요약 | 본 발명은 색소체 형질전환 방법에 의하여 외래유전자를 식물에 도입함으로써 식물의 색소체에서 외래 단백질을 대량 발현시킬 수 있는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 담배엽록체 형질전환에서 이차로 발생하는 원하지 않는 이차 재조합을 막기 위한 벡터를 이용하는 것으로서, 담배 이외의 생물에서 분리한 프로모터(promoter)와 터미네이터(terminator)를 이용하여 엽록체 형질전환을 수행하여 기존의 담배유래 프로모터/터미네이터(예, rrn 프로모터/psbA 터미네이터)와 비교하여 동등한 정도로 색소체에서 외래 단백질을 효과적으로 대량생산하게 하는 것이다. 구체적으로는 본 발명에서는 담배의 rrn 프로모터와 psbA 터미네이터를 사용하지 않고, 벼의 clp 프로모터와 대장균 rrnB1B2 터미네이터를 가지는 색소체 형질전환벡터를 사용함으로써 psbA 터미네이터 사이에 일어나는 이차 재조합(intramolecular recombination)을 원천적으로 방지하는 방법이다.색소체 형질전환 방법, 벼 clp 프로모터, 대장균 rrnB1B2 터미네이터, 외래 단백질, GFP |
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Int. CL | C12N 15/05 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/29 (2006.01) |
CPC | |
출원번호/일자 | 1020060012477 (2006.02.09) |
출원인 | 한국생명공학연구원 |
등록번호/일자 | 10-0740694-0000 (2007.07.11) |
공개번호/일자 | |
공고번호/일자 | (20070718) 문서열기 |
국제출원번호/일자 | |
국제공개번호/일자 | |
우선권정보 | |
법적상태 | 소멸 |
심사진행상태 | 수리 |
심판사항 | |
구분 | |
원출원번호/일자 | |
관련 출원번호 | |
심사청구여부/일자 | Y (2006.02.09) |
심사청구항수 | 6 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 한국생명공학연구원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 유장렬 | 대한민국 | 대전 유성구 |
2 | 정원중 | 대한민국 | 대전 유성구 |
3 | 정화지 | 대한민국 | 서울 노원구 |
4 | 민성란 | 대한민국 | 대전 유성구 |
5 | 박주영 | 대한민국 | 대전 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 최규환 | 대한민국 | 대전광역시 서구 한밭대로 ***, **층 그린국제특허법률사무소 (둔산동) |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 한국생명공학연구원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | 특허출원서 Patent Application |
2006.02.09 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0095741-17 |
2 | 선행기술조사의뢰서(내부) Request for Prior Art Search (Inside) |
2006.11.06 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
3 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2006.12.04 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-6-2006-0078924-47 |
4 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2007.02.09 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0078334-86 |
5 | 명세서등보정서 Amendment to Description, etc. |
2007.04.09 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2007-0270541-33 |
6 | 의견서 Written Opinion |
2007.04.09 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0270409-14 |
7 | 등록결정서 Decision to grant |
2007.07.11 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0379321-19 |
8 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2008.04.10 | 수리 (Accepted) | 4-1-2008-5054980-73 |
9 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2015.02.05 | 수리 (Accepted) | 4-1-2015-0007152-08 |
번호 | 청구항 |
---|---|
1 |
1 삭제 |
2 |
2 벼 유래의 clp 프로모터(서열번호1) 부위와 대장균 rrnB1B2 터미네이터(서열번호2)를 갖는 색소체 형질전환 후 나타나는 이차 재조합을 방지하는 특징이 있는 외래유전자 발현을 위한 색소체 형질전환용 발현 벡터 |
3 |
3 제2항에 있어서, 외래유전자는 GFP(Green Fluorescent Protein)임을 특징으로 하는 색소체 형질전환용 발현 벡터 |
4 |
4 벼 유래의 clp 프로모터(서열번호1) 부위와 대장균 rrnB1B2 터미네이터(서열번호2)를 갖는 외래유전자 발현을 위한 색소체 형질전환용 GFP(Green Fluorescent Protein) 발현 벡터를 이용하여 GFP(Green Fluorescent Protein)가 발현되는 것을 특징으로 하는 조직배양에 의해 무성번식되는 색소체 형질전환식물체의 제조방법 |
5 |
