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암줄기세포 스페로이드 제조방법

  • 기술번호 : KST2019015812
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 암줄기세포 스페로이드를 제조하기 위한 방법 또는 키트와, 상기 제조된 암줄기세포 스페로이드를 이용하여 암세포 내성 치료용 약물의 스크리닝 방법에 관한 발명으로서, 간편하게 암줄기세포 스페로이드를 제조할 수 있고, 제조된 암줄기세포 스페로이드는 암세포 내성 치료용 약물을 스크리닝에 효과적으로 활용될 수 있다.
Int. CL C12N 5/095 (2010.01.01) G01N 33/50 (2017.01.01)
CPC C12N 2500/30(2013.01) C12N 2500/30(2013.01) C12N 2500/30(2013.01)
출원번호/일자 1020180128190 (2018.10.25)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0093108 (2019.08.08) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020180012338   |   2018.01.31
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2018.10.25)
심사청구항수 25

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 전상용 대전광역시 유성구
2 최민석 대전광역시 유성구
3 임성갑 대전광역시 유성구
4 이대엽 대전광역시 유성구
5 유승정 대전광역시 유성구
6 최윤정 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 팬코리아특허법인 대한민국 서울특별시 강남구 논현로**길 **, 역삼***빌딩 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2018.10.25 수리 (Accepted) 1-1-2018-1055911-05
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
3 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2019.09.03 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0640274-32
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.11.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-1128714-31
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.11.04 수리 (Accepted) 1-1-2019-1128713-96
6 등록결정서
Decision to grant
2020.03.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0192869-70
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1
알부민 및 세포 배양용 배지를 포함하는, 암세포로부터 암줄기세포를 유도하는 조성물로서,상기 알부민은 암세포의 암줄기세포 유도제이며,상기 암세포의 암줄기세포 유도제인 알부민의 농도는 5 내지 200 mg/ml인, 조성물
2 2
제1항에 있어서, 상기 암줄기세포는 스페로이드 형태인, 조성물
3 3
제1항에 있어서, 상기 알부민은 10 내지 200mg/ml의 농도로 배지에 포함되는 것인, 조성물
4 4
제1항에 있어서, 상기 알부민은 혈청 대체제(Serum Replacement)로서 제공되거나, 혈청 대체제에 상기 알부민이 추가로 첨가되어 제조된 제제로서 제공되거나, 또는 FBS(Fetal bovine serum)에 알부민이 추가로 첨가되어 제조된 제제로서 제공되는 것인, 조성물
5 5
제1항에 있어서, 상기 알부민은 혈청 알부민(serum albumin), 난백 알부민(ovalbumin), 락트알부민(lactalbumin) 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 조성물
6 6
제5항에 있어서, 상기 혈청 알부민은 소혈청 알부민, 인간혈청 알부민 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 조성물
7 7
제1항에 있어서, 상기 암줄기세포는 암세포를 분리한 개체 특이적인 암줄기세포인, 조성물
8 8
제1항에 있어서, 상기 암줄기세포는 세포 이동성, 침투성, 약물내성, 및 암 형성능으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상의 특성을 갖는 것인, 조성물
9 9
제1항에 있어서, 상기 암줄기세포는 CD47, BMI-1, CD24, CXCR4, DLD4, GLI-1, GLI-2, PTEN, CD166, ABCG2, CD171, CD34, CD96, TIM-3, CD38, STRO-1, CD19, CD44, CD133, ALDH1A1, ALDH1A2, EpCAM, CD90, 및 LGR5로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 마커가 발현되는 것인, 조성물
10 10
제1항에 있어서, 상기 암세포는 난소암, 유방암, 간암, 뇌암, 대장암, 전립선암, 자궁경부암, 폐암, 위암, 피부암, 췌장암, 구강암, 직장암, 후두암, 갑상선암, 부갑상선암, 결장암, 방광암, 복막암, 부신암, 설암, 소장암, 식도암, 신우암, 신장암, 심장암, 십이지장암, 요관암, 요도암, 인두암, 질암, 편도암, 항문암, 흉막암, 흉선암 또는 비인두암으로부터 유래하는 것인, 조성물
11 11
제1항에 있어서, 상기 암세포는, 인간 난소암 세포주, 인간 유방암 세포주, 인간 간암종 세포주, 인간 아교 교아종 세포주, 인간 대장암 세포주, 인간 폐암 세포주, 인간 전립선암 세포주, 인간 자궁경부암 세포주, 인간 흑색종 세포주, 및 인간 위암 세포주로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상인, 조성물
