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단백질 시료를 pI별로 1차 분리하기 위해 등전집중용 모세관; 상기 등전집중용 모세관의 종단 일측에 연결설치된 제 1 연결부재; 상기 제 1 연결부재의 일측에 연결설치되어 단백질 시료 및 양쪽성 전해질 혼합물을 주입하는 제 1 주입펌프; 상기 제 1 연결부재의 일측에 연결설치된 제 2 연결부재; 상기 제 2 연결부재의 일측에 연결설치되어 양전해질 용액을 주입하는 제 2 주입펌프; 상기 제 2 연결부재의 일측에 연결설치된 양극; 상기 제 1 연결부재가 연결설치된 모세관 일측 종단에 대향되는 타측 종단에 연결설치된 제 3 연결부재; 상기 제 3 연결부재의 일측에 연결설치된 제 4 연결부재; 상기 제 4 연결부재의 일측에 연결설치된 음극 전해질 저장부재 및 상기 음극 전해질 저장부재가 연결설치된 제 4 연결부재의 일측에 대향되는 타측에 연결설치된 음극을 포함하도록 구성된 모세관등전집중부와 상기 모세관등전집중부의 일측에 연결설치되어 1차 분리된 단백질을 2차로 분리하는 중공사흐름장흐름분획부를 포함하는 단백질 분리장치
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제 1항에 있어서, 상기 등전집중용 모세관이 테프론 모세관인 것을 특징으로 하는 단백질 분리장치
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제 1항에 있어서, 상기 제 3 연결부재 및 제 4 연결부재가 분자량투과한계 약 10kDa의 반투막이 구비된 모세관에 의하여 연결설치되는 것을 특징으로 하는 단백질 분리장치
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제 1항에 있어서, 상기 중공사흐름장흐름분획부가 모세관등전집중부의 제 3 연결부재의 일측에 연결설치되어 모세관등전집중부에서 분리된 단백질 시료가 유입되는 제 1 밸브; 상기 제 1 밸브의 일측에 연결설치된 중공사막; 상기 제 1 밸브가 연결설치된 중공사막의 일측에 대향되는 타측에 연결설치된 검출기; 상기 제 1 밸브 및 상기 제 1 밸브에 연결설치된 중공사막의 일측 종단에 대향되는 타측 종단에 연결설치되고 그 내부에 완충용액이 저장되어 제 1 밸브 및 중공사막이 일측으로 완충용액을 제공하는 완충용액 저장부재; 상기 완충용액 저장부재에 연결설치되어 저장된 완충용액을 외부로 공급하는 공급펌프를 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 분리장치
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제 5항에 있어서, 상기 중공사흐름장흐름분획부가 완충용액 저장부재로부터 배출되는 완충용액의 이동경로를 두 개의 흐름경로로 분리한 뒤 각각의 흐름경로에 제 2 밸브 및 제 3 밸브를 각각 연결시키고, 상기 제 2 밸브의 일측으로 제 1 압력밸브 및 제 1 밸브를 순차적으로 연결시키고, 상기 제 3 밸브의 일측은 제 1 밸브가 연결설치된 중공사막의 일측에 대향되는 타측 종단에 연결설치된 것을 특징으로 하는 단백질 분리장치
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 제 1 밸브와 중공사막 사이에 구비되어 제 1 밸브로부터 유입되는 단백질 및 시료를 중공사막으로 이동시키는 경로를 제공하는 동시에 그 일측이 방사흐름과 연결설치된 제 5 연결부재를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 분리장치
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8
제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 중공사막이 폴리스티렌설포네이트, 폴리비닐클로라이드, 폴리아크릴로나이트릴 또는 이들의 혼합물로 이루어진 것을 특징으로 하는 단백질 처리장치
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 제 1 밸브에 시료루프가 더 구비된 것을 특징으로 하는 단백질 처리장치
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제 5항 또는 제 6항에 있어서, 상기 제 1 밸브가 6-포트 밸브인 것을 특징으로 하는 단백질 처리장치
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ⅰ) 분리분석하고자 하는 단백질 시료와 양쪽성 전해질 용액 혼합물을 제 1 주입펌프에 채운 후 등전집중용 모세관에 상기 혼합물을 공급하는 단계; ⅱ) 상기 등전집중용 모세관에 10 내지 50분간 200 내지 700V/cm의 전기장을 걸어 등전집중시킨 뒤 모든 분리가 종료될 때까지 200 내지 700V/cm의 전기장을 유지하는 단계; ⅲ) 제 2 주입펌프에 양전해질 용액을 채운 후 이를 등전집중용 모세관으로 주입하여 등전집중된 단백질 분취액을 제 1 밸브로 이동시켜 시료루프에 채우는 단계; ⅳ) 완충용액 저장부재의 일측에 연결설치된 공급펌프를 작동시켜 완충용액 저장부재에 저장된 완충용액을 제 1 밸브로 공급하여 상기 시료루프에 채워진 단백질 분취액을 중공사막으로 공급하는 동시에 상기 제 1 밸브와 연결설치된 중공사막의 종단 일측에 대향되는 타측 종단으로 완충용액을 공급하여 평형을 유지하는 단계; 및 ⅴ) 상기 단계 ⅳ)의 평형이 종료된 후 제 3 밸브를 폐쇄한 뒤 완충용액 저장부재의 완충용액을 제 1 밸브를 통해 중공사막으로 유입되도록 하여 흐름장흐름분획법으로 분자량이 작은 단백질로부터 분자량이 큰 단백질 순서로 단백질을 분리하여 검출기로 유입시키는 단계를 포함하는 단백질 분리방법
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제 11항에 있어서, 상기 단계 v)의 후단으로 전자분무이온화 질량분석기를 직접 연결하여 분석하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 분리방법
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제 11항에 있어서, 상기 단계 v)의 후단으로 분리된 단백질 시료를 회수하여 프로테옴을 분석하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 단백질 분리방법
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제 11항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단계 ⅲ)의 시료루프에 채워지는 등전집중된 단백질의 부피가 1 내지 10㎕로 조절하되 원하는 pI 영역의 크기만큼 부피를 조절하는 것을 특징으로 하는 단백질 분리방법
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15
제 11항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단계 ⅳ)에서 상기 제 1 밸브 및 상기 제 1 밸브와 연결설치된 중공사막의 종단 일측에 대향되는 타측 종단으로 흐르는 완충용액의 유속 비율이 1:9 내지 5:5로 조절되고, 중공사막의 양쪽 종단으로 유입되는 완충용액은 중공사막의 입구로부터 전체 길이의 약 10 내지 50%가 되는 위치에서 집중되게 되며, 상기 단백질 분취액 시료가 중공사막의 입구로부터 전체 길이의 약 10 내지 50%가 되는 위치에서 평형을 이루게 되는 것을 특징으로 하는 단백질 분리방법
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