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게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 소 세포를 선별하는 방법에 있어서,상기 선별 방법은 아래의 단계를 포함하고,a) 형광 소 세포를 준비하는 단계;상기 형광 소세포는 게놈 내 1개 이상의 위치에 형광 단백질 유전자를 포함하고,상기 형광 단백질 유전자은 게놈 내 타겟 좌위 유전자와 다른 유전자인 것을 특징으로 하며,b) 형광 소 세포에 조성물을 처리하는 단계; 및상기 조성물은 i) 형광 단백질 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산;ii) 게놈 내 타겟 좌위의 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산; 및iii) Cas 단백질 또는 이를 인코딩하는 핵산;을 포함하고c) 비 형광 소 세포를 선택하는 단계;상기 비 형광 소 세포는 게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서,상기 조성물은 게놈 내 타겟 좌위에 삽입될 트랜스유전자(transgene)을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 선별 방법
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제1항에 있어서,상기 형광 소 세포를 준비하는 단계는형광 단백질 유전자를 게놈 내 염색체4의 95433564-95434563 위치; 염색체 4의 113823097-113823101 위치; 및 염색체 6의 20085913-20086912 위치에 포함하는 소를 이용하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 선별 방법
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제1항에 있어서,상기 형광 소 세포에 조성물을 처리하는 단계는상기 형광 단백질 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산 및상기 게놈 내 타겟 좌위의 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산을 동시에 처리하는 것을 특징으로 하는 선별 방법
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제1항에 있어서,상기 형광 소 세포에 조성물을 처리하는 단계는상기 조성물을 벡터 형태로 처리하는 것을 특징으로 하는 선별 방법
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제1항에 있어서,상기 형광 소 세포에 조성물을 처리하는 단계는상기 조성물을 RNP(ribonucleoprotein)형태로 처리하는 것을 특징으로 하는 선별 방법
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게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 소 세포에 있어서,상기 변형된 유전자는 베타-락토글로불린(BLG) 유전자 또는 프리온(PRNP) 유전자이며,상기 소 세포는 게놈 내 1개 이상의 위치에 변형된 형광 단백질 유전자를 포함하고,상기 형광 단백질 유전자는 게놈 내 타겟 좌위 유전자와 다른 유전자인 것을 특징으로 하는 소 세포
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상기 제 7항에 있어서,상기 소세포는 게놈 내 3개의 위치에 변형된 형광 단백질 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 소 세포
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제 7항에 있어서,상기 게놈 내 1개 이상의 위치는 염색체 4의 95433564-95434563 위치;염색체 4의 113823097-113823101 위치; 및염색체 6의 20085913-20086912 위치 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 소 세포
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게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 소를 생산하는 방법에 있어서,상기 방법은a) 형광을 나타내는 세포를 준비하는 단계;상기 세포는 게놈 내 1개 이상의 위치에 형광 단백질 유전자를 포함하고, 상기 형광 단백질 유전자는 게놈 내 타겟 좌위 유전자와 다른 유전자인 것을 특징으로 하며,b) 상기 형광을 나타내는 세포에 조성물을 처리하는 단계;상기 조성물은 형광 단백질 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산;게놈 내 타겟 좌위 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산; 및 Cas 단백질 또는 이를 인코딩하는 핵산을 포함하는 것을 특징으로 하며,c) 비-형광 세포를 선택하는 단계; 및상기 비-형광 세포는 게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하며,d) 상기 비-형광 세포를 대리모의 자궁에 이식하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 소 생산 방법
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제 10항에 있어서,상기 변형된 유전자는 베타-락토글로불린(BLG) 유전자 또는 프리온(PRNP) 유전자인 것을 특징으로 하는 소 생산 방법
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제 10항에 있어서, 상기 조성물은 게놈 내 타겟 좌위에 삽입될 트랜스유전자(transgene)을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 소 생산 방법
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제 10항에 있어서,상기 게놈 내 1개 이상의 위치는염색체 4의 95433564-95434563 위치;염색체 4의 113823097-113823101 위치; 및염색체 6의 20085913-20086912 위치 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 소 생산 방법
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게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 소에 있어서,상기 변형된 유전자는 베타-락토글로불린(BLG) 유전자 또는 프리온(PRNP) 유전자이며,상기 소는 게놈 내 1개 이상의 위치에 변형된 형광 단백질 유전자를 포함하고,상기 형광 단백질 유전자는 게놈 내 타겟 좌위 유전자와 다른 유전자이며,상기 게놈 내에 존재하는 형광 단백질 유전자는 다음 세대에서 같은 자리에 전달되는 것을 특징으로 하는 소
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제 14항에 있어서, 상기 소는 게놈 내 3개의 위치에 변형된 형광 단백질 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 소
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제 14항에 있어서,상기 게놈 내 1개 이상의 위치는i) 염색체 4의 95433564-95434563 위치;ii) 염색체 4의 113823097-113823101 위치; 및iii) 염색체 6의 20085913-20086912 위치 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 소
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게놈 내 타겟 좌위에 변형된 유전자를 포함하는 소 세포를 선별하기 위한 키트에 있어서,상기 키트는i) 형광 소 세포;상기 소 세포는 게놈 내 1개 이상의 위치에 형광 단백질 유전자를 포함하고,ii) 형광 단백질 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산; 및iii) Cas 단백질 또는 이를 인코딩하는 핵산; 을 포함하는 키트
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제17항에 있어서,상기 형광 단백질은 녹색 형광단백질인 것을 특징으로 하는 키트
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제17항에 있어서,상기 키트는 게놈 내 타겟 좌위 유전자에 대한 가이드 RNA 또는 이를 인코딩하는 핵산을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 키트
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제19항에 있어서,상기 키트는 게놈 내 타겟 좌위에 삽입될 트랜스유전자(transgene)를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 키트
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제17항에 있어서,상기 Cas 단백질은 Cas9 단백질 또는 Cpf1 단백질인 것을 특징으로 하는 키트
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제17항에 있어서,상기 형광 소 세포는 게놈 내 3개의 위치에 형광 단백질 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 키트
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제17항에 있어서,상기 게놈 내 1개 이상의 위치는i) 염색체 4의 95433564-95434563 위치;ii) 염색체 4의 113823097-113823101 위치; 및iii) 염색체 6의 20085913-20086912 위치 중 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 키트
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