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IsPETase 단백질 결정체의 제조 방법 및 IsPETase 변이체

  • 기술번호 : KST2020001194
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 IsPETase 단백질 결정체의 제조 방법, 상기 단백질의 입체구조를 이용하여 IsPETase 단백질 활성 조절제를 스크리닝하는 방법 및 IsPETase 변이체를 스크리닝하는 방법, 및 PETase 활성이 증가한 IsPETase 변이체 및 이를 이용한 PET 분해 방법에 관한 것이다. 본 발명에서는 IsPETase의 단백질 결정체를 효과적으로 제조할 수 있는 방법을 규명하고, 이로부터 제조된 결정체를 획득하였다. 또한, 상기 결정체로부터 IsPETase의 3차 구조를 규명하여, 이러한 구조를 기반으로 PETase 활성이 증가된 변이체를 제조하였다. 상기 IsPETase 변이체는 PET 분해 분야에 효과적으로 활용될 수 있다.
Int. CL C12N 9/18 (2006.01.01) C12N 15/52 (2006.01.01) C12N 15/70 (2006.01.01) C12N 15/77 (2006.01.01) C12Q 1/44 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020190017256 (2019.02.14)
출원인 경북대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2020-0017321 (2020.02.18) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020180092540   |   2018.08.08
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2019.02.14)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 경북대학교 산학협력단 대한민국 대구광역시 북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김경진 대구광역시 수성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 피씨알 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로***, **층(삼성동, 송암빌딩*)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 경북대학교 산학협력단 대구광역시 북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2019.02.14 수리 (Accepted) 1-1-2019-0157237-10
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.12.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0920105-25
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2020.01.03 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0008017-35
4 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2020.01.03 수리 (Accepted) 1-1-2020-0008016-90
5 등록결정서
Decision to grant
2020.01.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0054479-74
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.23 수리 (Accepted) 4-1-2020-5136893-04
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 1의 아미노산 서열에서 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는 IsPETase 변이체로서, 서열번호 1의 N-말단으로부터 280번째 아미노산의 알라닌으로 치환을 포함하는, IsPETase 변이체
2 2
제1항에 있어서, 다음의 아미노산 치환 중 어느 하나를 더 포함하는 IsPETase 변이체:(a) 서열번호 1의 N-말단으로부터 121번째 아미노산의 아스파르트산으로 치환,(b) 서열번호 1의 N-말단으로부터 186번째 아미노산의 히스티딘, 페닐알라닌, 이소루신, 루신, 또는 발린으로 치환, (c) 서열번호 1의 N-말단으로부터 121번째 아미노산의 아스파르트산으로 치환; 및 서열번호 1의 N-말단으로부터 186번째 아미노산의 히스티딘, 페닐알라닌, 이소루신, 루신, 또는 발린으로 치환
3 3
제1항에 있어서, 상기 IsPETase 변이체는 서열번호 1의 N-말단으로부터 121번째 아미노산의 아스파르트산으로 치환, 186번째 아미노산의 히스티딘으로 치환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함하는, IsPETase 변이체
4 4
제1항에 있어서, 다음의 아미노산 치환 중 어느 하나를 더 포함하는 IsPETase 변이체:(a) 서열번호 1의 N-말단으로부터 121번째 아미노산의 글루탐산으로 치환,(b) 서열번호 1의 N-말단으로부터 186번째 아미노산의 히스티딘, 페닐알라닌, 이소루신, 루신, 또는 발린으로 치환, 및(c) 서열번호 1의 N-말단으로부터 121번째 아미노산의 글루탐산으로 치환; 및 서열번호 1의 N-말단으로부터 186번째 아미노산의 히스티딘, 페닐알라닌, 이소루신, 루신, 또는 발린으로 치환
5 5
제1항에 있어서, 상기 IsPETase 변이체는 서열번호 1의 N-말단으로부터 121번째 아미노산의 글루탐산으로 치환, 186번째 아미노산의 히스티딘으로 치환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환을 추가로 포함하는, IsPETase 변이체
6 6
제1항에 있어서, 상기 IsPETase 변이체는 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것인, IsPETase 변이체
7 7
제3항에 있어서, 상기 IsPETase 변이체는 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 것인, IsPETase 변이체
8 8
제5항에 있어서, 상기 IsPETase 변이체는 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 것인, IsPETase 변이체
9 9
제1항에 있어서, 상기 IsPETase 변이체는 IsPETase 야생형과 비교하여 PETase 활성이 증가하는 것인, IsPETase 변이체
10 10
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 IsPETase 변이체를 처리하는 단계를 포함하는, Poly(ethylene terephthalate)(PET) 분해 방법
11 11
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 IsPETase 변이체를 코딩하는, 폴리뉴클레오티드
12 12
제11항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 재조합 벡터
13 13
제12항의 재조합 벡터로 형질 전환된, 미생물
14 14
제13항에 있어서, 상기 미생물은 대장균(Escherichia coli) 또는 코리네박테 리움 글루타미컴(Corynebacterium glutamicum) 균주인 것인, 미생물
15 15
i) 10 내지 20%(v/v) 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol, PEG) 10000, pH 4
16 16
제15항에 있어서, 상기 저수조 용액은 17%(v/v) 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycol, PEG) 10000, pH 5
17 17
(a) 제15항의 IsPETase 단백질 결정체의 제조 방법에 따라 제조된 IsPETase 단백질의 입체구조를 이용하여 IsPETase 단백질 활성 조절 후보 펩티드 또는 IsPETase 단백질 결합 후보 화합물을 생성 또는 선별하는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계에서 생성 또는 선별된 후보 펩티드 또는 화합물이 IsPETase 단백질의 활성을 조절하는지 여부를 확인하는 단계를 포함하는, IsPETase 단백질 활성 조절제의 스크리닝 방법
18 18
제15항의 IsPETase 단백질 결정체의 제조 방법에 따라 제조된 IsPETase 단백질의 입체구조로부터 기질 결합 부위를 확인하는 단계를 포함하는, IsPETase 변이체의 스크리닝 방법
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1 US10851355 US 미국 FAMILY
2 US20200048621 US 미국 FAMILY

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