5 벼 유래의 clp 프로모터(서열번호1) 부위와 rrnB1B2 터미네이터(서열번호2)를 갖는 외래유전자의 발현을 위한 색소체 형질전환용 GFP(Green Fluorescent Protein) 발현 벡터를 이용하여 색소체 형질전환시 원하지 않는 이차 재조합을 막음으로써 색소체에서 외래 단백질이 대량으로 발현하는 특징이 있는 조직배양에 의해 무성번식되는 형질전환 식물체 |
6 |
6 제5항에 있어서, 상기 식물체가 애기장대, 감자, 토마토, 목화, 대두, 유채, 페튜니아, 옥수수, 당근, 벼, 고구마, 고추, 배추, 무, 수박, 오이, 멜론, 국화, 장미, 카네이션으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조직배양에 의해 무성번식되는 형질전환 식물체 |
7 |
7 제5항에 있어서, 외래 단백질은 인체 혈청알부민, 항세균 펩타이드, 인체 인터페론알파, 인체 인터페론감마, 콜레라백신, 파상풍백신, 탄저균 백신, 동물백신을 포함하는 백신 및 항체로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조직배양에 의해 무성번식되는 형질전환 식물체 |
지정국 정보가 없습니다 |
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순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
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1 | JP21525750 | JP | 일본 | FAMILY |
2 | US07888562 | US | 미국 | FAMILY |
3 | US20080301834 | US | 미국 | FAMILY |
4 | WO2007091756 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
---|---|---|---|---|
1 | JP2009525750 | JP | 일본 | DOCDBFAMILY |
2 | JP2009525750 | JP | 일본 | DOCDBFAMILY |
3 | JP2009525750 | JP | 일본 | DOCDBFAMILY |
4 | US2008301834 | US | 미국 | DOCDBFAMILY |
5 | US7888562 | US | 미국 | DOCDBFAMILY |
6 | WO2007091756 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | DOCDBFAMILY |
국가 R&D 정보가 없습니다. |
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공개전문 정보가 없습니다 |
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특허 등록번호 | 10-0740694-0000 |
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표시번호 | 사항 |
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1 |
출원 연월일 : 20060209 출원 번호 : 1020060012477 공고 연월일 : 20070718 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20070711 청구범위의 항수 : 6 유별 : C12N 15/05 발명의 명칭 : 색소체 게놈 내에 삽입된 외래유전자의 이차 재조합을방지하기 위한 벡터개발 존속기간(예정)만료일 : 20130712 |
순위번호 | 사항 |
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1 |
(권리자) 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구... |
제 1 - 3 년분 | 금 액 | 202,500 원 | 2007년 07월 12일 | 납입 |
제 4 년분 | 금 액 | 172,000 원 | 2010년 07월 12일 | 납입 |
제 5 년분 | 금 액 | 172,000 원 | 2011년 07월 11일 | 납입 |
제 6 년분 | 금 액 | 172,000 원 | 2012년 07월 11일 | 납입 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | 특허출원서 | 2006.02.09 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0095741-17 |
2 | 선행기술조사의뢰서(내부) | 2006.11.06 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
3 | 선행기술조사보고서 | 2006.12.04 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-6-2006-0078924-47 |
4 | 의견제출통지서 | 2007.02.09 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0078334-86 |
5 | 명세서등보정서 | 2007.04.09 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2007-0270541-33 |
6 | 의견서 | 2007.04.09 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0270409-14 |
7 | 등록결정서 | 2007.07.11 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0379321-19 |
8 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2008.04.10 | 수리 (Accepted) | 4-1-2008-5054980-73 |
9 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2015.02.05 | 수리 (Accepted) | 4-1-2015-0007152-08 |
기술번호 | KST2014066008 |
