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인간 혈청 당쇄 지도 및 이를 이용하여 혈청 시료를 검증하는 방법

  • 기술번호 : KST2015009637
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인간 혈청 N-당쇄 지도, 인간 혈청 N-당쇄 라이브러리 및 이를 이용하여 혈청 시료를 검증하는 방법에 관한 것이다. 정상인과 환자의 혈청시료 200여 개로부터 당쇄를 분리하여 분석한 결과, 정상인과 환자 모두에게서 100% 발견되는 18개의 기본 당쇄를 찾아내었다. 이 기본 당쇄 18종의 존재는 인간 혈청시료가 채취 및 처리과정에서 문제가 없음을 검증하는데 이용될 수 있다. 또한, 본 발명자들은 인간 혈청 단백질의 N-당쇄는 이론적으로는 가능한 당쇄 종류가 매우 많지만, 실제로 N-당쇄는 도 3에 나타낸 것과 같은 구조만이 존재함을 밝혔으며, 존재하는 구조의 N-당쇄들의 출현 백분율을 밝힘으로써 출현 확률이 낮은 N-당쇄들을 특정 질환의 마커로 사용할 수 있음을 밝혔다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) G01N 30/00 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020130036748 (2013.04.04)
출원인 충남대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1456096-0000 (2014.10.23)
공개번호/일자 10-2014-0120651 (2014.10.14) 문서열기
공고번호/일자 (20141103) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2013.04.04)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교산학협력단 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 안현주 대한민국 대전광역시 유성구
2 김재한 대한민국 대전광역시 유성구
3 한찬영 대한민국 충청남도 논산시 번영로**번길 **

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 강성혜 대한민국 대전 유성구 지족로***번길 **, ***-*호 (지족동, 성훈프라자)(아이앤아이특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교산학협력단 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2013.04.04 수리 (Accepted) 1-1-2013-0293743-39
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.12.24 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.12.26 수리 (Accepted) 4-1-2013-5174286-48
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2014.02.11 수리 (Accepted) 9-1-2014-0011729-52
5 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2014.03.31 수리 (Accepted) 1-1-2014-0305614-19
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2014.04.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0282848-58
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.06.24 수리 (Accepted) 1-1-2014-0589756-76
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2014.07.25 수리 (Accepted) 1-1-2014-0704020-13
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2014.07.25 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0704013-93
10 등록결정서
Decision to grant		 2014.10.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0688395-88
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.09.01 수리 (Accepted) 4-1-2015-5116888-44
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.09.01 수리 (Accepted) 4-1-2015-5116889-90
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 준비된 인간 혈청 시료를 효소처리하여 N-당쇄를 분리하는 단계; (b) 분리된 N-당쇄를 분획하는 단계;(c) N-당쇄 분획을 질량분석하는 단계; 및(d) 질량분석 결과, 키토바이오스 코어 (Man3GlcNAc2)에 결합된 당 구조가 각각 (Hex)2 이론적 단일동위원소 질량값 1257, (Hex)3 이론적 단일동위원소 질량값 1419, (Hex)4 이론적 단일동위원소 질량값 1582, (Hex)5 이론적 단일동위원소 질량값 1744, (Hex)6 이론적 단일동위원소 질량값 1906, (HexNAc)2(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1486, (Hex)1(HexNAc)2(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1648, (Hex)2(HexNAc)2(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1810, (Hex)1(HexNAc)3(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1851, (Hex)2(HexNAc)3(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2013, (Hex)2(HexNAc)2(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1931, (Hex)2(HexNAc)2(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2244, (Hex)3(HexNAc)3(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2296, (Hex)3(HexNAc)3(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2609, (Hex)2(HexNAc)2(Fuc)1(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2077, (Hex)2(HexNAc)2(Fuc)2(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2390, (Hex)3(HexNAc)3(Fuc)1(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2442 