12 12
제1항에 있어서, 상기 조성물은, 알부민을 제외한 다른 성장인자를 포함하지 않는 것을 특징으로 하는, 조성물
13 13
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 이용하여, 암세포를 배양하는 단계를 포함하는, 암세포로부터 암줄기세포를 제조하는 방법
14 14
제13항에 있어서, 상기 암세포를 배양하는 단계는, 사이클로실록산 중합체를 포함하는 세포배양 기판 위에서 암세포를 배양하는 것으로 수행되는 것인, 방법
15 15
제14항에 있어서, 상기 사이클로실록산 중합체를 포함하는 세포배양 기판은 물접촉각이 90°미만인 것인, 방법
16 16
제14항에 있어서, 상기 사이클로실록산 중합체는 하기 화학식 1을 갖는 단량체를 포함하는 호모중합체 또는 헤테로중합체인, 방법:[화학식 1]상기 식에서,A는 이고, n은 1 내지 8의 정수이며;R1은 서로 독립적으로 수소 또는 C2-10 알케닐이고, 2 이상의 R1은 C2-10 알케닐이며;R2는 서로 독립적으로 수소, C1-10 알킬, C2-10 알케닐, 할로, 금속원소, C5-14 헤테로사이클, C3-10 사이클로알킬 또는 C3-10 사이클로알케닐이다
17 17
제16항에 있어서, 상기 화학식 1의 화합물은 R1 위치에 n+1개 또는 n+2개의 C2-10 알케닐을 갖는 것을 특징으로 하는, 방법
18 18
제17항에 있어서, 상기 사이클로실록산 화합물은 2,4,6,8-테트라(C2-10)알케닐-2,4,6,8-테트라(C1-10)알킬사이클로테트라실록산, 1,3,5-트리(C1-10)알킬-1,3,5-트리(C2-10)알케닐사이클로트리실록산, 1,3,5,7-테트라(C1-10)알킬-1,3,5,7-테트라(C2-10)알케닐사이클로테트라실록산, 1,3,5,7,9-펜타(C1-10)알킬-1,3,5,7,9-펜타(C2-10)알케닐사이클로펜타실록산, 1,3,5-트리(C1-10)알킬-1,3,5-트리(C2-10)알케닐사이클로트리실록산, 1,3,5,7-테트라(C1-10)알킬-1,3,5,7-테트라(C2-10)알케닐사이클로테트라실록산, 1,3,5,7,9-펜타(C1-10)알킬-1,3,5,7,9-펜타(C2-10)알케닐사이클로펜타실록산, 1,3,5-트리(C1-10)알킬-1,3,5-트리(C2-10)알케닐사이클로트리실록산, 1,3,5,7-테트라(C1-10)알킬-1,3,5,7-테트라(C2-10)알케닐사이클로테트라실록산, 1,3,5,7,9-펜타(C1-10)알킬-1,3,5,7,9-펜타(C2-10)알케닐사이클로펜타실록산, 헥사(C2-10)알케닐사이클로트리실록산, 옥타(C2-10)알케닐사이클로테트라실록산, 데카(C2-10)알케닐사이클로펜타실록산, 2,4,6,8-테트라비닐-2,4,6,8,-테트라메틸사이클로테트라실록산 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 방법
19 19
제16항에 있어서, 상기 사이클로실록산 중합체는 화학식 1을 갖는 제1단량체와, 비닐기를 포함하는 제2단량체의 헤테로중합체이며,상기 제2단량체는, 비닐기를 갖는 실록산, 메타크릴레이트계 단량체, 아크릴레이트계 단량체, 방향족 비닐계 단량체, 아크릴아마이드계 단량체, 말레익 안하이드라이드, 비닐기를 갖는 실라잔 또는 사이클로실라잔, 비닐기를 갖는 C3-10 사이클로알케인, 비닐피롤리돈, 2-(메타크릴로일록시)에틸 아세토아세테이트, 1-(3-아미노프로필)이미다졸, 비닐이미다졸, 비닐피리딘, 및 비닐기를 갖는 실란으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 방법
20 20
제18항에 있어서, 상기 제2단량체는 1,3,5-트리비닐-1,3,5-트리메틸사이클로트리실록산, 2,4,6,8-테트라메틸-2,4,6,8-테트라비닐사이클로테트라실록산(V4D4), 2,4,6,8,10-펜타메틸-2,4,6,8,10-펜타비닐사이클로펜타실록산, 2,4,6,8,10,12-헥사메틸-2,4,6,8,10,12-헥사비닐-사이클로헥사실록산, 옥타(비닐실라제스퀴옥산), 및 2,2,4,4,6,6,8,8,10,10,12,12-도데카메틸사이클로헥사실록산으로 이루어지는 군에서 선택되는 1종 이상인, 방법
21 21
제13항에 있어서, 상기 암줄기세포 스페로이드의 제조방법은 인위적인 유전자 조작을 수행하지 않는 것인, 방법
22 22
사이클로실록산 중합체를 포함하는 세포배양 기판, 및 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는, 암줄기세포의 스페로이드 제조용 키트
23 23
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 이용하여, 암세포를 배양하여 암줄기세포의 스페로이드를 제조하는 단계;상기 암줄기세포의 스페로이드에 후보물질을 처리하는 단계; 상기 후보물질 처리군과 후보물질 미처리 대조군의 암줄기세포 생존율을 측정하는 단계; 및 상기 후보물질 처리군의 암줄기세포 생존율을, 후보물질의 미처리 대조군의 암줄기세포 생존율과 비교하는 단계를 포함하는, 암 치료용 약물의 스크리닝 방법
24 24
제23항에 있어서, 상기 생존율을 비교하여, 상기 후보물질 처리군의 암줄기세포 생존율이 대조군의 생존율보다 낮은 경우, 상기 후보물질을 암 치료용 약물로 결정하는 단계를 추가로 포함하는, 방법
25 25
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 이용하여, 암세포를 배양하여 암줄기세포의 스페로이드를 제조하는 단계;상기 암줄기세포의 스페로이드에, 암세포의 약물내성 완화 후보물질을, 암세포 내성 약물과 함께 처리하는 단계; 및상기 후보물질 처리군의 암줄기세포 생존율을, 후보물질의 미처리 대조군의 암줄기세포 생존율과 비교하는 단계를 포함하는, 암세포의 약물내성 완화용 약물의 스크리닝 방법
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