| 1 |
1
검출하고자 하는 표적 DNA의 일부와 상보적인 제1서열을 포함하는 제1DNA로 표지된 자성 마이크로비드 및 검출하고자 하는 표적 DNA의 나머지 일부와 상보적인 제2서열을 포함하는 제2DNA로 표지된 제1금속나노큐브를, 검출하고자 하는 표적 DNA를 함유하는 것으로 예측되는 검체와 반응시켜, 시료 중 표적 DNA 존재시 DNA 혼성화에 의해 자성 마이크로비드에 하나 이상의 제1금속나노큐브가 결합된 제1복합체를 형성하는 제1단계;상기 제1복합체를, 상기 제1금속나노큐브에 표지된 제2DNA와 상보적인 제3서열을 포함하는 제3DNA가 수식된 제2금속나노큐브와 반응시켜, 상기 제1금속나노큐브의 자성 마이크로비드와 결합하지 않은 다른 면에 제2금속나노큐브가 결합된 제2복합체를 형성하는 제2단계; 및상기 제2복합체로부터 표면증강라만산란(surface enhanced Raman scattering; SERS) 신호를 측정하는 제3단계;를 포함하는, 표적 DNA의 검출 방법으로서,상기 제1금속나노큐브에 수식된 제2DNA는 라만활성물질로 표지되어 있어 제1금속나노큐브와 제2금속나노큐브 사이에 상기 라만활성물질이 위치하여 제1금속나노큐브와 제2금속나노큐브 사이에서의 전기장 증강에 의해 향상된 라만신호를 나타내는 것이 특징인 방법
|
| 2 |
2
제1항에 있어서,제1단계와 제2단계 사이에 외부로부터 자기장을 인가하고 세척하여 자성 마이크로비드에 결합되지 않은 제1금속나노큐브를 제거하는 제1-1단계를 추가로 포함하는 것인, 방법
|
| 3 |
3
제1항에 있어서,상기 제1금속나노큐브 및 제2금속나노큐브는 각각 독립적으로 금, 은, 백금, 팔라듐 및 구리로 구성된 군으로부터 선택되는 금속으로 된 것인, 방법
|
| 4 |
4
제1항에 있어서,상기 제1금속나노큐브 및 제2금속나노큐브는 10 내지 300 nm의 모서리 길이를 갖는 입자로서, 제1금속나노큐브와 제2금속나노큐브의 모서리 길이의 편차는 ±20%를 초과하지 않는 것인, 방법
|
| 5 |
5
제1항에 있어서,상기 자성 마이크로비드는 0
|
| 6 |
6
제1항에 있어서,상기 제1서열 내지 제3서열은 각각 독립적으로 6 내지 30개 핵산으로 구성된 것인, 방법
|
| 7 |
7
제1항에 있어서,상기 검출하고자 하는 표적 DNA는 10 내지 100개 핵산으로 구성된 것인, 방법
|
| 8 |
8
제1항에 있어서,상기 라만활성물질은 Cy3, Cy3
|
| 9 |
9
제1항에 있어서,상기 제2복합체를, 상기 제2금속나노큐브에 표지된 제3DNA와 상보적인 제2서열을 포함하는 제2DNA가 수식된 제1금속나노큐브와 반응시켜,제1금속나노큐브와 결합하지 않으면서, 자성 마이크로비드와도 면하지 않는, 제2금속나노큐브의 나머지 면들에 추가적인 제1금속나노큐브들이 결합된 제2-n복합체를 형성하는 제2-n단계(이상 n은 1 이상의 정수)를 추가로 포함하는 것인, 방법
|
| 10 |
10
제9항에 있어서,상기 제2-n단계 및 선택적으로 상기 제2단계와 동일하게 수행되는 제2-(n+1)단계를 순차적으로 반복하는 방법으로서, 상기 추가적으로 수행되는 단계는 최종 생성되는 제2-n복합체 또는 제2-(n+1)복합체로부터 자성 마이크로비드를 제외한, 제1금속나노큐브 및 제2금속나노큐브로된 조립체의 크기가 평균 반경 30 nm 내지 900 nm 이내인 범위에서 반복하여 수행되는 것인, 방법