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자료제공기관 | 미래기술마당 |
기술공급기관 | 한국생명공학연구원 |
기술명 | 색소체 형질전환 기술 소개 |
기술개요 |
본 발명은 색소체 형질전환 방법에 의하여 외래유전자를 식물에 도입함으로써 식물의 색소체에서 외래 단백질을 대량 발현시킬 수 있는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 담배엽록체 형질전환에서 이차로 발생하는 원하지 않는 이차 재조합을 막기 위한 벡터를 이용하는 것으로서, 담배 이외의 생물에서 분리한 프로모터(promoter)와 터미네이터(terminator)를 이용하여 엽록체 형질전환을 수행하여 기존의 담배유래 프로모터/터미네이터(예, rrn 프로모터/psbA 터미네이터)와 비교하여 동등한 정도로 색소체에서 외래 단백질을 효과적으로 대량생산하게 하는 것이다. 구체적으로는 본 발명에서는 담배의 rrn 프로모터와 psbA 터미네이터를 사용하지 않고, 벼의 clp 프로모터와 대장균 rrnB1B2 터미네이터를 가지는 색소체 형질전환벡터를 사용함으로써 psbA 터미네이터 사이에 일어나는 이차 재조합(intramolecular recombination)을 원천적으로 방지하는 방법이다.색소체 형질전환 방법, 벼 clp 프로모터, 대장균 rrnB1B2 터미네이터, 외래 단백질, GFP |
개발상태 | 기능 및 개념 검증 |
기술의 우수성 |
가. 연구실 보유 색소체 형질전환 기술의 특징
1) 색소체 형질전환은 핵형질전환에 비하여 고비용이며 방법이 까다롭지만, 식물세포 하나에는 200개까지의 색소체가 존재하고 한 개의 색소체는 100여개의 게놈을 가지고 있어서 10,000~50,000 copy의 유전자가 존재하므로 핵형질전환에 비하여 목적 단백질을 약 10,000배 이상 효율적으로 생산할 수 있다는 장점이 있음. 2) 한국등록특허 제740694호는 종래의 담배 엽록체 형질전환에 사용하는 프로모터/터미네이터 시스템에서 이차재조합(recombination)이 발생함으로써 생성되는 비정상적인 엽록체 게놈(genome) 생성을 억제하면서 외래 단백질을 대량 생산하는 기술임. 3) 한국등록특허 제813150호는 MDH유전자를 색소체 형질전환 시스템을 통하여 C3 식물을 형질전환하여 광합성량 바이오매스를증대시키는 방법에 관한 기술로서, MDH 색소체 형질전환 식물체는광합성 효율의 증가와 함께, 식물체의 생장률, 잎의 면적, 줄기 직경 및 바이오매스를 증대시키는데 유용함. 나. 연구실 보유 색소체 형질전환 기술의 차별성 1) 색소체 형질전환 관련 특허 및 기술의 대부분은 유전자 도입의 발현 효율성 및 안정적 유지를 도모하기 위한 백터내 구조 또는 형질전환 방법에 관한 것임. 2) 식물 생산성 향상을 위한 종래의 색소체 형질전환의 목표는 대부분 제초제 저항성 또는 병충해 저항성을 높이기 위한 형질전화체의 개발이었음. 3) 그러나 제초제 또는 병충해 저항성에 관한 색소체 형질전환 연구는 핵형질전환을 대체하기에는 비용이나 시간면에서 미흡한 점이 많으므로, 색소체 형질전환 연구는 핵형질전환이 달성 할 수 없는 목적 단백질의 생산에 초점을 두어야 할 것임. 4) KRIBB의 한국등록특허 제740694호는 색소체 형질전환시 발생하는 이차재조합을 방지한다는 점에서 종래 특허와 차별성을 가지며, 제 813150호는 MDH 유전자를 색소체 형질전환 시스템을 통하여 바이오매스를 증대시키는 방법에 관한 기술이라는 점에서 종래 색소체 형질 전환 연구에서 달성하지 못한 효과를 가져올 수 있음. |
응용분야 | 1) 벼 등 광범위한 작물 |
시장규모 및 동향 | |
희망거래유형 | 기술양도공동연구개발 |
사업화적용실적 | |
도입시고려사항 |
과제고유번호 | 1355049067 |
---|---|
세부과제번호 | 2007-06439 |
연구과제명 | 광합성남세균유전자를활용한CyanoCrop품종개발 |
성과구분 | 등록 |
부처명 | 교육과학기술부 |
연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
연구주관기관명 | 한국생명공학연구원 |
성과제출연도 | 2007 |
연구기간 | 200704~201103 |
기여율 | 0.5 |
연구개발단계명 | 개발연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1525002827 |
---|---|
세부과제번호 | B10400307A270100000 |
연구과제명 | 해양극한생물분자유전체연구 |
성과구분 | 등록 |
부처명 | 국토해양부 |
연구관리전문기관명 | 한국해양수산기술진흥원 |
연구주관기관명 | 한국해양연구원 |
성과제출연도 | 2007 |
연구기간 | 200410~201312 |
기여율 | 0.5 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1350008485 |
---|---|
세부과제번호 | 2006-07135 |
연구과제명 | 광합성남세균유전자의작물엽록체게놈도입에의한''CyanoCrop''개발 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 교육과학기술부 |
연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
연구주관기관명 | 한국생명공학연구원 |
성과제출연도 | 2006 |
연구기간 | 200404~200703 |
기여율 | 0.5 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1520000955 |
---|---|
세부과제번호 | R10400106A200100110 |
연구과제명 | 해양극한생물분자유전체연구 |
성과구분 | 출원 |
부처명 | 국토해양부 |
연구관리전문기관명 | 한국해양수산기술진흥원 |
연구주관기관명 | 한국해양연구원 |
성과제출연도 | 2006 |
연구기간 | 200601~200612 |
기여율 | 0.5 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
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