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신규한 혈소판 활성 측정 방법 및 그를 이용한 장치

  • 기술번호 : KST2015012397
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 다음의 단계를 포함하는 혈소판 활성의 측정방법에 관한 것이다: (a) 혈액 시료를 수득하는 단계; (b) (i) 혈소판 표면항원-특이적 항체 및 상기 항체에 결합된 검출 가능한 시그널을 발생시키는 표지, 그리고 (ii) 단핵구 표면항원-특이적 항체 및 상기 항체에 결합된 검출가능한 시그널을 발생시키는 표지를 상기 혈액 시료에 접촉시키는 단계; (c) 상기 단계 (b)의 결과물의 이미지를 얻는 단계; 및 (d) 상기 이미지를 분석 하는 단계; 상기 단계 (b), 상기 단계 (c) 또는 상기 단계 (b)와 (c)는 마이크로채널(microchannel)이 구비된 마이크로칩에서 실시되며, 상기 이미지 분석은 상기 마이크로채널에 의해 제공되는 일정 부피에서 상기 혈소판 및 상기 단핵구가 결합된 입자를 계수하여 실시되고, 상기 이미지에서 상기 혈소판 및 상기 단핵구가 서로 결합된 이미지가 관찰되는 경우, 상기 혈액 시료 내 혈소판은 활성화 된 것으로 결정한다. 본 발명의 혈소판 활성 측정 방법은 실행이 간편하며, 빠른 시간 내에, 정확하게 혈소판 활성을 측정할 수 있다. 또한, 데이터의 안정성과 재현성이 우수하며, 별도의 시험과정을 거치지 않고도 활성화된 혈소판의 절대농도(Absolute concentration)를 현장진단으로 즉시 파악할 수 있다.
Int. CL C07K 14/705 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) G01N 33/551 (2006.01) G01N 33/533 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020110130785 (2011.12.08)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1424720-0000 (2014.07.23)
공개번호/일자 10-2013-0064255 (2013.06.18) 문서열기
공고번호/일자 (20140804) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.04.27)
심사청구항수 23

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 허대성 대한민국 서울특별시 구
2 오종현 대한민국 서울특별시 강동구
3 김호영 대한민국 서울특별시 강동구
4 윤수영 대한민국 서울특별시 서초구
5 문경철 대한민국 경기도 군포시 광정로 **-**, *

