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1) 중간엽 줄기세포를 아미노산이 600 내지 1,900 ㎎/ℓ의 양으로, 비타민이 12 내지 36 ㎎/ℓ의 양으로 각각 포함된 세포 배양용 배지에서 배양하는 단계,2) 단계 1)에서 배양된 세포를, 아미노산이 2,000 내지 3,000 ㎎/ℓ의 양으로, 비타민이 40 내지 60 ㎎/ℓ의 양으로 각각 포함된 세포 배양용 무혈청 배지로 옮기고, EGF를 첨가하여 배양함으로써 세포 분화를 유도하는 전 처리 단계,3) 단계 2)에서 얻어진 배양물에 트립신 또는 콜라게나제를 처리하여 배양 용기에 부착된 세포 덩어리를 탈착시켜 세포를 자가 응집시킴으로써 모유두 조직을 형성하는 단계, 및4) 단계 3)에서 형성된 모유두 조직을 회수한 후, EGF가 포함된 단계 2)의 세포 배양용 무혈청 배지에서 모유두 조직을 배양하는 후 처리 단계를 포함하는, 모유두 조직의 제조방법
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제1항에 있어서, 단계 1에서 상기 중간엽 줄기세포가 골수, 지방조직 또는 탯줄에서 유래된 것임을 특징으로 하는, 모유두 조직의 제조 방법
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제1항에 있어서, 단계 1)의 세포 배양용 배지는 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배지, DMEM/F-12, F-12, McCoy's 5A, RPMI 1640 배지, 윌리엄 배지 E (Williams' medium E) 또는 IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Modification) 배지인 것을 특징으로 하는, 모유두 조직의 제조방법
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제1항에 있어서, 단계 1)에서 중간엽 줄기세포를 1 내지 20 세대까지 배양하는 것을 특징으로 하는, 모유두 조직의 제조방법
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제 1항에 있어서, 상기 EGF의 첨가량은 1 내지 1000 ng/㎖의 범위인 것을 특징으로 하는, 모유두 조직의 제조방법
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제1항에 있어서, 단계 2)의 세포 배양용 무혈청 배지가 아미노산으로서 L-아르기닌, L-아스파라진, L-아스파르트산, L-시스틴ㆍ2HCl, L-이소루이신, L-루이신, 및 L-리신ㆍHCl을 각각 30 내지 200 ㎎/ℓ로, L-페닐알라닌, L-트립토판, 및 L-티로신을 각각 30 내지 210 ㎎/ℓ로, 그리고 L-알라닌, L-글루탐산, L-글리신, L-히스티딘, L-메티오닌, L-프롤린, L-세린, L-트레오닌, 및 L-발린을 각각 50 내지 600 ㎎/ℓ로 포함하고; 비타민으로서 바이오틴, D-Ca 판토테네이트, 및 리보플라빈을 각각 0
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제1항에 있어서, 단계 2)의 세포 배양용 무혈청 배지가 인슐린, 트랜스페린, 소듐 셀레나이트, 하이드로코티손, 및 알부민을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 모유두 조직의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 모유두 조직이 중간엽 줄기세포로부터 분화된 세포들로 구성된 세포 응집체임을 특징으로 하는, 모유두 조직의 제조방법
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