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변형된 당 대사 경로를 갖는 재조합 균주를 이용한 당이성화 효소의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2018016531
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 균주에 다른 균주 유래의 효소를 도입하여 변형된 당 대사 경로를 갖는 재조합 균주에 관한 것이며, 이를 이용하여 유용물질을 얻거나, 유용물질을 생산할 수 있는 다양한 변이체 및 변이 효소를 고속 스크리닝 할 수 있는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 재조합 벡터 및 균주를 이용하면, 새로운 대사경로를 균주에 구축하여 D-갈락토오스로부터 D-타가토오스를 효과적으로 수득할 수 있을 뿐만 아니라, 무작위적으로 변형된 당 전환 효소를 도입한 후, 세포 성장 기반 초고속 탐색법을 수행함으로써, D-갈락토오스 당전환 변이효소를 빠르게 스크리닝 할 수 있는 장점이 있다.
Int. CL C12N 15/10 (2017.01.01) C12N 15/70 (2006.01.01) C12N 9/88 (2006.01.01) C12N 9/90 (2006.01.01) C12Q 1/04 (2017.01.01) C40B 30/06 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020180163575 (2018.12.17)
출원인 경북대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2018-0136928 (2018.12.26) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020160178419   |   2016.12.23
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자 10-2017-0044740 (2017.04.06)
관련 출원번호 1020170044740
심사청구여부/일자 Y (2018.12.17)
심사청구항수 4

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 경북대학교 산학협력단 대한민국 대구광역시 북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이동우 대구광역시 북구
2 신선미 대전광역시 중구
3 주윤혜 경상남도 양산시
4 성재윤 대구광역시 수성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김순웅 대한민국 서울시 구로구 디지털로**길 **, ***호 (구로동,에이스테크노타워*차)(정진국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 경북대학교 산학협력단 대구광역시 북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2018.12.17 수리 (Accepted) 1-1-2018-1268590-71
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.01.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0004521-75
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.03.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0220896-34
4 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.03.04 수리 (Accepted) 1-1-2019-0220853-82
5 등록결정서
Decision to grant
2019.07.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0536194-15
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.23 수리 (Accepted) 4-1-2020-5136893-04
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번호 청구항
1 1
1) D-갈락토오스 및 D-타가토오스 비대사성인 균주에 D-타가토오스-1,6-비스포스페이트 알돌라아제를 코딩하는 유전자를 도입하여 D-타가토오스 대사성 균주를 얻는 단계;2) L-아라비노오스 이성화효소를 코딩하는 유전자에 무작위 유전자 변이를 유발하여 유전자 변이 라이브러리를 수득하는 단계; 3) 상기 유전자 변이 라이브러리의 변이 유전자를 상기 1) 단계의 D-타가토오스 대사성 균주에 도입하여 균주 라이브러리를 얻는 단계; 및4) 상기 균주 라이브러리의 균주를 D-갈락토오스 포함 제한 배지에서 배양하여 균의 성장을 확인하는 단계; 를 포함하는 D-갈락토오스 대사능 및 D-타가토오스 대사능을 갖는 변이체의 고속 스크리닝 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 2) 단계의 무작위 유전자 변이는 변이-유발 (error-prone) PCR을 통해 수행되는 것을 특징으로 하는, D-갈락토오스 대사능 및 D-타가토오스 대사능을 갖는 변이체의 고속 스크리닝 방법
3 3
1) D-갈락토오스 및 D-타가토오스 비대사성인 균주에 D-타가토오스-1,6-비스포스페이트 알돌라아제를 코딩하는 유전자를 도입하여 D-타가토오스 대사성 균주를 얻는 단계;2) L-아라비노오스 이성화효소를 코딩하는 유전자에 무작위 유전자 변이를 유발하여 유전자 변이 라이브러리를 수득하는 단계; 3) 상기 유전자 변이 라이브러리의 변이 유전자를 상기 1) 단계의 D-타가토오스 대사성 균주에 도입하여 균주 라이브러리를 얻는 단계; 4) 상기 균주 라이브러리의 균주를 D-갈락토오스 포함 제한 배지에서 배양하여 균의 성장을 확인하여 높은 성장을 나타내는 D-갈락토오스 대사능 및 D-타가토오스 대사능을 갖는 균주를 수득하는 단계; 및 5) 상기 4) 단계에서 수득된 균주에 도입된 변이 효소를 확인하는 단계; 를 포함하는 당전환능을 갖는 L-아라비노오스 이성화효소 변이효소의 고속 스크리닝 방법
4 4
서열번호 2 내지 4로 이루어진 군에서 선택된 1종의 아미노산 서열로 표시되는, 당전환능을 갖는 L-아라비노오스 이성화효소 변이효소
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5 WO2018117773 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 EP3578651 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
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3 KR20180074550 KR 대한민국 DOCDBFAMILY
4 US2020087647 US 미국 DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농림축산식품부 경북대학교 산학협력단 고부가가치식품기술개발사업 단백질 공학기술을 활용한 산업용 당전환효소 개발
2 농림축산식품부 경북대학교 산학협력단 포스터게놈다부처유전체사업 미생물 참조유전체 확보 및 비교유전체 분석을 통한 농·식품 유용 기능성 탐색
3 미래창조과학부 경북대학교 산학협력단 이공분야 기초연구사업, 중견연구자지원사업, 핵심연구지원사업 차세대염기서열분석기술을 활용한 초호열균의 난분해성 케라틴 분해기작 연구