 및 (ⅱ) 생물학적 시료에서 분리한 엑소좀에 대한 형광 편광 값을 표준 곡선에 대입하여 엑소좀 수를 정량하고, 정상 대조군에서 분리한 엑소좀 수와 비교하여 엑소좀의 수가 증가한 경우를 암인 것으로 정보를 제공하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 암 진단을 위한 정보 제공 방법
|