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Ｐｕｔａｔｉｖ ｅ ＨＴＨ－ｔｙｐｅ 전사조절인자 ＹｊｄＣ를 융합발현파트너로 이용한 가용성 재조합 단백질의 제조방법
- 기술번호 : KST2015133882
- 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
- 전화번호 : 02-2155-3662
| 요약 | 본 발명은 Putative HTH-type 전사조절인자 YjdC(Putative HTH-type transcriptional regulator yjdC; YjdC)를 융합발현파트너로 이용하는 재조합 단백질의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 1) 융합발현파트너(fusion expression partner)인 YjdC, 및 외래 단백질의 유전자를 연결한 발현벡터를 제조하는 단계, 2) 상기 발현벡터를 숙주세포에 도입하여 형질전환체를 제조하는 단계, 및 3) 상기 형질전환체를 배양하여 재조합 단백질의 발현을 유도하고 이를 수득하는 단계를 포함하는 재조합 단백질의 제조방법, 및 상기 제조방법에 의해 제조된 재조합 단백질에 관한 것이다. 본 발명의 YjdC는 스트레스 환경하에서도 자체 구조적 안정성을 유지할 수 있는 대장균내 단백질로 이 단백질의 유전자를 융합발현파트너로 사용하여 재조합 단백질을 제조하는 방법은 기존의 융합발현파트너가 가지고 있는 가용성 및 접힘(folding) 능력을 향상시켜 목적 단백질의 구조적 안정성을 유지하며 높은 생산 수율로 발현시킬 수 있으므로, 의료용 및 산업용 단백질 생산에 유용하게 이용될 수 있다. Putative HTH-type 전사조절인자 YjdC(Putative HTH-type transcriptional regulator yjdC; YjdC), 융합발현파트너(fusion expression partner), 스트레스 환경 |
|---|---|
| Int. CL | C12N 15/31 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01) |
| CPC | C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) C12N 15/68(2013.01) |
| 출원번호/일자 | 1020080135711 (2008.12.29) |
| 출원인 | 고려대학교 산학협력단 |
| 등록번호/일자 | 10-1077613-0000 (2011.10.21) |
| 공개번호/일자 | 10-2010-0077690 (2010.07.08) 문서열기 |
| 공고번호/일자 | (20111027) 문서열기 |
| 국제출원번호/일자 | |
| 국제공개번호/일자 | |
| 우선권정보 | |
| 법적상태 | 등록 |
| 심사진행상태 | 수리 |
| 심판사항 | |
| 구분 | 신규 |
| 원출원번호/일자 | |
| 관련 출원번호 | |
| 심사청구여부/일자 | Y (2008.12.29) |
| 심사청구항수 | 17 |
출원인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 고려대학교 산학협력단 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
발명자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 이지원 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 2 | 송종암 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 3 | 한경연 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 4 | 박진승 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 5 | 서혁성 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 6 | 안금영 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 7 | 이종환 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 8 | 이은정 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 9 | 권수정 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
대리인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 이원희 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동) |
최종권리자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 고려대학교 산학협력단 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2008.12.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2008-0899580-78 |
| 2 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2009.06.09 | 수리 (Accepted) | 4-1-2009-5111177-32 |
| 3 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2010.08.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2010-5149278-93 |
| 4 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2011.02.09 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 5 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2011.03.04 | 수리 (Accepted) | 9-1-2011-0018248-07 |
| 6 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2011.03.09 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0133084-18 |
| 7 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2011.05.04 | 수리 (Accepted) | 1-1-2011-0333940-86 |
| 8 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2011.05.04 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2011-0333941-21 |
| 9 | 등록결정서 Decision to grant |
2011.10.05 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0572922-05 |
| 10 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.02.11 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5018243-16 |
| 11 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.04.22 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5049934-62 |
