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사멸화된 세포를 이용한 암 전이 억제용 조성물(The composition for inhibiting cancer metastasis using apoptotic cells)

  • 기술번호 : KST2017013141
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요약 본 발명은 사멸화된 세포(apoptotic cell)를 이용한 암 전이 억제용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 마크로파지(macrophages)와 사멸화된 세포를 공동 배양하여 조건화된 배양액(conditioned meium)을 제조하였으며, 이를 TGF-β1으로 EMT를 유도한 마우스 폐선암세포 344SQ에 처리한 결과, 344SQ 세포의 EMT, 이동 및 침투가 억제됨을 확인하였으며, 인간 비-소세포 폐암(NSCLS) 세포주인 A549 세포에서도 EMT, 이동 및 침투 억제 효과를 확인하였고, 이러한 결과가 세포 증식 활성에는 영향을 미치지 않는 결과이며, 유방암, 결장암 및 전립선암 등 다양한 인간 암세포주에서 상기 결과와 동일하게 암 전이 및 침윤이 억제됨을 확인하였다. 또한, 다양한 마크로파지(macrophages)로 조건화된 배양액에서도 EMT의 억제 효과를 확인하였고, 상기의 메커니즘이 Smad에 독립적(independent)으로 작동함을 확인하였다. 또한, 사멸화된 암세포에 의해 자극된 마크로파지에서 PPARγ-의존적 PTEN 발현이 엑소솜(exosomes) 형태로 분비되는 것을 확인하였고, 분비된 PTEN이 344SQ 암 상피 세포에 도입되어 세포 극성 유지, 항-EMT, 암 세포 이동 및 침윤 억제 메커니즘에 관여함을 확인하였다. 더욱이 사멸화된 암세포에 의해 자극된 대식세포에서 PPPARγ 리간드인 15-HETE, lipoxin A4 및 15d-PGJ2 분비가 증가됨을 확인하였으며 이들 리간드 생성을 억제시, TGF-β1 유도 PPPARγ 발현 및 활성도 그리고 PTEN 발현 억제 및 EMT 작용에 대한 조건화된 배양액의 역전 효과가 축소됨을 확인하였다. 이들 리간드를 직접 344SQ 암세포에 처리시 TGF-β1 유도 PPPARγ 발현 및 활성화 그리고 PTEN 발현 억제가 회복되고, EMT의 억제 효과가 있음을 확인하였다. 아울러, 마우스 동물모델에서 일차 종양 조직과 종양 침윤 대식세포에서 PPARγ 및 PTEN 발현의 증가를 확인하였고, 종양의 폐전이를 억제하는 효과를 확인함으로써, 본 발명의 조건화된 배양액은 암 전이의 근간이 되는 EMT, 이동, 줄기세포 전환 및 침투 억제용 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
Int. CL A61K 35/15 (2016.12.03) A61K 35/12 (2016.12.03) A23L 33/10 (2016.12.03)
CPC
출원번호/일자 1020160162871 (2016.12.01)
출원인 이화여자대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0092095 (2017.08.10) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020160012493   |   2016.02.01
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2016.12.01)
심사청구항수 13

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이지희 대한민국 서울특별시 양천구
2 김용배 대한민국 서울특별시 강서구
3 안영호 대한민국 서울특별시 영등포구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 서울특별시 서대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2016.12.01 수리 (Accepted) 1-1-2016-1181341-88
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2016.12.05 수리 (Accepted) 1-1-2016-1192504-81
3 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.08.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0586783-34
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.09.20 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0918534-80
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.09.20 수리 (Accepted) 1-1-2017-0918460-00
6 등록결정서
Decision to grant
2017.10.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0749236-16
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번호 청구항
1 1
마크로파지(macrophages) 및 사멸화된 세포(apoptotic cell)를 공동 배양한 배양액을 함유하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
2 2
제 1항에 있어서, 상기 사멸화된 세포는 암세포를 자외선 조사하여 제조한 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
3 3
제 2항에 있어서, 상기 사멸화된 세포는 상피 암세포(epithelial cancer cells)를 100 내지 400 nm 파장으로 5 내지 30분 동안 자외선을 조사한 후 1 내지 5시간 동안 배양하여 제조한 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
4 4
제 1항에 있어서, 상기 사멸화된 세포는 344SQ 및 A549 세포인 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
5 5
제 1항에 있어서, 상기 배양은 34 내지 38℃ 온도에서, 15 내지 25시간 배양하는 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
6 6
제 1항에 있어서, 상기 배양액은 암세포의 전이를 유발하는 전단계인 EMT(epithelial-mesenchymal transition)를 억제하는 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
7 7
제 1항에 있어서, 상기 배양액은 암세포의 전이 및 침윤 초기 단계를 억제하는 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
8 8
제 1항에 있어서, 상기 암은 폐암, 유방암, 결장암 및 전립선암으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
9 9
제 8항에 있어서, 상기 폐암은 비소세포 폐암(non-small cell lung cancer)인 것을 특징으로 하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
10 10
마크로파지(macrophages) 및 사멸화된 세포(apoptotic cell)를 공동 배양하는 단계를 포함하는 마크로파지로부터 암세포의 EMT(epithelial-mesenchymal transition)를 억제시키는 물질을 분비시키는 방법
11 11
마크로파지(macrophages) 및 사멸화된 세포(apoptotic cell)를 공동 배양하는 단계를 포함하는 암 이동 및 침투 억제용 조성물의 제조방법
12 12
마크로파지(macrophages) 및 사멸화된 세포(apoptotic cell)를 공동 배양한 배양액을 암세포에 처리하여 인간을 제외한 개체에서 암세포의 EMT(epithelial-mesenchymal transition)를 억제하는 방법
13 13
마크로파지(macrophages) 및 사멸화된 세포(apoptotic cell)를 공동 배양한 배양액을 유효성분으로 함유하는 암 전이 억제용 건강기능식품
14 14
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP03412297 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 WO2017135660 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP3412297 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 EP3412297 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 이화여자대학교 산학협력단 기초연구사업-선도연구센터육성사업-기초의과학분야(MRC) 조직손상 방어 연구센터
2 미래창조과학부 이화여자대학교 산학협력단 기초연구사업(학술진흥)-중견연구자지원사업-도약연구지원사업(전략)(성과확산) 암세포의 간엽전환, 침윤 및 전이에 미치는 사멸화 암세포 인식 및 포식작용의 억제효과 및 기전 규명