|
| 11 |
11
제1항에 있어서,제3단계로부터 측정된 제2복합체에 대한 신호는 동일 파장에서 제1복합체에 대해 측정된 신호에 비해 100배 이상 증강된 것인, 방법
|
| 12 |
12
1면에는 검출하고자 하는 물질의 다른 일부와 특이적으로 결합하는 제1생체물질을 포함하며, 다른 5면에는 제1'DNA로 표지된 제1'금속나노큐브를 준비하는 제1단계;검출하고자 하는 물질의 일부와 특이적으로 결합하는 하나 이상의 제1생체물질로 표지된 자성 마이크로비드 및 상기 제1단계로부터 준비한, 1면에는 검출하고자 하는 물질의 다른 일부와 특이적으로 결합하는 제1생체물질을 포함하며, 다른 5면에는 제1'DNA로 표지된 제1'금속나노큐브를, 검출하고자 하는 물질을 함유하는 것으로 예측되는 검체와 반응시켜, 시료 중 표적 물질 존재시 특이적인 결합에 의해 자성 마이크로비드에 하나 이상의 제1'금속나노큐브가 결합된 제1'복합체를 형성하는 제2단계;상기 제1'복합체를, 상기 제1'금속나노큐브에 표지된 제1'DNA와 상보적인 서열을 포함하는 제2'DNA가 수식된 제2'금속나노큐브와 반응시켜, 상기 제1금속나노큐브의 자성 마이크로비드와 결합하지 않은 다른 면에 제2'금속나노큐브가 결합된 제2'복합체를 형성하는 제3단계; 및상기 제2'복합체로부터 표면증강라만산란 신호를 측정하는 제4단계;를 포함하는, 표적 물질의 검출 방법으로서,상기 제1'금속나노큐브에 수식된 제1'DNA는 라만활성물질로 표지되어 있어 제1'금속나노큐브와 제2'금속나노큐브 사이에 상기 라만활성물질이 위치하여 제1'금속나노큐브와 제2'금속나노큐브 사이에서의 전기장 증강에 의해 향상된 라만신호를 나타내는 것이 특징인 방법
|
| 13 |
13
제12항에 있어서,제2단계 및 제3단계는 역의 순으로 실시하여, 제1'금속나노큐브를 제2'금속나노큐브와 먼저 결합시킨 후, 제1생체물질로 표지된 자성 마이크로비드 및 시료와 반응시키는 것인, 표적 물질의 검출 방법
|
| 14 |
14
검출하고자 하는 표적 물질의 일부와 특이적으로 결합하는 하나 이상의 제1생체물질로 표지된 자성 마이크로비드;1면에는 검출하고자 하는 물질의 다른 일부와 특이적으로 결합하는 제1생체물질을 포함하며, 다른 5면에는 제1'DNA로 표지된 제1금속나노큐브; 및상기 제1'금속나노큐브에 표지된 제1'DNA와 상보적인 서열을 포함하는 제2'DNA가 수식된 제2'금속나노큐브를 포함하는, SERS에 의한 표적 물질 검출용 키트
|
| 15 |
15
제14항에 있어서,표적 물질로서 DNA 검출을 위하여 상기 자성 마이크로비드는 검출하고자 하는 표적 DNA의 일부와 상보적인 제1서열을 포함하는 제1DNA로 표지되고, 제1'금속나노큐브는 검출하고자 하는 표적 DNA의 나머지 일부와 상보적인 제2서열을 포함하고 라만활성분자가 결합된 제2DNA로 표지되며, 제2'금속나노큐브는 상기 제1금속나노큐브에 표지된 제2DNA와 상보적인 제3서열을 포함하는 제3DNA가 수식된 것인, SERS에 의한 표적 물질 검출용 키트
|
| 16 |
16
제14항에 있어서,완충액을 추가로 포함하는 것인, 키트
|
