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세포질 침투성이 증진된 항체의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2020009978
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포질 침투성이 증진된 항체의 스크리닝 방법에 관한 것으로, 상세하게는 항체의 신속한 합성 및 특성 분석을 가능하게 하는 무세포 단백질 합성 시스템을 사용하여 세포질 투과성이 증진된 변이형 항체를 스크리닝하는 방법으로, 세포독성이 없으며, 무세포 단백질 합성 후 정제과정 없이 그대로 세포질 투과성을 평가할 수 있는 스크리닝 방법이다. 본 발명의 스크리닝 방법은 투과성이 증진된 항체를 선별하고, 선별된 항체가 표적에 대한 친화성이 야생형 수준으로 유지되는지를 확인하는 것이다.
Int. CL G01N 33/58 (2006.01.01) G01N 33/68 (2006.01.01) C07K 16/32 (2006.01.01)
CPC G01N 33/582(2013.01) G01N 33/582(2013.01) G01N 33/582(2013.01) G01N 33/582(2013.01) G01N 33/582(2013.01) G01N 33/582(2013.01)
출원번호/일자 1020190005297 (2019.01.15)
출원인 충남대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2020-0088683 (2020.07.23) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2019.01.15)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교산학협력단 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김동명 대전광역시 서구
2 박유진 대전광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 최규환 대한민국 대전광역시 서구 한밭대로 ***, **층 그린국제특허법률사무소 (둔산동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교 산학협력단 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2019.01.15 수리 (Accepted) 1-1-2019-0049979-13
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2019.07.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2019.09.05 수리 (Accepted) 9-1-2019-0040578-17
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2020.02.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0092694-64
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2020.04.06 수리 (Accepted) 1-1-2020-0356709-39
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.04.06 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0356730-99
7 등록결정서
Decision to grant		 2020.09.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0606879-71
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번호 청구항
1 1
(1) 무세포 단백질 합성법으로 야생형 세포질 침투성 타겟 항체를 합성하는 단계; (2) 상기 단계(1)에서 합성된 타겟 항체를 포함하는 무세포 단백질 합성 반응액을 그대로 정제 없이 희석하여, 세포독성 및 세포질 침투성 확인 가능 농도를 결정하는 단계;(3) 상기 단계 (1)의 타겟 항체의 경쇄 가변영역의 서열이 변이된, 변이형 세포질 침투성 항체를 생산할 수 있는 유전자 서열을 PCR 증폭시키는 단계;(4) 상기 단계 (3)에서 획득한 PCR 증폭 산물을 합성 주형으로 하여, 무세포 단백질 합성으로 변이형 세포질 침투성 항체를 생산하는 단계;(5) 상기 단계 (4)에서 생산된 변이형 세포질 침투성 항체를 포함하는 무세포 단백질 합성 반응액을 상기 단계 (2)에서 결정한 농도로, 리포터 세포에 처리하고, 세포의 침투성이 증진된 변이형 세포질 침투성 항체를 선별하는 단계; 및(6) 상기 단계 (5)에서 선별된 세포의 침투성이 증진된 변이형 세포질 침투성 항체의 타겟 항원에 대한 친화성을 확인하는 단계;를 포함하는 침투성이 증진된 세포질 침투성 항체의 스크리닝 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (4)에서, PCR 증폭 산물은 5'에서 3' 방향으로 프로모터, 융합파트너, 6×His tag, 중쇄영역, 링커1, 경쇄영역, 링커2, GFP11, SBP2 및 터미네이터 서열이 순차적으로 연결된 유전자인 것을 특징으로 하는 세포질 침투성 항체의 스크리닝 방법
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제1항에 있어서, 상기 타겟 항체는 세포질 침투성 경쇄 가변 영역을 포함하는 RT11-3 scFv(single chain varible fragment) 항체인 것을 특징으로 하는 세포질 침투성 항체의 스크리닝 방법
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제1항에 있어서, 상기 리포터 세포는 GFP1-10를 발현하는 세포인 것을 특징으로 하는 세포질 침투성 항체의 스크리닝 방법
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제4항에 있어서, 상기 리포터 세포의 세포질에서 발현하는 GFP1-10는 침투한 항체에 연결된 GFP11과 결합하여 GFP 형광을 발색하는 것을 특징으로 하는 세포질 침투성 항체의 스크리닝 방법
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제4항에 있어서, 상기 리포터 세포는 HeLa 세포인 것을 특징으로 하는 세포질 침투성 항체의 스크리닝 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 충남대학교 원천기술개발사업 DNA 라이브러리 발현 및 세포내 활성 동시 분석기술