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1) 섬유아세포 성장인자(fibroblast growth factor, FGF)의 아미노 말단에 폴리펩티드 링커가 융합되어 줄기세포에 대한 접착활성을 갖는 FGF-폴리펩티드 링커의 재조합 단백질을 제조하는 단계;
2) 상기 재조합 단백질을 폴리펩티드 링커의 아미노 말단을 이용하여 소수성 표면을 갖는 배양용기에 고정시키는 단계; 및
3) 상기 재조합 단백질이 고정된 배양용기에 줄기세포를 접착시켜 배양하는 단계를 포함하는, 고정된 섬유아세포 성장인자(immobilized FGF)를 이용한 줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서,
단계 1)에서 재조합 단백질이 폴리펩티드 링커로 말토오스 결합 단백질(maltose binding protein, MBP)을 FGF의 아미노 말단에 융합시킨 MBP-FGF 재조합 단백질인 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제2항에 있어서,
상기 MBP-FGF 재조합 단백질이 서열번호: 6으로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제2항에 있어서,
단계 2)에서 MBP-FGF 재조합 단백질을 5 내지 100 ㎍/㎖의 농도로 소수성 표면에 고정시키는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서,
단계 2)에서 소수성 표면이 실란화된 표면(silanized surface), 탄화수소 코팅된 표면(hydrocarbon coated surface), 고분자 표면 또는 금속 표면인 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제5항에 있어서,
상기 고분자가 폴리스티렌, 폴리카보네이트, 폴리프로필렌, 폴리에틸렌, 테플론, 폴리테트라플루오로에틸렌, 및 폴리에스테르 함유 생분해성 고분자로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제5항에 있어서,
상기 금속이 스테인레스 스틸, 티탄, 금 및 백금으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서,
단계 2)에서 재조합 단백질과 소수성 표면의 자발적인 물리적 흡착에 의해 상기 재조합 단백질이 상기 소수성 표면에 고정되는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제8항에 있어서,
상기 물리적 흡착이 재조합 단백질과 소수성 표면을 4 내지 25℃에서 1 내지 24시간 동안 반응시켜 이루어지는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서,
단계 2)에서 재조합 단백질 형태로 소수성 표면에 고정된 FGF가 소수성 표면의 외부로 향하게 노출되는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서,
단계 2)에서 재조합 단백질 형태로 소수성 표면에 고정된 FGF가 본래의 생물학적 활성 또는 기능을 50% 이상 유지하는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서,
단계 3)에서 줄기세포가 지방줄기세포, 중간엽줄기세포, 골수줄기세포, 제대혈줄기세포 및 신경줄기세포로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 줄기세포의 배양방법
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