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다음의 단계를 포함하는 DICAM (dual immunoglobulin domain containing cell adhesion molecule)과 αvβ3 인테그린(integrin)과의 상호작용(interaction) 억제 물질의 스크리닝 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d) 이후에 상기 단계 (b)에서 후보물질을 첨가하지 않는 경우에 비해 후보물질을 첨가한 경우에 부착된 세포의 수가 감소하는 후보물질을 선별하는 단계 (e)를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)의 DICAM 단백질은 서열목록 제1서열의 아미노산 서열로 이루어지고, DICAM 단백질의 Ig 도메인 I은 서열목록 제1서열의 38번째 아미노산 - 156번째 아미노산으로 이루어지고, DICAM 단백질의 Ig 도메인 II은 서열목록 제1서열의 170번째 아미노산 - 291번째 아미노산으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (c)에서 플레이트에 접종하는 αvβ3 인테그린 발현 세포는 MDCK (Madin-Darby canine kidney) 세포인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (c)에서 플레이트에 접종하는 세포는 트립신(trypsin) 처리된 세포인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (d)의 부착된 세포수의 측정은 헥소사미니다아제 분석법(hexosaminidase assay)에 의해 행하는 것을 특징으로 하는 방법
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다음의 단계를 포함하는 DICAM과 αvβ3 인테그린과의 상호작용을 억제하는 물질의 스크리닝 방법:
(a) DICAM이 발현된 세포를 플레이트에 접종하여 플레이트상에 이 세포가 단일층을 형성하도록 배양하는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 세포가 배양된 플레이트상에 후보물질을 첨가하여 인큐베이션 하는 단계;
(c) 상기 단계 (b)의 플레이트상에 αvβ3 인테그린 발현 세포를 접종하여 배양하는 단계; 및
(d) 상기 단계 (c)의 플레이트를 세정한 후 플레이트상에 부착된 αvβ3 인테그린 발현 세포의 수를 측정하는 단계
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제 7 항에 있어서, 상기 단계 (d) 이후에, 상기 단계 (b)에서 후보물질을 첨가하지 않는 경우에 비해 후보물질을 첨가한 경우에 부착된 αvβ3 인테그린 발현 세포의 수가 감소하는 후보물질을 선별하는 단계 (e)를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 단계 (a)의 DICAM이 발현된 세포는 프로모터에 작동적으로 연결된 DICAM 단백질 코딩 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터로 형질전환된 세포인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 9 항에 있어서, 상기 DICAM 단백질은 서열목록 제 1 서열의 아미노산 서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 αvβ3 인테그린 발현 세포는 프로모터에 작동적으로 연결된 αv 및 β3 인테그린 서브유닛 코딩 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 발현 벡터로 형질전환된 세포인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 αvβ3 인테그린 발현 세포는 프로모터에 작동적으로 연결된 β3 인테그린 서브유닛 코딩 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 발현 벡터로 αv 인테그린 서브 유닛을 내재적으로(endogenously) 발현하는 세포를 형질전환시킨 세포인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 11 항 또는 제 12 항에 있어서, 상기 αv 인테그린은 서열목록 제 3 서열의 아미노산 서열로 이루어지고, 상기 β3 인테그린은 서열목록 제 5 서열의 아미노산 서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 αvβ3 인테그린 발현 세포는 트립신(trypsin) 처리되고 형광물질(fluorescent material)로 표지(label)된 세포인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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