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미니세포에서의 ProP-연결을 통한 표적 단백질의 집중 발현 플랫폼 및 이를 활용한 바이오제품 생산방법

  • 기술번호 : KST2023008468
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 미니세포에서의 ProP-연결을 통한 표적 단백질의 집중 발현 플랫폼과 이를 활용한 바이오제품 생산방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 모세포에서 발현된 표적 효소를 미니세포에 집중 분포시키기 위해 ProP-연결된 표적 효소를 과발현시키는 미니세포 플랫폼을 이용하여 기존보다 높은 농도의 표적 단백질을 미니세포에 포함시키도록 할 수 있고, 또한 표적 단백질 발현이 집중된 미니세포를 활용하여 박테리아 세포에서 독성 문제 때문에 생산에 한계가 있는 바이오제품의 생산량을 증가시키는 데 활용할 수 있다.
Int. CL C12N 15/70 (2006.01.01) C12N 1/20 (2006.01.01) C07K 14/245 (2006.01.01) C12N 15/52 (2006.01.01) C12R 1/19 (2006.01.01)
CPC C12N 15/70(2013.01) C12N 1/20(2013.01) C07K 14/245(2013.01) C12N 15/52(2013.01) C12N 2510/00(2013.01) C12R 2001/19(2013.01)
출원번호/일자 1020220036868 (2022.03.24)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2023-0138798 (2023.10.05) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2022.03.24)
심사청구항수 32

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 오민규 경기도 성남시 분당구
2 김승진 서울특별시 동대문구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 정은열 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **, ***호(정앤김특허법률사무소)
2 김태훈 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **, ***호(정앤김특허법률사무소)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2022.03.24 수리 (Accepted) 1-1-2022-0320707-30
2 [출원서 등 보정]보정서(납부자번호)
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment(Payer number)
2022.04.06 수리 (Accepted) 1-1-2022-0367056-50
3 보정요구서
Request for Amendment
2022.04.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2022-0052620-96
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2022.12.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2023.03.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2023-0046398-13
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번호 청구항
1 1
에스케리치아 속 유래 막 단백질인 ProP(Proline/betaine transporter) 단백질에 링커로 표적 단백질이 연결된, 에스케리치아 속 유래 미니세포
2 2
제1항에 있어서, 상기 표적단백질은 ProP 단백질의 C-말단에 링커로 연결된 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
3 3
제1항에 있어서, 상기 ProP (Proline/betaine transporter) 단백질은 에스케리치아 속 유래 세포의 극성 지역에 위치하는 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
4 4
제1항에 있어서, 상기 미니세포는 ProP 단백질의 발현 전 미니세포 대비 표적 단백질의 발현이 증가된 것이 특징인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
5 5
제1항에 있어서, 상기 에스케리치아 속 균주는 대장균인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
6 6
제1항에 있어서, 상기 링커는 (EAAAK)3, (EAAAK)2(GGGGS)1, (EAAAK)1(GGGGS)2 및 (GGGGS)3로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
7 7
제1항에 있어서, 상기 링커는 (GGGGS)3인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
8 8
제1항에 있어서, 상기 미니세포는 형광 단백질을 추가로 포함하는 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
9 9
제8항에 있어서, 상기 형광 단백질은 GFP인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
10 10
제1항에 있어서, 상기 표적 단백질은 젖산 생산 효소, 독성 화학물질 관련 효소 또는 자가유도체 생산 효소인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
11 11
제10항에 있어서, 상기 독성 화학물질 관련 효소는 헥산올, 옥탄올, 페닐 아세테이트 또는 부틸부티레이트 생산 효소인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
12 12
