| 1 |
1
모노옥시게나아제, 모노옥시게나아제를 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 미생물, 또는 상기 재조합 미생물을 포함하는 세포 배양액 또는 세포 추출물을 포함하는 에쿠올로부터 에쿠올 수산화 유도체를 제조하기 위한 생촉매 조성물
|
| 2 |
2
제 1 항에 있어서, 상기 모노옥시게나아제가 4-하이드록시페닐아세테이트 3-하이드록실라아제를 포함하는 플라빈 함유 모노옥시게나아제, 티로시나아제 또는 시토크롬 P450 인 생촉매 조성물
|
| 3 |
3
제 2 항에 있어서, 상기 티로시나아제가 서열번호 1 의 아미노산 서열로 나타내는 티로시나아제, 또는 서열번호 1 의 아미노산 서열로 나타내는 티로시나아제에서, 209 번째 아르기닌이 글리신, 알라닌, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신 또는 페닐알라닌으로 치환된 것인 생촉매 조성물
|
| 4 |
4
제 3 항에 있어서, 상기 티로시나아제가 바실러스 메가테리움 (Bacillus megaterium) 으로부터 유래한 티로시나아제인 생촉매 조성물
|
| 5 |
5
제 2 항에 있어서, 상기 시토크롬 P450 이 서열번호 2 의 아미노산 서열로 나타내는 시토크롬 P450 인 생촉매 조성물
|
| 6 |
6
제 2 항에 있어서, 상기 4-하이드록시페닐아세테이트 3-하이드록실라아제가 4-하이드록시페닐아세테이트 3-하이드록실라아제의 옥시게나아제 성분 (HpaB) 및 4-하이드록시페닐아세테이트 3-하이드록실라아제의 환원효소 성분 (HpaC) 을 포함하고, 상기 HpaB 가 서열번호 3 의 아미노산 서열로 나타내는 HpaB 이거나,서열번호 3 의 아미노산 서열로 나타내는 HpaB 에서, 292 번째 트레오닌, 464 번째 세린 또는 469 번째 아르기닌이 글리신, 알라닌, 발린, 류신 또는 이소류신으로 치환된 돌연변이 HpaB 인 생촉매 조성물
|
| 7 |
7
제 1 항에 있어서, 상기 미생물이 대장균인 생촉매 조성물
|
| 8 |
8
제 1 항에 있어서, 상기 에쿠올 수산화 유도체가 3'-하이드록시-에쿠올, 6-하이드록시-에쿠올, 8-하이드록시-에쿠올 및 6, 3'-다이하이드록시-에쿠올로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물인 생촉매 조성물
|
| 9 |
9
제 3 항에 있어서, 상기 에쿠올 수산화 유도체가 3'-하이드록시-에쿠올, 6-하이드록시-에쿠올 및 6, 3'-다이하이드록시-에쿠올을 포함하는 것인 생촉매 조성물
|
| 10 |
10
제 9 항에 있어서, 상기 티로시나아제가 서열번호 1 로 나타내는 티로시나아제에서, 209 번째 아르기닌이 글리신, 알라닌, 시스테인, 세린, 트레오닌, 티로신 또는 페닐알라닌으로 치환된 돌연변이 티로시나아제이고,상기 돌연변이 티로시나아제는 6-하이드록시-에쿠올 대비 3'-하이드록시-에쿠올에 대한 선택성이 서열번호 1 로 나타내는 티로시나아제에 비해 1
|
| 11 |
11
제 5 항에 있어서, 상기 에쿠올 수산화 유도체가 3'-하이드록시-에쿠올, 6-하이드록시-에쿠올 및 8-하이드록시-에쿠올을 포함하는 것인 생촉매 조성물
|
| 12 |
12
제 6 항에 있어서, 상기 HpaB 가 서열번호 3 의 아미노산 서열로 나타내는 HpaB 이고, 상기 에쿠올 수산화 유도체가 3'-하이드록시-에쿠올, 6-하이드록시-에쿠올 및 6, 3'-다이하이드록시-에쿠올을 포함하는 것인 생촉매 조성물
|
| 13 |
13
제 6 항에 있어서, 상기 HpaB 가, 서열번호 3 의 아미노산 서열로 나타내는 HpaB 에서 292 번째 트레오닌, 464 번째 세린 또는 469 번째 아르기닌이 글리신, 알라닌, 발린, 류신 또는 이소류신으로 치환된 돌연변이 HpaB 이고,상기 돌연변이 HpaB 를 포함하는 4-하이드록시페닐아세테이트 3-하이드록실라아제가 3'-하이드록시-에쿠올 및 6, 3'-다이하이드록시-에쿠올 대비 6-하이드록시-에쿠올에 대한 선택성이 서열번호 3 으로 나타내는 HpaB 를 포함하는 4-하이드록시페닐아세테이트 3-하이드록실라아제에 비해 2 ~ 16 배 향상된 것을 특징으로 하는 생촉매 조성물
|
| 14 |
14
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항의 생촉매 조성물의 존재 하에서, 에쿠올을 포함하는 반응물을 반응시켜 에쿠올 수산화 유도체를 얻는 단계를 포함하는 에쿠올 수산화 유도체의 제조 방법
|
| 15 |
15
제 14 항에 있어서, 생성된 에쿠올 수산화 유도체의 산화를 억제하기 위해, 상기 반응물이 환원제를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 16 |
16
제 15 항에 있어서, 상기 환원제가 NAD(P)H, L-아스코빅산, 글루타티온(glutathione), 다이타이오트레이톨 (dithiothreitol) 및 시스테인 (cysteine) 으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물인 방법
|
| 17 |
17
제 14 항에 있어서, 다이드제인을 포함하는 반응물을 반응시켜 에쿠올을 얻는 단계를 더 포함하고, 다이드제인을 포함하는 반응물로부터 에쿠올을 얻는 단계와, 에쿠올을 포함하는 반응물로부터 에쿠올 수산화 유도체를 얻는 단계가 동시에 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
|
