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알츠하이머 모델 동물 또는 알츠하이머 환자의 장 움(crypt) 조직에서 분리된 살아있는 세포를 포함하는 인 비트로 세포구조체
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제1항에 있어서, 상기 인 비트로 세포구조체는 구(sphere)의 형태를 띄고, 내강을 가진 것인, 인 비트로 세포구조체
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제1항에 있어서, 상기 장 움 조직에서 분리된 살아있는 세포는 장 상피세포, 장 상피 줄기세포, 또는 이들의 조합인, 인 비트로 세포구조체
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제1항에 있어서, 상기 알츠하이머 모델 동물은 ALDPAPT 마우스인, 인 비트로 세포구조체
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제1항에 있어서, 상기 세포는 미세융모(microvilli)가 있는 정단부(apical surface)가 세포구조체의 내강을 향하고, 기저부(basal surface)가 세포구조체의 외측을 향하는 극성(polarity)을 가진 것인, 인 비트로 세포구조체
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제1항에 있어서, 상기 세포는 미세융모(microvilli)가 있는 정단부(apical surface)가 세포구조체의 외측을 향하고, 기저부(basal surface)가 세포구조체의 내강을 향하는 극성(polarity)을 가진 것인, 인 비트로 세포구조체
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제1항에 있어서, 상기 세포구조체는 i) Muc2, Itln1, Ang4, 및 Reg3g로 이루어진 군으로부터 선택되는 술잔세포 특이적 항균 펩타이드; ii) Zo-1 및 E-cadherin으로 이루어진 군으부터 선택되는 밀착연접(tight junction) 특이 단백질; 또는 iii) 이들의 조합의 발현양이 야생형 동물의 장 움 조직에서 분리된 살아있는 세포를 포함하는 인 비트로 세포구조체에서의 발현양보다 더 적은 것인, 인 비트로 세포구조체
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알츠하이머 모델 동물 또는 알츠하이머 환자의 장 움(crypt) 조직으로부터 분리된 세포를 3차원 배양하는 단계를 포함하는, 인 비트로 세포구조체의 제조방법
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제8항에 있어서, 상기 장 움 조직으로부터 분리된 세포는 장 상피 줄기세포를 포함하는 것인, 인 비트로 세포구조체의 제조방법
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제8항에 있어서, 상기 3차원 배양은 세포외기질을 포함하는 배양 물질에서 배양되는 것인, 인 비트로 세포구조체의 제조방법
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제10항에 있어서, 상기 배양은 B27, N2, N-Acetylcysteine로 이루어진 군으로부터 선택된 보충물; Wnt 작용제; BMP 억제제; EGF(epidermal growth factor); 및 Rho kinase 저해제; 또는 이들의 조합을 포함하는 배지 내에서 이루어지는 것인, 세포구조체의 제조방법
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제11항에 있어서, 상기 Wnt 작용제는 R-spondin1, Wnt3a 및 Wnt surrogate-Fc fusion protein으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 세포구조체의 제조방법
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제11항에 있어서, 상기 BMP 억제제는 Noggin인, 세포구조체의 제조방법
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제11항에 있어서, 상기 Rho kinase 저해제는 Y-27632, 및 H-1152로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 세포구조체의 제조방법
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제10항에 있어서, 상기 세포외 기질을 포함하는 배양물질을 제거하고 현탁배양 하는 단계를 추가적으로 포함하는 것인, 인 비트로 세포구조체의 제조방법
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다음 단계를 포함하는 알츠하이머 병리 완화 효능이 있는 균주의 스크리닝 방법:(a) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 인 비트로 세포구조체에 시험 균주를 처리하는 단계; 및(b) 상기 세포구조체의 Muc2, Itln1, Ang4, 및 Reg3g로 이루어진 군으로부터 선택되는 술잔세포 특이적 항균 펩타이드; ii) Zo-1 및 E-cadherin으로 이루어진 군으부터 선택되는 밀착연접(tight junction) 특이 단백질; 또는 iii) 이들의 조합의 발현양을 측정하는 단계:상기 (b) 단계에서 측정한 i), ii), 또는 iii)의 발현양이 상기 시험 균주를 처리하기 전과 비교하여 증가된 경우 알츠하이머 병리 완화 효능이 있는 균주로 판정함
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다음 단계를 포함하는 알츠하이머 병리 완화 효능이 있는 균주의 스크리닝 방법:(a) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 인 비트로 세포구조체의 내강에 시험 균주 및 형광물질을 처리하는 단계; 및(b) 상기 형광물질이 세포구조체의 내강으로부터 새어나오는 양을 측정하는 단계:상기 (b) 단계에서 측정한 형광물질이 내강으로부터 새어나오는 양이 상기 시험 균주를 처리하기 전과 비교하여 감소된 경우 알츠하이머 병리 완화 효능이 있는 균주로 판정함
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제17항에 있어서, 상기 형광물질은 Fluorescein isothiocyanate(FITC)를 포함하는 것인, 스크리닝 방법
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