| 12 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2019.10.10 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5210941-09 |
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 |
1 1) 융합발현파트너(fusion expression partner)로서 서열번호 1로 기재되는 Putative HTH-type 전사조절인자 YjdC(Putative HTH-type transcriptional regulator yjdC; YjdC)의 유전자, 및 외래 단백질의 유전자가 연결된 재조합 단백질의 유전자 컨스트럭트가 포함된 발현벡터를 제조하는 단계; 2) 상기 단계 1)의 발현벡터를 숙주세포에 도입하여 형질전환체를 제조하는 단계; 3) 상기 단계 2)의 형질전환체를 배양하여 상기 재조합 단백질의 발현을 유도하고 이를 수득하는 단계; 및 4) 상기 단계 3)에서 수득된 재조합 단백질에서 외래 단백질을 분리하는 단계를 포함하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 2 |
2 삭제 |
| 3 |
3 제 1항에 있어서, 상기 외래 단백질은 항원, 항체, 세포수용체, 효소, 구조 단백질, 혈청 및 세포 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 생물학적 활성을 갖는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 4 |
4 제 3항에 있어서, 상기 외래 단백질은 인간 과립구 군체 자극인자(granulocyte colony-stimulating factor; hG-CSF)인 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 5 |
5 제 1항에 있어서, 상기 발현벡터는 YjdC의 유전자와 외래 단백질 유전자 사이에 단백질 제한효소 인식부위를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 6 |
6 제 5항에 있어서, 상기 단백질 제한효소 인식부위는 Xa 인자 인식부위, 엔테로키나제 인식부위(enterokinase cleavage site), 제네나제(Genenase) I 인식부위 및 퓨린(Furin) 인식부위로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 7 |
7 제 1항에 있어서, 상기 발현벡터는 골격 벡터로서 pT7, pET/Rb, pGEX, pET28a(+), pET-22b(+) 및 pGEX로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나를 이용하는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 8 |
8 제 1항에 있어서, 상기 숙주세포는 대장균(E |
| 9 |
9 제 1항에 있어서, 상기 배양은 단백질의 3차 구조 형성을 방해하는 스트레스 환경 조건에서 배양하는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 10 |
10 제 9항에 있어서, 상기 스트레스 환경 조건은 2-HEDS(2-hydroxyethyldisulfide)가 존재하는 조건인 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 11 |
11 제 1항에 있어서, 상기 단계 4)의 분리는 상기 단계 3)에서 수득된 재조합 단백질에 엔테로키나아제(enterokinase)를 처리함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성을 향상시키는 방법 |
| 12 |
12 융합발현파트너로서 서열번호 1로 기재되는 YjdC의 유전자 및 외래 단백질의 유전자를 포함하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성 향상용 유전자 컨스트럭트 |
| 13 |
13 제 12항에 있어서, 상기 유전자 컨스트럭트는 YjdC의 유전자와 외래 단백질의 유전자 사이에 단백질 제한효소 인식부위를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성 향상용 유전자 컨스트럭트 |
| 14 |
14 제 13항에 있어서, 상기 단백질 제한효소 인식부위는 Xa 인자 인식부위, 엔테로키나제 인식부위(enterokinase cleavage site), 제네나제(Genenase) I 인식부위 및 퓨린(Furin) 인식부위로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성 향상용 유전자 컨스트럭트 |
| 15 |
15 제 12항의 유전자 컨스트럭트를 포함하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성 향상용 발현벡터 |
| 16 |
16 제 12항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 2(B)로 표시되는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성 향상용 발현벡터 |
| 17 |
17 제 15항에 있어서, 상기 발현벡터는 골격 벡터로서 pT7, pET/Rb, pGEX, pET28a(+), pET-22b(+) 및 pGEX로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나를 이용하는 것을 특징으로 하는, 외래 단백질의 가용성 발현 및 구조적 안정성 향상용 발현벡터 |
| 18 |
18 제 15항의 발현벡터가 형질도입된 형질전환체 |
| 19 |
19 삭제 |
| 20 |
20 삭제 |
| 지정국 정보가 없습니다 |
|---|
| 패밀리정보가 없습니다 |
|---|
| 순번 | 연구부처 | 주관기관 | 연구사업 | 연구과제 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 보건복지부, 과학기술부, 한국과학재단 | 고려대학교 산학협력단, 고려대학교 산학협력단, 광주과학기술원 | 보건의료기술연구개발 사업, 국가지정연구실 사업, 미생물 유전체 활용기술 개발 사업 | 초고감도 감연질환 진단 나노바이오센서의 개발, 생체나노프로브를 활용한 초고감도 나노바이오센서 기술, 병원성 미생물 유전체 정보 기반 차세대 나노입자 복합백신개발 |
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| 특허 등록번호 | 10-1077613-0000 |
|---|
권리란
| 표시번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
출원 연월일 : 20081229 출원 번호 : 1020080135711 공고 연월일 : 20111027 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20111005 청구범위의 항수 : 17 유별 : C12N 15/31 발명의 명칭 : Ｐｕｔａｔｉｖ ｅ ＨＴＨ－ｔｙｐｅ 전사조절인자 ＹｊｄＣ를 융합발현파트너로 이용한 가용성 재조합 단백질의 제조방법 존속기간(예정)만료일 : |
특허권자란
| 순위번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
(권리자) 고려대학교 산학협력단 서울특별시 성북구... |
등록료란
| 제 1 - 3 년분 | 금 액 | 354,000 원 | 2011년 10월 24일 | 납입 |
| 제 4 년분 | 금 액 | 289,800 원 | 2014년 08월 25일 | 납입 |
