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줄기세포를 혈관세포로 분화시키는 방법 및 이를 이용한 생체 내 혈관신생 유도

  • 기술번호 : KST2014049359
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 줄기세포를 3차원 세포집합체(cell cluster) 형태로 배양하여 혈관세포로 분화시키는 방법 및 생체 내 혈관신생을 위한 상기 3차원 세포집합체의 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 1) 줄기세포를 표면이 소수성을 띠는 배양용기 혹은 성장인자가 고정화된 배양용기에 접착시켜 배양하는 단계; 2) 배양된 줄기세포의 밀도가 증가함에 따라 줄기세포가 배양용기로부터 탈착되어 3차원 세포집합체를 형성하는 단계; 및 3) 3차원 세포집합체 형태로 증식하면서 줄기세포가 혈관세포로 분화되는 단계를 포함하는, 줄기세포를 혈관세포로 분화시키는 방법 및 상기 방법에 의해 줄기세포로부터 분화된 혈관세포로 구성된 3차원 세포집합체를 혈관신생을 위한 세포치료제로 사용하는 용도에 관한 것이다.
Int. CL C12M 3/00 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01) C12N 5/071 (2010.01) C12N 11/04 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020100002149 (2010.01.11)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-1109125-0000 (2012.01.17)
공개번호/일자 10-2010-0106905 (2010.10.04) 문서열기
공고번호/일자 (20120215) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020090024681   |   2009.03.24
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020110107237;
심사청구여부/일자 Y (2010.01.11)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김상헌 대한민국 서울특별시 성북구
2 김수현 대한민국 서울특별시 서초구
3 박인수 대한민국 서울특별시 성북구
4 정영미 대한민국 서울 종로구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 한라특허법인(유한) 대한민국 서울시 서초구 강남대로 ***(서초동, 남강빌딩 *층)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 (주) 에스바이오메딕스 서울특별시 성동구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2010.01.11 수리 (Accepted) 1-1-2010-0014910-33
2 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2010.03.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2010-0183586-51
3 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2011.06.30 수리 (Accepted) 1-1-2011-0503291-40
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.07.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0397966-97
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2011.09.19 수리 (Accepted) 1-1-2011-0726650-57
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.10.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0819575-89
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.10.19 수리 (Accepted) 1-1-2011-0819573-98
8 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application		 2011.10.19 수리 (Accepted) 1-1-2011-0819579-61
9 등록결정서
Decision to grant		 2012.01.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0010591-94
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
11 대리인선임신고서
Report on Appointment of Agent		 2015.12.23 수리 (Accepted) 1-1-2015-5033520-42
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
1) 지방줄기세포 또는 중간엽줄기세포 중에서 선택된 줄기세포를 표면이 소수성을 띠는 배양용기에 접착시켜 배양하는 단계;2) 파종된 줄기세포의 밀도가 증가함에 따라 줄기세포가 배양용기로부터 탈착되어 3차원 포집합체를 형성하는 단계; 및3) 3차원 세포집합체 형태로 증식하면서 줄기세포가 혈관세포로 분화되는 단계를 포함하는, 줄기세포를 혈관세포로 분화시키는 방법
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3 3
제1항에 있어서, 단계 1)에서 줄기세포가 1× 104 내지 1× 105 세포/㎠의 농도로 배양용기에 접종되는 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, 단계 1)에서 배양용기가 실란화된 표면(silanized surface), 탄화수소 코팅된 표면(hydrocarbon coated surface), 고분자 표면 및 금속 표면으로 구성된 군으로부터 선택되는 소수성 표면을 갖는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제4항에 있어서, 상기 고분자가 폴리스티렌(polystyrene), 폴리메틸메타크릴레이트(PMMA), 폴리에틸렌 테레프탈레이트(PET), 폴리비닐클로라이드(PVC), 폴리에틸렌(PE), 폴리프로필렌(PP), 폴리테트라플루오르에틸렌(PTFE), 폴리(L-락트산)(PLLA), 폴리(D,L-락트산）(PDLLA), 폴리(글리콜산)(PGA), 폴리(카프로락톤)(PCL), 폴리(하이드록시알카노에이트), 폴리다이옥산온(PDS), 폴리트라이메틸렌카보네이트, 이들의 공중합체 및 이들의 유도체로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제4항에 있어서, 상기 금속이 스테인레스 스틸, 티탄, 금 및 백금으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제1항에 있어서, 단계 1)에서 줄기세포가 소수성 표면과의 세포-기질간 상호작용에 의해 배양용기에 접착되거나, 배양용기 표면에 고정된 줄기세포에 접착활성을 갖는 성장인자와의 상호작용에 의해 배양용기에 접착되는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제7항에 있어서, 상기 성장인자가 혈관내피 성장인자(VEGF), 섬유아세포 성장인자(FGF), 표피 성장인자(EGF), 혈소판-유도 내피 성장인자(PDGF), 간세포 성장인자 (HGF), 인슐린 유사 성장인자 (IGF) 및 헤파린 결합 도메인 (HBD) 으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제7항에 있어서, 상기 성장인자가 5 내지 100 ㎍/㎖의 농도로 배양용기 표면에 고정되는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제7항에 있어서, 상기 성장인자가 폴리펩티드 링커를 이용하여 폴리펩티드 링커의 카르복실 말단에 성장인자의 아미노 말단이 융합되어 있는 폴리펩티드 링커-성장인자 재조합 단백질 형태로 배양용기 표면에 고정되는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제10항에 있어서, 상기 폴리펩티드 링커가 말토오스 결합 단백질(maltose-binding protein, MBP), 하이드로포빈(hydrophobin) 및 소수성 세포 투과성 펩티드(hydrophobic cell penetrating peptides, CPPs)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제10항에 있어서, 상기 폴리펩티드 링커-성장인자 재조합 단백질이 말토오스 결합 단백질(MBP)의 카르복실 말단에 섬유아세포 성장인자(FGF)의 아미노 말단이 융합되어 있고, 서열번호: 1의 아미노산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제1항에 있어서, 단계 2)에서 배양된 줄기세포의 밀도가 증가함에 따라 세포-기질간 상호작용보다 세포-세포간 상호작용이 강해지면서 줄기세포가 배양용기로부터 탈착되면서 3차원 세포집합체를 형성하는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제1항에 있어서, 단계 3)에서 3차원 세포집합체 내부에 저산소 상태가 조성되면서 혈관신생 촉진인자의 생성이 증가하고 그로 인해 줄기세포가 혈관세포로 분화되는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제1항에 있어서, 단계 3)에서 수득되는 세포집합체는 3차원 구조의 최장 폭에 해당하는 부분의 직경이 400 ㎛ 내지 1 ㎜의 직경을 갖고 줄기세포로부터 분화된 혈관세포로 구성되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 단계 1)에서 줄기세포가 소수성 표면과의 세포-기질간 상호작용에 의해 배양용기에 접착되는 경우, 단계 1) 내지 3)의 배양이 35℃내지 38
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제1항에 있어서, 단계 1)에서 배양용기 표면에 고정된 줄기세포에 접착활성을 갖는 성장인자와의 상호작용에 의해 배양용기에 접착되는 경우, 단계 1) 내지 3)의 배양이 35℃내지 38
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3 US20120134965 US 미국 FAMILY
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5 WO2010110596 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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