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2011.12.08 수리 (Accepted) 1-1-2011-0974720-50
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2012.04.27 수리 (Accepted) 1-1-2012-0337138-13
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2013.02.01 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2013.03.08 수리 (Accepted) 9-1-2013-0013285-94
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2013.09.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0661199-24
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2013.11.25 수리 (Accepted) 1-1-2013-1072629-94
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2013.11.25 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-1072642-88
8 등록결정서
Decision to grant
2014.03.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0199252-21
9 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status
2014.07.14 수리 (Accepted) 1-1-2014-0658906-25
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.10.10 수리 (Accepted) 4-1-2019-5210941-09
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 혈소판 활성의 측정방법: (a) 혈액 시료를 수득하는 단계; (b) (i) 혈소판 표면항원-특이적 항체 및 상기 항체에 결합된 검출 가능한 시그널을 발생시키는 표지, 그리고 (ii) 단핵구 표면항원-특이적 항체 및 상기 항체에 결합된 검출가능한 시그널을 발생시키는 표지를 상기 혈액 시료에 접촉시키는 단계; (c) 상기 단계 (b)의 결과물의 이미지를 얻는 단계; 및 (d) 상기 이미지를 분석 하는 단계; 상기 단계 (b), 상기 단계 (c) 또는 상기 단계 (b)와 (c)는 마이크로채널(microchannel)이 구비된 마이크로칩에서 실시되며, 상기 이미지 분석은 상기 마이크로채널에 의해 제공되는 일정 부피에서 상기 혈소판 및 상기 단핵구가 결합된 입자를 계수하여 실시되고, 상기 이미지에서 상기 혈소판 및 상기 단핵구가 서로 결합된 이미지가 관찰되는 경우, 상기 혈액 시료 내 혈소판은 활성화 된 것으로 결정하며; 상기 단계 (d)의 이미지 분석은 상기 이미지로부터 상기 혈액 시료 내에서 상기 활성화 된 혈소판의 절대 농도 값을 분석하여 실시한다
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 혈소판 표면항원은 CD154, CD147, CD100, CD63, CD62P, CD61, CD51/CD61(Vitronectin), CD49, CD42, CD43, CD41, CD36, CD31, CD29, 또는 CD9인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제 2 항에 있어서, 상기 혈소판 표면항원은 CD62P 또는 CD41인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 단핵구 표면항원은 CD163, CD64, CD40, CD32, CD16, CD14 또는 CD4인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 4 항에 있어서, 상기 단핵구 표면항원은 CD14인 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 1 항에 있어서, 상기 검출가능한 시그널을 발생시키는 표지는 형광 표지인 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제 1 항에 있어서, 상기 혈소판 표면항원-특이적 항체에 결합된 표지 및 상기 단핵구 표면항원-특이적 항체에 결합된 표지는 서로 다른 것을 특징으로 하는 방법
8 8
삭제
9 9
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a) 이후에 혈액 시료의 고정 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제 9 항에 있어서, 상기 고정은 파라포름알데하이드 및 글리옥살의 혼합용액을 혈액 시료에 첨가하여 실시하는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (b) 이후에 적혈구 용해 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제 11 항에 있어서, 상기 방법은 상기 적혈구 용해 시간에 의존적으로 상기 방법의 전체 반응시간이 단축되는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a) 또는 단계 (b) 이후에 혈액 시료의 농축 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제 13 항에 있어서, 상기 농축은 상기 마이크로칩에 구비된 농축수단에 의해 실시되며, 상기 농축수단은 상기 마이크로칩의 깊이(depth) 변화가 있는 마이크로채널에 의해 제공되는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
삭제
16 16
제 13 항에 있어서, 상기 혈소판 표면항원-특이적 항체 및 단핵구 표면항원-특이적 항체는 자성입자의 표면에 결합되어 있고 상기 농축은 자성을 상기 마이크로칩에 인가(apply)하여 실시하는 것을 특징으로 하는 방법
17 17
제 1 항에 있어서, 상기 마이크로칩의 마이크로채널은 변화가 있는 깊이를 가지며 상기 변화가 있는 깊이는 상기 이미지의 초점을 조절하는 데 이용되는 것을 특징으로 하는 방법
18 18
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)의 이미지 분석은 상기 혈소판에 대한 이미지 및 상기 단핵구에 대한 이미지를 머징(merging) 하여 실시하는 것을 특징으로 하는 방법
19 19
다음을 포함하는 혈액 시료 내 혈소판 활성 측정 장치:(a) (i) 혈소판 표면항원-특이적 항체 및 상기 항체에 결합된 검출 가능한 시그널을 발생시키는 표지, (ⅱ) 단핵구 표면항원-특이적 항체 및 상기 항체에 결합된 검출가능한 시그널을 발생시키는 표지, 및 (ⅲ) 혈액 시료를 수용하기 위한 마이크로채널(microchannel)이 구비된 마이크로칩; (b) 상기 마이크로칩 내 혈액 시료에 광을 조사하기 위한 광원; (c) 상기 광원에 의해 생성된 상기 혈액 시료의 이미지를 촬상하기 위한 이미징 수단; (d) 상기 이미징 수단에 의해 얻은 이미지로부터 상기 마이크로채널에 의해 제공되는 일정 부피 내 혈소판 및 단핵구가 결합된 입자를 계수하고, 상기 혈액 시료 내의 혈소판 및 단핵구가 서로 결합된 이미지 정보를 처리하여 상기 혈액 시료 내 혈소판의 활성화 여부를 결정하거나 상기 혈액 시료 내에서 활성화 된 혈소판의 절대 농도 값을 분석하는 이미지 프로세서
20 20
제 19 항에 있어서, 상기 마이크로칩은 농축수단이 구비되며, 상기 농축수단은 상기 마이크로칩의 깊이 변화가 있는 마이크로채널에 의해 제공되는 것을 특징으로 하는 장치
21 21
삭제
22 22
제 20 항에 있어서 상기 마이크로 채널은 깊이가 20-200 ㎛인 것을 특징으로 하는 장치
23 23
제 20 항에 있어서, 상기 마이크로칩은 혈소판 및 단핵구 특이적 항체가 결합된 자성입자를 포함하고, 상기 농축은 자성을 상기 마이크로칩에 인가(apply)하여 실시하는 것을 특징으로 하는 장치
24 24
제 19 항에 있어서, 상기 마이크로칩의 마이크로채널은 변화가 있는 깊이를 가지며 상기 변화가 있는 깊이에 의해 상기 이미지의 초점을 조절하는 것을 특징으로 하는 장치
25 25
제 19 항에 있어서, 상기 이미지 프로세서는 상기 혈소판에 대한 이미지 및 상기 단핵구에 대한 이미지를 머징(merging) 하여 이미지 정보를 처리하는 것을 특징으로 하는 장치
26 26
제 19 항에 있어서, 상기 이미지 프로세서는 혈소판, 단핵구 및 혈소판 및 단핵구가 결합된 입자를 동시에 계수하는 것을 특징으로 하는 장치
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1 서울시정개발 연구원 고려대학교 산학협력단 2009년도 중소기업 제품개선 지원사업 혈액 및 골수세포에서 CD34, Leukemia maker 및 혈소판 활성도 측정용 키트개발