및 (Hex)3(HexNAc)3(Fuc)1(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2755의 18종 구조를 모두 포함하고 있는 경우에만 정상적인 시료로 판단하는 단계;를 포함하는 인간 혈청 시료 검증방법 {단, Man, 만노스 (Mannose); GlcNAc, N-아세틸글루코사민 (N-acetylglucosamine); Hex, 헥소스 (Hexose); HexNAc, N-아세틸헥소사민 (N-acetylhexosamine); Fuc, 퓨코스 (Fucose); NeuAc, N-아세틸뉴라민산 (N-acetylneuraminic acid)}
2 2
청구항 1에 있어서,(b) 의 분획 단계는 크로마토그래피를 이용하여 수행함을 특징으로 하는, 인간 혈청 시료 검증방법
3 3
청구항 1에 있어서,(c) 질량분석 단계는 MALDI-FT ICR MS (Matrix asisted laser desorption inization Fourier transform-ion cyclotron resonance mass spectrometry)를 이용하여 수행함을 특징으로 하는, 인간 혈청 시료 검증방법
4 4
키토바이오스 코어 (Man3GlcNAc2)에 결합된 당 구조가 (Hex)2 이론적 단일동위원소 질량값 1257, (Hex)3 이론적 단일동위원소 질량값 1419, (Hex)4 이론적 단일동위원소 질량값 1582, (Hex)5 이론적 단일동위원소 질량값 1744, (Hex)6 이론적 단일동위원소 질량값 1906, (HexNAc)2(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1486, (Hex)1(HexNAc)2(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1648, (Hex)2(HexNAc)2(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1810, (Hex)1(HexNAc)3(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1851, (Hex)2(HexNAc)3(Fuc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2013, (Hex)2(HexNAc)2(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 1931, (Hex)2(HexNAc)2(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2244, (Hex)3(HexNAc)3(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2296, (Hex)3(HexNAc)3(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2609, (Hex)2(HexNAc)2(Fuc)1(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2077, (Hex)2(HexNAc)2(Fuc)1(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2390, (Hex)3(HexNAc)3(Fuc)1(NeuAc)1 이론적 단일동위원소 질량값 2442 및 (Hex)3(HexNAc)3(Fuc)1(NeuAc)2 이론적 단일동위원소 질량값 2755의 18종 구조로 이루어진 인간 혈청 필수 N-당쇄 라이브러리 {단, Man, 만노스 (Mannose); GlcNAc, N-아세틸글루코사민 (N-acetylglucosamine); Hex, 헥소스 (Hexose); HexNAc, N-아세틸헥소사민 (N-acetylhexosamine); Fuc, 퓨코스 (Fucose); NeuAc, N-아세틸뉴라민산 (N-acetylneuraminic acid)}
5 5
키토바이오스 코어 (Hex)3(HexNAc)2 ,(Hex)5(HexNAc)2 ,(Hex)6(HexNAc)2 ,(Hex)7(HexNAc)2 ,(Hex)8(HexNAc)2 ,(Hex)9(HexNAc)2 ,(Hex)10(HexNAc)2 ,(Hex)11(HexNAc)2 ,(Hex)12(HexNAc)2 ,(Hex)3(HexNAc)3 ,Hex)3(HexNAc)3(Fuc)1 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)3(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)3 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)2 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)1(NeuAc)2 ,(Hex)5(HexNAc)4(NeuAc)2 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)4(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)4(Fuc)1 ,(Hex)5(HexNAc)4 ,(Hex)4(HexNAc)4(Fuc)3 ,(Hex)4(HexNAc)4(Fuc)2 ,(Hex)3(HexNAc)4(Fuc)2 ,(Hex)4(HexNAc)4(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)4(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)4(Fuc)1 ,(Hex)3(HexNAc)4(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)4 ,(Hex)3(HexNAc)4 ,(Hex)6(HexNAc)5 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)3 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)2 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)2 