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(a) 절단효소 인식부위를 포함하는 프라이머를 표적핵산과 혼합하여, 상기 프라이머가 상기 표적핵산과 상보적으로 결합하여 양 말단부에 상기 절단효소 인식부위를 포함하는 이중나선 구조의 주형을 형성하는 단계;(b) 상기 이중나선 구조의 주형에 상기 절단효소 인식부위에 대응하는 절단효소를 접촉시켜, 상기 절단효소에 의해 상기 절단효소 인식부위를 절단시키는 단계;(c) 상기 절단된 절단효소 인식부위에 중합효소를 첨가하여 중합반응을 통해 단일가닥 절단 생성물을 생성시키는 단계; 및(d) 상기 단일가닥 절단 생성물에 포함된 절단효소 인식부위가 미러링 형태로 교차함으로써 상보적으로 결합하여, 결합된 절단효소 인식부위의 염기서열의 3' 말단으로부터 상기 중합효소를 이용하여 절단효소 증폭반응을 통해 상기 표적핵산을 반복적으로 증폭하는 단계를 포함하는 표적핵산의 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 미러링 형태로 교차함으로써 상보적으로 결합하는 서열에 대하여, 단일가닥 절단 생성물이 다음과 같은 구조로 이중결합하며, 상기 미러링 형태로 교차함으로써 상보적으로 결합하는 서열의 3' 말단부는 상기 절단효소 인식부위를 포함하고, 5' 말단부는 3' 말단부의 절단효소 인식부위의 안티센스 염기서열을 포함하며, 양 말단부 사이에는 역평행한 추가 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출 방법:3'-(N1 N2
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제1항에 있어서, 상기 (a) 단계에서 절단효소 인식부위를 포함하는 1 내지 4 개의 프라이머 및 범퍼 프라이머를 표적핵산과 혼합하는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 절단효소는 Nb
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제1항에 있어서, 상기 중합효소는 Klenow DNA 중합효소, Bsu DNA 중합효소, Vent DNA 중합효소, phi29 DNA 중합효소 및 Bst DNA 중합효소로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 표적핵산이 등온증폭을 통해 증폭되는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 표적핵산의 존재 여부를 확인하여 상기 표적핵산을 검출하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출 방법
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제7항에 있어서, 상기 표적핵산을 검출하는 단계는 전기영동법 또는 광학측정법에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 표적핵산의 검출 방법
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절단효소 인식부위를 포함하는 1 내지 4 개의 프라이머 및 범퍼 프라이머를 포함하는 핵산 검출용 조성물로서, 상기 절단효소 인식부위가 미러링 형태로 교차함으로써 상보적으로 결합하는 것을 특징으로 하는 핵산 검출용 조성물
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제9항에 있어서, 상기 미러링 형태로 교차함으로써 상보적으로 결합하는 서열에 대하여, 단일가닥 절단 생성물이 다음과 같은 구조로 이중결합하며, 상기 미러링 형태로 교차함으로써 상보적으로 결합하는 서열의 3' 말단부는 상기 절단효소 인식부위를 포함하고, 5' 말단부는 3' 말단부의 절단효소 인식부위의 안티센스 염기서열을 포함하며, 양 말단부 사이에는 역평행한 추가 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산 검출용 조성물:3'-(N1 N2
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제9항에 있어서, 절단효소 및/또는 중합효소를 추가로 포함하는 핵산 검출용 조성물
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제11항에 있어서, 상기 절단효소는 Nb
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제11항에 있어서, 상기 중합효소는 Klenow DNA 중합효소, Bsu DNA 중합효소, Vent DNA 중합효소, phi29 DNA 중합효소 및 Bst DNA 중합효소로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 핵산 검출용 조성물
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