제1항에 있어서, 상기 표적 단백질은 Ldh (Lactate dehydrogenase), Pdc (Pyruvate decarboxylase), AdhA (Alcohol dehydrogenase A), AdhE2 (Aldehyde-alcohol dehydrogenase), Ahr (alcohol/geraniol dehydrogenase), EHT1 (Alcohol acyl transferase), PanK (Pantothenate Kinase 1), Acs (Acetyl-coenzyme A synthetase), AtoD (Acetate CoA-transferase subunit alpha), AtoA (Acetate CoA-transferase subunit beta), LasI (Acyl-homoserine-lactone synthase), Mtn (5'-methylthioadenosine/S-adenosylhomocysteine nucleosidase) 및 LuxS (S-ribosylhomocysteine lyase)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것인, 에스케리치아 속 유래 미니세포
13 13
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 미니세포를 포함하는 바이오제품 생산용 생물 반응기
14 14
MinC (Septum site-determining protein) 와 MinD (Septum site-determining protein) 단백질을 불활성화하고, FtsA (Cell division protein FtsA)와 FtsZ (Cell division protein) 단백질과 PlsB (Glycerol-3-phosphate acyltransferase) 와 PlsC (1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase) 단백질의 활성을 강화한, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
15 15
제14항에 있어서, 상기 균주는 기탁번호 KCTC14862BP로 수탁된 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
16 16
제14항에 있어서, 상기 에스케리치아 속 균주는 대장균인 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
17 17
제14항에 있어서, 상기 균주는 ProP (Proline/betaine transporter) 단백질의 활성을 추가로 불활성화시킨 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
18 18
제14항에 있어서, 상기 minC 단백질은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어지고, minD 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
19 19
제14항에 있어서, 상기 ftsA 단백질은 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어지고, ftsZ 단백질은 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
20 20
제14항에 있어서, 상기 plsB 단백질은 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어지고, plsC 단백질은 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
21 21
제17항에 있어서, 상기 proP (Proline/betaine transporter) 단백질은 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
22 22
제14항에 있어서, 상기 MinC 단백질은 서열번호 8의 염기서열로 코딩되고 MinD 단백질은 서열번호 9의 염기서열로 코딩된 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
23 23
제14항에 있어서, 상기 FtsA 단백질은 서열번호 10의 염기서열로 코딩되고 FtsZ 단백질은 서열번호 11의 염기서열로 코딩된 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
24 24
제14항에 있어서, 상기 PlsB 단백질은 서열번호 12의 염기서열로 코딩되고 PlsC 단백질은 서열번호 13의 염기서열로 코딩된 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
25 25
제17항에 있어서, ProP (Proline/betaine transporter) 단백질은 서열번호 14의 염기서열로 코딩된 것인, 미니세포 생산용 에스케리치아 속 균주
26 26
제14항 내지 제25항 중 어느 한 항의 균주를 배양하는 단계를 포함하는 바이오제품 생산방법
27 27
에스케리치아 속 균주 유래 세포의 막 단백질 ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커를 결합하는 단계;상기 링커에 표적 단백질을 결합하는 단계; 및에스케리치아 속 균주를 배양하는 단계를 포함하는, ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커로 표적 단백질이 연결된 미니세포 생산 방법
28 28
제27항에 있어서, 상기 에스케리치아 속 균주는,minC 및 minD 유전자를 제거하는 단계;ftsA, ftsZ 유전자, plsB 및 plsC 유전자를 과발현시키는 단계로 제조되는 것인, ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커로 표적 단백질이 연결된 미니세포 생산 방법
29 29
제28항에 있어서, proP 유전자가 추가로 제거된 것인, ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커로 표적 단백질이 연결된 미니세포 생산 방법
30 30
제27항에 있어서, 상기 방법은 미니세포를 회수하는 단계를 추가로 포함하는 것인, ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커로 표적 단백질이 연결된 미니세포 생산 방법
31 31
제27항 내지 제30항 중 어느 한 항의 방법으로 생산된 ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커로 표적 단백질이 연결된 미니세포
32 32
에스케리치아 속 균주 유래 세포의 막 단백질 ProP (Proline/betaine transporter) 단백질에 링커를 결합하는 단계;상기 링커에 표적 단백질을 결합하는 단계; 및에스케리치아 속 균주를 배양하는 단계를 포함하는, 미니세포 내 표적 단백질의 집중 발현 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 고려대학교 바이오.의료기술개발(R&D) 방선균 시스템 재설계 기반 고부가 의약물질 고생산 산업균주 개발