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Cas12 이펙터 단백질 또는 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드; 표적 서열에 혼성화할 수 있는 가이드 폴리뉴클레오티드로서, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드는 루프 구조(loop structure)를 갖지 않고 이중 가닥 핵산 듀플렉스를 포함하지 않는 것인 폴리뉴클레오티드; 및 상기 가이드 폴리뉴클레오티드와 연결되어 있지 않은 일부의 또는 전부의 직접 반복부 서열을 포함하고,tracr 서열을 포함하지 않으며, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드와 상기 직접 반복부 서열은 상보적으로 결합하지 않아 듀플렉스 구조를 이루지 않는 조작된, 비-천연 발생의 CRISPR-Cas 시스템
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청구항 1에 있어서, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드는 crRNA이고, 상기 crRNA는 표적 서열에 혼성화할 수 있는 스페이서 서열로 이루어져 있는 폴리뉴클레오티드이거나, 직접 반복부 서열의 일부가 연결된 스페이서 서열로 이루어져 있는 조작된 폴리뉴클레오티드인 것인, 시스템
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3
청구항 2에 있어서, 상기 스페이서 서열에 연결된 직접 반복부 서열의 일부는 이펙터 단백질의 절단 활성을 유도할 수 없고, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드와 연결되어 있지 않은 일부의 또는 전부의 직접 반복부 서열과 함께 이펙터 단백질의 절단 활성을 유도할 수 있는 것인, 시스템
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청구항 1에 있어서, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드는 줄기-루프 구조(stem-loop structure)를 갖지 않는 것인, 시스템
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삭제
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청구항 1에 있어서, 상기 직접 반복 서열은 성숙형(mature) 또는 미-성숙형(pre-mature) 직접 반복 서열인 것인, 시스템
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청구항 1에 있어서, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드와 상기 가이드 폴리뉴클레오티드에 연결되어 있지 않은 직접 반복부 서열은 표적 서열의 말단으로 절단을 유발하는 Cas12 이펙터 단백질과 복합체를 형성하는 것인, 시스템
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삭제
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청구항 1에 있어서, 상기 표적 서열은 프로토스페이서 인접 모티프(PAM)의 3'인 것인, 시스템
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청구항 9에 있어서, 상기 PAM은 5' T-풍부 모티프를 포함하는 것인, 시스템
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11
청구항 1에 있어서, 상기 표적 서열은 세포 내에 있는 것인, 시스템
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12
청구항 11에 있어서, 상기 세포는 원핵 세포 또는 진핵 세포인 것인, 시스템
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청구항 12에 있어서, 상기 진핵 세포는 식물 세포 또는 동물 세포인 것인, 시스템
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청구항 1에 있어서, 상기 Cas12 이펙터 단백질은 Cas12a, mgCas12a, Cas12b, Cas12c, Cas12d, Cas12e, Cas12g, Cas12h, 및 Cas12i로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것인, 시스템
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청구항 1에 있어서, 상기 Cas12 이펙터 단백질은 프란시셀라 툴라렌시스 1, 프란시셀라 툴라렌시스 아종 노비시다, 프레보텔라 알벤시스, 라크노스피라세아에 박테리움 MC2017 1, 부티리비브리오 프로테오클라스티쿠스, 페레그리니박테리아 박테리움 GW2011_GWA2_33_10, 파르쿠박테리아 박테리움 GW2011_GWC2_44_17, 스미텔라 종 SCADC, 아시다미노코커스 종 BV3L6, 라크노스피라세아에 박테리움 MA2020, 칸디다투스 메타노플라즈마 테르미툼, 유박테리움 엘리겐스, 모락셀라 보보쿨리 237, 렙토스피라 이나다이, 라크노스피라세아에 박테리움 ND2006, 포르피로모나스 크레비오리카니스 3, 프레보텔라 디시엔스 및 포르피로모나스 마카카에로 이루어진 군으로부터 선택되는 박테리아 종으로부터 유래된 것인, 시스템
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청구항 1에 있어서, 상기 이펙터 단백질은 하나 이상의 핵 국소화 신호를 포함하는 것인 시스템
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Cas12 이펙터 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오티드; 표적 서열에 혼성화할 수 있는 가이드 폴리뉴클레오티드로서, 상기 가이드 폴리뉴클레오티드는 루프 구조(loop structure)를 갖지 않고 이중 가닥 핵산 듀플렉스를 포함하지 않는 것인 폴리뉴클레오티드; 및 상기 가이드 폴리뉴클레오티드와 연결되어 있지 않은 일부의 또는 전부의 직접 반복부 폴리뉴클레오티드를 포함하고, tracr 서열을 포함하지 않으며,상기 가이드 폴리뉴클레오티드와 상기 직접 반복부 서열은 상보적으로 결합하지 않아 듀플렉스 구조를 이루지 않는 조작된, 비-천연 발생의 CRISPR-Cas 벡터시스템
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청구항 1의 CRISPR-Cas 시스템, 또는 청구항 17의 CRISPR-Cas 벡터 시스템을 관심 표적 유전자좌 또는 상기 유전자좌를 함유하는 세포에 전달하는 단계를 포함하는 비-인간 유기체, 단리된 세포, 또는 시험관 내에서 관심 표적 유전자좌를 변형하는 방법
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청구항 18에 있어서, 상기 관심 표적 유전자좌의 변형은 가닥 파손인 방법
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청구항 18에 있어서, 상기 관심 표적 유전자좌는 엇갈린 DNA 이중 가닥 손상 내로 DNA 삽입물의 통합에 의해 변형되는 것인 방법
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청구항 18에 있어서, 상기 시스템은 입자, 소포, 또는 하나 이상의 바이러스 벡터를 통해 전달되는 것인 방법
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청구항 1의 CRISPR-Cas 시스템, 또는 청구항 17의 CRISPR-Cas 벡터 시스템을 표적 핵산과 접촉시키는 단계를 포함하는 비-인간 유기체, 단리된 세포, 또는 시험관 내에서 핵산을 표적화하는 방법
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