| 제 5 년분 | 금 액 | 289,800 원 | 2015년 10월 19일 | 납입 |
| 제 6 년분 | 금 액 | 289,800 원 | 2016년 09월 28일 | 납입 |
| 제 7 년분 | 금 액 | 522,200 원 | 2017년 09월 29일 | 납입 |
| 제 8 년분 | 금 액 | 373,000 원 | 2018년 10월 08일 | 납입 |
| 제 9 년분 | 금 액 | 373,000 원 | 2019년 10월 17일 | 납입 |
| 제 10 년분 | 금 액 | 605,120 원 | 2020년 11월 23일 | 납입 |
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| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 | 2008.12.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2008-0899580-78 |
| 2 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2009.06.09 | 수리 (Accepted) | 4-1-2009-5111177-32 |
| 3 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2010.08.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2010-5149278-93 |
| 4 | 선행기술조사의뢰서 | 2011.02.09 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 5 | 선행기술조사보고서 | 2011.03.04 | 수리 (Accepted) | 9-1-2011-0018248-07 |
| 6 | 의견제출통지서 | 2011.03.09 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0133084-18 |
| 7 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2011.05.04 | 수리 (Accepted) | 1-1-2011-0333940-86 |
| 8 | [명세서등 보정]보정서 | 2011.05.04 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2011-0333941-21 |
| 9 | 등록결정서 | 2011.10.05 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2011-0572922-05 |
| 10 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.02.11 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5018243-16 |
| 11 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.04.22 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5049934-62 |
| 12 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2019.10.10 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5210941-09 |
| 기술정보가 없습니다 |
|---|
| 과제고유번호 | 1345150410 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2009-0085681 |
| 연구과제명 | 아토피 정밀 진단용 3차원 나노구조체 기반 고감도 압타머 센서 개발 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국연구재단 |
| 연구주관기관명 | 고려대학교 산학협력단 |
| 성과제출연도 | 2011 |
| 연구기간 | 200909~201208 |
| 기여율 | 0.33333334 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1345154314 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2007-0056873 |
| 연구과제명 | 생체나노프로브를 활용한 초고감도 나노바이오센서 기술 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국연구재단 |
| 연구주관기관명 | 고려대학교 산학협력단 |
| 성과제출연도 | 2011 |
| 연구기간 | 200707~201206 |
| 기여율 | 0.33333334 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1345157216 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2010-0029409 |
| 연구과제명 | 실시간 체외검지용 기능성소재 연구 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국연구재단 |
| 연구주관기관명 | 고려대학교 산학협력단 |
| 성과제출연도 | 2011 |
| 연구기간 | 201009~201708 |
| 기여율 | 0.33333334 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1345072320 |
|---|---|
| 세부과제번호 | R0A-2007-000-20084-0 |
| 연구과제명 | 생체나노프로브를활용한초고감도나노바이오센서기술 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
| 연구주관기관명 | 고려대학교 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200707~201206 |
| 기여율 | 0.33333334 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1345085951 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 11-2008-10-003-00 |
| 연구과제명 | 병원성미생물유전체정보기반차세대나노입자복합백신개발 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
| 연구주관기관명 | 고려대학교 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200805~201103 |
| 기여율 | 0.33333334 |
| 연구개발단계명 | 기초연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1355056060 |
|---|---|
| 세부과제번호 | A050750 |
| 연구과제명 | 초고감도감염질환진단나노바이오센서의개발 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 보건복지가족부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국보건산업진흥원 |
| 연구주관기관명 | 고려대학교 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200505~200903 |
| 기여율 | 0.33333334 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | NT(나노기술) |
특허성과
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