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랄스토니아 속 미생물의 유전자를 불활성화시키는 방법

  • 기술번호 : KST2015114042
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 랄스토니아 속 미생물에서 유전자를 불활성화시키는 방법에 관한 것으로, 보다 자세하게는 레반수크라제(levansucrase) 유전자 sacB와 선택적 마커및 선택적 마커의 제거를 위한 특정염기서열을 포함하는 재조합 벡터를 세포간의 접합을 이용하여 형질전환한 후, 수크로즈가 풍부한 배지 조건에서 표적 유전자를 불활성화시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 랄스토니아 속 미생물에서의 표적 유전자를 불활성화시키는 방법 및 이를 이용하여 표적 유전자가 불활성화된 미생물을 제조하는 방법을 이용하면, 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 변이 미생물을 효과적으로 제공함으로써 랄스토니아 속 미생물의 유전적 연구에 유용하다.
Int. CL C12N 15/74 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01)
CPC C12N 15/65(2013.01) C12N 15/65(2013.01) C12N 15/65(2013.01) C12N 15/65(2013.01) C12N 15/65(2013.01)
출원번호/일자 1020100041955 (2010.05.04)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2011-0122434 (2011.11.10) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.05.04)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이상엽 대한민국 대전광역시 유성구
2 박종명 대한민국 충청남도 공주시
3 장유신 대한민국 대전광역시 유성구
4 김태용 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2010.05.04 수리 (Accepted) 1-1-2010-0288840-38
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2011.04.06 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2011.05.19 수리 (Accepted) 9-1-2011-0044611-22
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.11.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0685853-69
5 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2012.03.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0193969-39
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 바실러스 서브틸리스의 레반수크라제 효소를 코딩하는 sacB 유전자; (b) 선택적 마커; (c) loxP, mutant loxP 및 FRT 자리로 구성된 군에서 선택되는 선택적 마커 제거용 염기서열; 및(d) 상동 재조합을 일으킬 수 있는 서열을 포함하는 재조합 벡터
2 2
제1항에 있어서, 상기 재조합 벡터는 복제 기점(origin of relication)을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
3 3
제1항에 있어서, 상기 재조합 벡터는 세포 간의 접합에 의한 DNA 전이를 가능하게 하는 유전자를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
4 4
제1항에 있어서, 상기 세포 간의 접합에 의한 DNA 전이를 가능하게 하는 유전자는 mob 유전자인 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
5 5
제1항에 있어서, 상기 mutant loxP자리는 lox71 및 lox66 자리인 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
6 6
제1항에 있어서, 상기 선택적 마커는 숙주 미생물 내의 표적 유전자와 상동 재조합을 일으킬 수 있는 서열 사이에 존재하는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
7 7
제1항에 있어서, 서열번호 1의 뉴클레오티드 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터 pSMCmacnB
8 8
제1항에 있어서, 상기 선택적 마커는 클로람페니콜(Chloramphenicol), 가나마이신(Kanamycin), 테트라사이클린(Tetracyclin), 엠피실린(Ampicillin), 스펙티노마이신(Spectinomycin), 설폰아마이드(Sulfonamide)계 항생제 및 스트랩토마이신(Streptomycin) 내성 유전자로 구성된 군에서 선택되는 선택적 마커인 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
9 9
다음의 단계를 포함하는 랄스토니아 속 미생물의 표적 유전자를 불활성화시키는 방법:(a) 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 재조합 벡터를 랄스토니아 속 미생물에 도입하고, 상기 재조합 벡터가 도입된 랄스토니아 속 미생물을 선별하는 단계; 및(b) 상기 선별된 미생물을 수크로즈가 함유된 배지에서 배양하여 표적 유전자가 파괴 또는 치환된 랄스토니아 속 미생물을 선별하는 단계
10 10
제9항에 있어서, 상기 미생물은 랄스토니아 유트로파(Ralstonia eutropha)인 것을 특징으로 하는 표적 유전자를 불활성화시키는 방법
11 11
제9항에 있어서, 상기 선택적 마커는 클로람페니콜(Chloramphenicol), 가나마이신(Kanamycin), 테트라사이클린(Tetracyclin), 엠피실린(Ampicillin), 스펙티노마이신(Spectinomycin), 설폰아마이드(Sulfonamide)계 항생제 및 스트랩토마이신(Streptomycin) 내성 유전자로 구성된 군에서 선택되는 선택적 마커인 것을 특징으로 하는 표적 유전자를 불활성화시키는 방법
12 12
다음의 단계를 포함하는 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물을 제조하는 방법:(a) 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 재조합 벡터를 랄스토니아 속 미생물에 도입하고, 상기 재조합 벡터가 도입된 랄스토니아 속 미생물을 선별하는 단계; (b) 상기 선별된 미생물을 수크로즈가 함유된 배지에서 배양하여 표적 유전자가 파괴 또는 치환된 랄스토니아 속 미생물을 선별하는 단계; 및(c) 상기 표적 유전자가 파괴 또는 치환된 랄스토니아 속 미생물에 loxP 자리를 재조합하는 효소, mutant loxP 자리를 재조합하는 효소 및 FRT 자리를 재조합하는 효소로 구성된 군에서 선택되는 재조합효소를 포함하는 셔틀벡터를 도입하여, 재조합 효소의 발현에 의해 선택적 마커의 제거를 위한 염기서열의 재조합이 일어남으로써 상기 선택적 마커를 제거하는 단계
13 13
제12항에 있어서, 상기 재조합 효소를 포함하는 셔틀벡터는 loxP 자리 또는 mutant loxP 자리를 재조합하는 Cre 재조합 효소를 포함하는 셔틀벡터인 것을 특징으로 하는 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물을 제조하는 방법
14 14
제12항에 있어서, 상기 재조합 효소를 포함하는 셔틀벡터는 pTaccreTc인 것을 특징으로 하는 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물을 제조하는 방법
15 15
제12항에 있어서, 상기 재조합 효소를 포함하는 셔틀벡터는 FRT 자리를 재조합하는 Flp 재조합 효소를 포함하는 셔틀벡터인 것을 특징으로 하는 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물을 제조하는 방법
16 16
제12항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 랄스토니아 속 미생물은 랄스토니아 유트로파(Ralstonia eutropha)인 것을 특징으로 하는 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물을 제조하는 방법
17 17
제12항에 있어서, 상기 선택적 마커는 클로람페니콜(Chloramphenicol), 가나마이신(Kanamycin), 테트라사이클린(Tetracyclin), 엠피실린(Ampicillin), 스펙티노마이신(Spectinomycin), 설폰아마이드(Sulfonamide)계 항생제 및 스트랩토마이신(Streptomycin) 내성 유전자로 구성된 군에서 선택되는 선택적 마커인 것을 특징으로 하는 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물을 제조하는 방법
18 18
제12항의 방법에 의해 제조된 표적 유전자가 불활성화된 랄스토니아 속 미생물
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.