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(a) 타겟 캡쳐 프로브로 개질된 자성 마이크로입자(magnetic microparticles, MMP)를 제조하는 단계;(b) 상기 타겟 캡쳐 프로브로 개질된 MMP를 검출하고자 하는 바이오물질 특이적 타겟서열 및 신호 프로브와 혼성화하는 단계;(c) 상기 혼성화된 MMP를 포함하는 용액 및 상기 MMP 용액으로부터 방출된 신호 프로브로부터 형광 신호를 각각 검출하는 단계; 및(d) 상기 방출된 신호 프로브에 금속 나노입자를 첨가하여 라만(SERS) 신호를 검출하는 단계;를 포함하는 바이오물질 다중 검출방법에 관한 것으로서,상기 타겟 캡쳐 프로브와 신호 프로브는 각각 상기 타겟 서열과 반상보적(half-complementary)인 것을 특징으로 하는, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서,상기 (a) 단계의 MMP는 종류가 다른 2개 이상의 타겟 캡쳐 프로브로 개질된 것으로서, 2종 이상의 타겟 서열에 특이적으로 결합하는, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서,상기 (b) 단계에서 혼성화 시간은 3 시간 내지 12 시간이고, 0
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제1항에 있어서,상기 (c) 단계의 방출된 신호 프로브는 상기 혼성화된 MMP 용액에 자기장을 걸어 분산되고, 상기 타겟 서열의 Tm(melting temperature)보다 높은 온도로 가열됨으로써 방출되는 것을 특징으로 하는, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서, 상기 검출방법은 최소 검출한계가 30 fM인 것을 특징으로 하는, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서,상기 금속 나노입자의 표면을 시스테아민(cysteamine), APTES(3-Aminopropyl)triethoxysilane), APTMS(3-Aminopropyl)trimethoxysilane, AEAPTMS(N-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]ethylenediamine, MPTMS(3- Mercaptopropyl)trimethoxysilane, MPTES((3-Mercaptopropyl)triethoxysilane), MPA(mercaptopropionic acid), MHA(6-mercaptohexanoic acid), BDT(1,4- benzenedithiol), MBA(4-mercaptobenzoic acid), 및 MBIA(2 -mercaptobenzoimidazole- 5-carboxylic acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상으로 개질한 것을 특징으로 하는, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서, 상기 신호 프로브는 형광물질, 발색물질, 또는 화학발광물질로 표지되어 있는, 바이오물질 다중 검출방법
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제7항에 있어서,상기 형광물질은 ATTO 계열 염료, 시아닌(Cyanine) 계열 염료, FAM(6-carboxyfluorescein), 텍사스 레드(texas red), 플루 오레신(fluorescein), HEX(2',4',5',7'-tetrachloro-6-carboxy-4,7- dichlorofluorescein), 플루오레신 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸 로다민(tetramethyl rhodamine), FITC(fluorescein isothiocyanate), 오레곤 그린(oregon green), 알렉사 플루오로(alexa fluor), JOE(6-Carboxy-4',5'-Dichloro-2',7'-Dimethoxyfluorescein), ROX(6-Carboxyl-XRhodamine), TET(Tetrachloro-Fluorescein), TRITC(tertramethylrodamine isothiocyanate), TAMRA(6-carboxytetramethyl-rhodamine), NED(N-(1-Naphthyl) ethylenediamine), 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서,상기 검출방법은 웰, 채널, 튜브, 또는 이들의 조합에서 수행되는 것인, 바이오물질 다중 검출방법
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제1항에 있어서,상기 바이오물질은 단백질, 세포, 바이러스, 핵산, 유기분자, 및 무기분자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 바이오물질 다중 검출방법
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11
(a) 타겟 캡쳐 프로브로 개질된 자성 마이크로입자(magnetic microparticles, MMP)를 제조하는 단계;(b) 상기 타겟 캡쳐 프로브로 개질된 MMP를 검출하고자 하는 바이오물질 특이적 타겟 서열 및 신호 프로브와 혼성화하는 단계;(c) 상기 혼성화된 MMP를 포함하는 용액 및 상기 MMP 용액으로부터 방출된 신호 프로브로부터 형광 신호를 각각 검출하는 단계; 및(d) 상기 방출된 신호 프로브에 금속 나노입자를 첨가하여 방출되는 라만(SERS) 신호를 검출하는 단계;를 포함하는 세균 감염성 질환을 진단하기 위한 정보제공방법에 관한 것으로서,상기 타겟 캡쳐 프로브와 신호 프로브는 각각 상기 타겟 서열과 반상보적(half-complementary)인 것을 특징으로 하는, 정보제공방법
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제11항에 있어서,상기 (a) 단계 이전에, 세균 감염성 질환이 의심되는 환자샘플에서 유전체 DNA를 추출하는 단계를 포함하는, 정보제공방법
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제12항에 있어서,상기 환자샘플은 혈액, 혈청, 및 혈장으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 정보제공방법
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제11항에 있어서,상기 (a) 단계의 MMP는 종류가 다른 2개 이상의 타겟 캡쳐 프로브로 개질된 것으로서, 2종 이상의 타겟 서열에 특이적으로 결합하여, 상기 타겟 서열을 포함하는 미생물을 각각 원인균으로 하는 2종 이상의 세균 감염성 질환을 진단하기 위한 정보제공방법
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제11항에 있어서,상기 (d) 단계 이후에, 상기 바이오물질에 의한 형광 신호 또는 라만 신호의 정보를 이용하여 세균 감염성 질환 원인균의 존재 여부 또는 상기 원인균의 종류를 판정하는 단계를 포함하는, 정보제공방법
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제11항에 있어서,상기 금속 나노입자의 표면을 시스테아민(cysteamine), APTES(3-Aminopropyl)triethoxysilane), APTMS(3-Aminopropyl)trimethoxysilane, AEAPTMS(N-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]ethylenediamine, MPTMS(3- Mercaptopropyl)trimethoxysilane, MPTES((3-Mercaptopropyl)triethoxysilane), MPA(mercaptopropionic acid), MHA(6-mercaptohexanoic acid), BDT(1,4- benzenedithiol), MBA(4-mercaptobenzoic acid), 및 MBIA(2 -mercaptobenzoimidazole- 5-carboxylic acid)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상으로 개질한 것을 특징으로 하는, 정보제공방법
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제11항에 있어서,상기 세균 감염성 질환은 패혈증, 부비동염, 폐렴, 식중독, 이질, 결핵, 녹농균 감염, 농가진, 화농성 질환, 급성 피부염, 균혈증, 심내막염, 장염, 골관절염, 골수염, 요로감염, 뇌염, 뇌막염, 및 신장염으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인, 정보제공방법
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제11항에 있어서,세균은 그람 양성균, 그람 음성균 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 정보제공방법
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