| 1 |
1
i) 제1 미디엄(medium) 채널; 제1 하이드로젤 채널; 제1 하이드로젤 분해효소 채널; 제2 하이드로젤 채널; 및 제2 하이드로젤 분해효소 채널이 일련의 순서로 배치된 미세유체칩을 준비하는 단계;ii) 상기 제1 하이드로젤 채널 및 제2 하이드로젤 채널 각각에 세포가 포함된 하이드로젤을 주입하는 단계;iii) 상기 세포와 하이드로젤이 주입된 미세유체칩을 인큐베이션하여 세포를 공배양하는 단계;iv) 상기 미디엄 채널에 5 ℃ 이하의 미디엄을 주입하고, 상기 모든 하이드로젤 분해효소 채널에 분해효소 활성화온도의 하이드로젤 분해효소를 주입하는 단계;v) 미디엄과 하이드로젤 분해효소가 주입된 미세유체칩을 하이드로젤 분해효소 활성화 온도에서 인큐베이션하는 단계; 및vi) 상기 제1 및 제2 하이드로젤 채널에서 선택적으로 세포를 추출하는 단계;를 포함하는, 미세유체칩으로부터 선택적으로 세포를 분리하는 방법
|
| 2 |
2
제1항에 있어서, 상기 i) 단계에서, 상기 미세유체칩은상기 제1 미디엄(medium) 채널; 제1 하이드로젤 채널; 제1 하이드로젤 분해효소 채널; 제2 하이드로젤 채널; 및 제2 하이드로젤 분해효소 채널이 각각 저장소와 연결되고, 그리고 수두차(waterhead pressure)가 발생하도록 상기 제1 미디엄 채널의 저장소의 수면 높이는 상기 제1 및 제2 하이드로젤 분해효소 채널의 저장소의 수면 높이보다 더 높은 것인, 방법
|
| 3 |
3
제1항에 있어서, 상기 ii) 단계에서,상기 세포의 종류는 서로 동일하거나 또는 서로 다른 것인, 방법
|
| 4 |
4
제1항에 있어서, 상기 하이드로젤은 다공성 구조로 이루어져 있어서 각각의 채널 사이의 물질 교환이 가능한 것인, 방법
|
| 5 |
5
제1항에 있어서,상기 하이드로젤은, 콜라겐(Collagen), 알지네이트(Alginate), 피브린(Fibrin), 히알루론산(Hyaluronic Acid), 아가로즈(Agarose), PHEMA(Polyhydroxyethylmethacrylate), PVA(Polyvinyl alcohol), PEG(Poly(ethylene glycol)), PEO(Poly(ethylene oxide)), PEGDA(Polyethylene (glycol) diacrylate), 젤라틴(Gelatin), 매트리젤(Matrigel), PLLA(poly(L-lactic acid)), 카복시메틸셀룰로오스(Carboxymethylcellulose), 덱스트란(Dextran), 키토산(Chitosan) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법
|
| 6 |
6
제1항에 있어서,상기 iv) 단계에서, 상기 미디엄 채널에서는 상기 미디엄 채널과 상기 제1 하이드로젤 분해효소 채널 사이의 수두차(water pressure)에 의해 제1 미디엄 채널에서 제1 하이드로젤 분해효소 채널 방향으로 유동이 발생해 제1 하이드로젤 분해효소 채널에서 제1 하이드로젤 채널 방향으로 하이드로젤 분해효소가 확산(diffusion)되는 것을 방해함으로써, 제1 하이드로젤 채널에 도달하는 하이드로젤 분해효소의 농도가 제2 하이드로젤 채널에 도달하는 하이드로젤 분해효소의 농도보다 낮은 것인, 방법
|
| 7 |
7
제1항에 있어서, 상기 v) 단계는,상기 제1 하이드로젤 채널과 제2 하이드로젤 채널의 하이드로젤 분해효소 반응을 조절하는 단계로,제1 하이드로젤 채널 보다 제2 하이드로젤 채널에 도달하는 하이드로젤 분해효소의 농도가 높고, 제1 하이드로젤 채널보다 제2 하이드로젤 채널의 온도가 높아서 하이드로젤 분해 반응이 빨리 일어나는 것인, 방법
|
| 8 |
8
제1항에 있어서, 상기 v) 단계에서, 상기 배양온도는 30 내지 40℃인, 방법
|
| 9 |
9
제1항에 있어서, 상기 vi) 단계에서,상기 제1 하이드로젤 채널보다 제2 하이드로젤 채널에서 하이드로젤 분해효소 반응이 빨리 일어나서 제2 하이드로젤 채널의 하이드로젤이 먼저 용해됨으로써 제2 하이드로젤로부터 세포를 먼저 분리하는 것인 방법
|
| 10 |
10
제1항에 있어서, 상기 i) 단계의 미세유체칩을 준비하는 단계에서, 상기 미세유체칩은상기 제1 미디엄(medium) 채널; 제1 하이드로젤 채널; 제1 하이드로젤 분해효소 채널; 제2 하이드로젤 채널; 및 제2 하이드로젤 분해효소 채널에, 제3 하이드로젤 채널 및 제2 미디엄 채널을 일련의 순서로 더 추가하여 배치된 미세유체칩인, 방법
|
| 11 |
11
i) 제1 미디엄(medium) 채널; 제1 하이드로젤 채널; 제1 하이드로젤 분해효소 채널; 제2 하이드로젤 채널; 및 제2 하이드로젤 분해효소 채널; 제3하이드로젤 채널; 및 제2미디엄 채널이 일련의 순서로 배치된 미세유체칩을 준비하는 단계;ii) 상기 제1 하이드로젤 채널, 제2 하이드로젤 채널 및 제3 하이드로젤 채널 각각에 세포가 포함된 하이드로젤을 주입하는 단계;iii) 상기 세포와 하이드로젤이 주입된 미세유체칩을 인큐베이션하여 세포를 공배양하는 단계;iv) 상기 미디엄 채널에 5℃ 이하의 미디엄을 주입하고, 상기 모든 효소 채널에 30-40℃의 하이드로젤 분해효소를 주입하는 단계;v) 미디엄과 하이드로젤 분해효소가 주입된 미세유체칩을 하이드로젤 효소 배양 최적 온도에서 인큐베이션하는 단계; 및vi) 상기 제1, 제2 및 제3 하이드로젤 채널에서 선택적으로 세포를 추출하는 단계;를 포함하는, 미세유체칩으로부터 선택적으로 세포를 분리하는 방법
|
| 12 |
12
제11항에 있어서,상기 vi) 단계에서, 상기 제2 하이드로젤 채널에서 먼저 세포를 추출하는 것인, 방법
|
