1 |
1
인간유래 다능성 줄기세포 유래의 심근병증 모델 세포주 제작을 위한 가이드 RNA (guide RNA)로서, 상기 심근병증 모델 세포주는 TTN, LMNA, DES, 또는 MYH7 유전자가 넉-아웃 (Knock-out)된 것이며, 상기 가이드 RNA는 20~30 bp의 길이를 가지고, 상기 가이드 RNA는 서열번호 1 내지 4로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 염기서열을 포함하는 것인, 가이드 RNA
|
2 |
2
제1항의 가이드 RNA를 암호화하는 유전자를 포함하는, 심근병증 모델 세포주 제작용 벡터
|
3 |
3
제2항에 있어서, 상기 벡터는 Cas 단백질을 암호화하는 유전자를 추가로 포함하는 것인, 심근병증 모델 세포주 제작용 벡터
|
4 |
4
제2항에 있어서, 상기 가이드 RNA를 암호화하는 유전자는 U6 프로모터와 작동 가능하게 연결된 것인, 심근병증 모델 세포주 제작용 벡터
|
5 |
5
제1항의 가이드 RNA 또는 상기 가이드 RNA를 발현하는 벡터를 포함하는, 심근병증 모델 세포주 제작용 조성물
|
6 |
6
제5항에 있어서, 상기 조성물은 Cas 단백질을 발현하는 벡터를 추가로 포함하는 것인, 심근병증 모델 세포주 제작용 조성물
|
7 |
7
제5항의 조성물을 이용하여 배아줄기세포, 유도만능줄기세포 또는 섬유아세포를 형질전환하는 단계를 포함하는 심근병증 모델 세포주 제작 방법
|
8 |
8
제7항에 있어서, 상기 방법은 형질전환 단계 이후에 세포를 단일 세포로 분리하여 군집(colony)가 형성되도록 배양하는 단계를 추가로 포함하는 것인 심근병증 모델 세포주 제작 방법
|
9 |
9
제8항에 있어서, 상기 방법은 상기 배양 단계 이후에 각 군집에서 세포를 획득하고, 획득된 세포에서 DNA를 분리하여 염기서열 분석을 수행하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 심근병증 모델 세포주 제작 방법
|
10 |
10
제9항에 있어서, 상기 형질전환 세포가 배아줄기세포 또는 유도만능줄기세포인 경우, 염기서열 분석을 통해 TTN, LMNA, DES 또는 MYH7 유전자에 교정이 확인된 군집의 세포를 심근세포로 분화하는 단계를 추가로 포함하는, 심근병증 모델 세포주 제작 방법
|
11 |
11
제9항에 있어서, 상기 형질전환 세포가 섬유아세포인 경우, 염기서열 분석을 통해 TTN, LMNA, DES 또는 MYH7 유전자에 교정이 확인된 군집의 세포를 역분화하여 유도만능줄기세포로 제작하고, 상기 유도만능줄기세포를 심근세포로 분화하는 단계를 추가로 포함하는, 심근병증 모델 세포주 제작 방법
|
12 |
12
제7항 내지 제11항 중 하나의 항의 방법으로 제작된 심근병증 모델 세포주
|