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folE 유전자 또는 ribF 유전자가 넉아웃(kmock out) 되거나, folE 유전자 및 ribF 유전자가 넉아웃(kmock out)되어 리보플라빈 생성능이 증가된 재조합 류코노스톡 시트륨 균주
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제1항에 있어서, ribD 유전자, ribE유전자, ribA 유전자 및 ribH 유전자로 구성된 군에서 선택되는 유전자가 추가로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 리보플라빈 생성능이 증가된 재조합 류코노스톡 시트륨 균주
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제1항에 있어서, ribD 유전자, ribE유전자, ribA 유전자 및 ribH 유전자로 구성된 리보 오페론(ribo operon)이 추가로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 리보플라빈 생성능이 증가된 재조합 류코노스톡 시트륨 균주
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류코노스톡 시트륨 균주에서 folE 유전자 또는 ribF 유전자를 넉아웃시키는단계를 포함하는 리보플라빈 생성능이 증가된 재조합 류코노스톡 시트륨 균주의 제조방법
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제4항에 있어서, 상기 넉아웃은 크리스퍼 간섭 기술을 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, 서열번호 13으로 표시되는 ribF 유전자 타겟팅을 위한 가이드 RNA를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, 서열번호 14로 표시되는 folE 유전자 타겟팅을 위한 가이드 RNA를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, 상기 크리스퍼 간섭기술은 dCas9 유전자를 사용하여 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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제8항에 있어서, 상기 크리스퍼 간섭기술은 서열번호 11로 표시되는 P710 프로모터, 서열번호 8로 표시되는 SD 서열 및 서열번호 9로 표시되는 SD2 서열을 가지는 바이시스트로닉 시스템을 이용하여 dCas9을 발현시키는 것을 특징으로 하는 방법
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10
제4항에 있어서, ribD 유전자, ribE유전자, ribA 유전자 및 ribH 유전자로 구성된 리보 오페론(ribo operon)을 추가로 도입시키는 것을 특징으로 하는 방법
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11
다음 단계를 포함하는 리보플라빈의 제조방법:(a) 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 재조합 류코노스톡 시트륨 균주를 배양하여 리보플라빈을 생성시키는 단계; 및(b) 상기 생성된 리보플라빈을 수득하는 단계
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서열번호 11로 표시되는 P710 프로모터, 서열번호 8로 표시되는 SD 서열 및 서열번호 9로 표시되는 SD2 서열을 포함하는 바이시스트로닉 구조체와 타겟 유전자에 대한 가이드 RNA 서열 및 dCas9 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 이용하여, 크리스퍼 간섭 기술로 류코노스톡 시트륨 균주에서 타겟 유전자를 넉아웃시키는 방법
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서열번호 11로 표시되는 P710 프로모터, 서열번호 8로 표시되는 SD 서열 및 서열번호 9로 표시되는 SD2 서열을 포함하는 류코노스톡 시트륨 발현용 바이시스트로닉 구조체
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