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)3 , (Hex)4(HexNAc)5(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)2 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)3(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5 ,(Hex)3(HexNAc)5 ,(Hex)7(HexNAc)6(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)6(Fuc)2 , (Hex)6(HexNAc)6(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)6(Fuc)2 ,(Hex)4(HexNAc)6(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)6 ,(Hex)3(HexNAc)6 ,(Hex)6(HexNAc)5(Fuc)3 ,(Hex)6(HexNAc)5(NeuAc)2 ,(Hex)6(HexNAc)5(Fuc)2 ,(Hex)6(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)6(HexNAc)5(NeuAc)1 ,(Hex)6(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)3 ,(Hex)5(HexNAc)3 ,(Hex)4(HexNAc)3(Fuc)1 ,(Hex)5(HexNAc)3(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)3(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)3(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)3(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)3(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)3(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)3(NeuAc)1 ,(Hex)6(HexNAc)4 ,(Hex)6(HexNAc)4(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)4(Fuc)2 ,(Hex)6(HexNAc)3 ,(Hex)6(HexNAc)3(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)3(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)6(HexNAc)3(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)3 ,(Hex)6(HexNAc)3 ,(Hex)5(HexNAc)2(Fuc)1 ,(Hex)5(HexNAc)3(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)3(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)3(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)6(HexNAc)2(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)3(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)3 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)2 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)2 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5(NeuAc)1 ,(Hex)5(HexNAc)5 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)3 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)2(NeuAc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)2 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)1(NeuAc)1 ,(Hex)3(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5(Fuc)1 ,(Hex)4(HexNAc)5(NeuAc)1 ,(Hex)3(HexNAc)5 ,(Hex)4(HexNAc)5 ,(Hex)3(HexNAc)6 ,(Hex)4(HexNAc)6 ,(Hex)4(HexNAc)6(Fuc)2 ,(Hex)6(HexNAc)6(Fuc)1 ,(Hex)6(HexNAc)6(Fuc)2 ,(Hex)4(HexNAc)6(NeuAc)1 및(Hex)6(HexNAc)5 의 108종 구조로 이루어진 인간 혈청 유래 N-당쇄 라이브러리 {단, Hex, 헥소스 (Hexose); HexNAc, N-아세틸헥소사민 (N-acetylhexosamine); Fuc, 퓨코스 (Fucose); NeuAc, N-아세틸뉴라민산 (N-acetylneuraminic acid); 원은 헥소스, 네모는 N-아세틸헥소사민, 삼각형은 퓨코스, 마름모는 N-아세틸뉴라민산을 나타내며, 헥소스 중 녹색 원은 만노스, N-아세틸헥소사민 중 청색 네모는 N-아세틸글루코사민을 나타낸다}
6 6
정상군과 시료군 비교 분석을 위한 혈청 시료 검증방법에 있어서,(a) 정상군과 특정질병 환자군의 인간 혈청 시료를 각각 효소처리하여 N-당쇄를 분리하는 단계;(b) 분리된 N-당쇄를 분획하는 단계;(c) N-당쇄 분획을 질량분석하는 단계;(d) 분석한 N-당쇄 분획에 상기 청구항 4의 인간 혈청 필수 N-당쇄 라이브러리의 18종 N-당쇄가 모두 존재하는지를 확인하는 단계; 및(e) 질량분석 결과를 비교할 때 정상군에 상기 청구항 5의 108개 N-당쇄 외의 다른 N-당쇄가 존재하지 않는 경우에만 정상적인 시료로 판단하는 단계;를 포함하는 혈청 시료 검증방법
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1 WO2014163421 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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1 교육과학기술부 충남대학교 산학협력단 신기술융합형성장동력사업 MALDI 질량분석기반 암세포 표지자 발굴 및 암진단 시스템 개발
2 교육과학기술부 한국기초과학지원연구원 특화전문대학원 연계학연협력사업 분석과학기술 전문대학원 연계 학연협력 지원사업