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트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩 및트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법

  • 기술번호 : KST2015178186
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 치매 등의 퇴행성 뇌질환, 퇴행성관절염, 자가면역 질환 등 다양한 질환에 핵심적인 역할을 수행하는 것으로 알려진 트랜스글루타미나아제의 활성도를 분석하는 기술에 관한 것으로서, 본 발명에서는 방사선 동위원소를 이용하거나 웨스턴 블럿(Western blot)을 통해 트랜스글루타미나아제의 활성도를 측정하는 기존의 방법과는 달리 어레이 형태의 분석칩을 이용하여 간단하게 트랜스 글루타미나아제의 활성도 측정이 가능하여 분석시간을 현저하게 단축할 수 있고, 적은 시료로도 고감도로 측정할 수 있어 세포내에서 일어나는 기전을 규명할 수 있는 분석 방법에도 활용이 가능하며, 세포내 활성도 측정을 통한 세포의 조절 및 기능 연구에 이용할 수 있을 뿐만 아니라, 혈액 등과 같은 체액을 이용한 각종 질환 검사에도 활용이 가능한 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩 및 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법을 제공한다.
Int. CL C12Q 1/48 (2006.01) C12Q 1/52 (2006.01)
CPC C12Q 1/52(2013.01) C12Q 1/52(2013.01) C12Q 1/52(2013.01) C12Q 1/52(2013.01) C12Q 1/52(2013.01)
출원번호/일자 1020070037582 (2007.04.17)
출원인 강원대학교산학협력단
등록번호/일자 10-0862318-0000 (2008.10.01)
공개번호/일자 10-2008-0085618 (2008.09.24) 문서열기
공고번호/일자 (20081013) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020070026739   |   2007.03.19
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2007.04.17)
심사청구항수 22

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 강원대학교산학협력단 대한민국 강원도 춘천시

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 하권수 대한민국 강원 춘천시
2 정재완 대한민국 강원 원주시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 웰 대한민국 서울특별시 서초구 방배로**길*, *~*층(방배동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 아이기스화진화장품 강원도 홍천군
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2007.04.17 수리 (Accepted) 1-1-2007-0292373-74
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2007.12.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2008.01.14 수리 (Accepted) 9-1-2008-0001404-43
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2008.03.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0163411-11
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2008.05.26 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2008-0373989-45
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2008.05.26 수리 (Accepted) 1-1-2008-0373980-35
7 등록결정서
Decision to grant		 2008.09.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0494281-35
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2011.04.15 수리 (Accepted) 4-1-2011-5075634-10
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2011.12.13 수리 (Accepted) 4-1-2011-5249875-98
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2012.03.08 수리 (Accepted) 4-1-2012-5049179-27
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.05 수리 (Accepted) 4-1-2019-5230938-29
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
말단에 작용기를 갖는 알콕시실란을 기판의 표면에 도입하는 단계와; 상기 기판의 표면에 소정의 간격으로 천공된 테이프를 부착하여 다수의 스폿(spot)이 형성된 어레이(array) 칩을 제조하는 단계; 상기 스폿의 단부에 트랜스 글루타미나아제의 기질 단백질을 도입하는 단계와; 활성도 측정용 트랜스글루타미나아제(transglutaminase) 함유 시료와 5-(바이오틴아미도)펜틸아민(5-(biotinamido)pentylamine) DTT 및 CaCl2를 함유하는 측정액을 상기 기질 단백질 상에 적하하여 기질 단백질과 5-(바이오틴아미도)펜틸아민의 아민교환반응(transamidation)시키는 단계와; 상기 아민교환반응에 의해 단부에 위치한 바이오틴에 분석용 표지물질을 도입한 다음 이의 분석을 통해 트랜스글루타미나아제의 활성도를 측정하는 단계;를 포함함을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
2 2
청구항 1에 있어서, 상기 기판 표면에 도입되는 말단에 작용기를 갖는 알콕시실란은 아미노알킬트리알콕시실란(aminoalkyltrialkoxysilane), 머캅토알킬트리알콕시실란(Mercaptoalkyltrialkoxysilane) 또는 에폭시알킬트리알콕시실란(epoxyalkyltrialkoxysilane)에서 선택된 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
3 3
청구항 2에 있어서, 상기 아미노알킬트리알콕시실란은 3-아미노프로필트리메톡시실란(3-amonopropyltrimethoxysilane), 3-아미노프로필트리에톡시실란 (3-amonopropyltriethoxysilane) 또는 3-2-2-아미노에틸아미노에틸아미노프로필트리메톡시실란 (3-[2-(2-aminoethylamino)ethylamino]propyl-trimethoxysilane)에서 선택된 것을 사용하고, 머캅토알킬트리알콕시실란은 3-머캅토프로필트리메톡시실란(3-Mercaptopropyltrimethoxysilane)을 사용하며, 에폭시알킬트리알콕시실란은 3-글리시독시프로필트리메톡시실란(3-Glycidoxypropyltrimethoxysilane)을 사용하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
4 4
청구항 1에 있어서, 상기 기질단백질 도입단계가: 테이프를 부착하여 형성된 스폿의 알콕시실란과 카르복실기로 개질된 라텍스 비드(carboxylate modified latex bead)을 반응시키고, 상기 카르복실기로 개질된 라텍스 비드상에 기질 단백질(substrate)을 도입하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
5 5
삭제
6 6
청구항 4에 있어서, 상기 알콕시실란과 카르복실기로 개질된 라텍스 비드의 반응은 카르복실기로 개질된 라텍스비드를 N-하이드록시쑥신이미드와 카르보디이미드 존재하에서 반응시켜 활성화시킨 다음 이 반응 용액을 알콕시실란에 적하하여 이루어지는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
7 7
청구항 6에 있어서, 상기 라텍스 비드상에 기질 단백질을 도입하는 것이: 라텍스비드 상에 N-하이드록시쑥신이미드와 카르보디이미드 혼합용액을 적하하여 라텍스 비드의 카르복실기를 활성화시킨 다음 여기에 기질 단백질 함유용액을 적하하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
8 8
청구항 1에 있어서, 상기 기질단백질 도입단계가: 테이프를 부착하여 형성된 스폿의 알콕시실란과 양말단에 작용기를 가지면서 적어도 하나의 말단에는 기질단백질과 반응하는 알데히드기를 갖는 화합물을 반응시키고, 상기 화합물에 기질 단백질(substrate)을 도입하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
9 9
청구항 8에 있어서, 상기 화합물이 glutaraldehyde, benzene-1,4-dicarboxaldehyde에서 선택된 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
10 10
청구항 1 내지 4, 6 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기질단백질 도입단계가: 기질 단백질을 도입한 후 기질 단백질이 결합되지 않은 스폿의 빈 부분을 블로킹(blocking) 용액으로 처리하여 블로킹시키는 것을 포함함을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
11 11
청구항 1에 있어서, 바이오틴에 분석용 표지물질을 도입하는 단계가; 형광물질 또는 효소가 결합된 스트렙타비딘 또는 아비딘을 이용하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
12 12
청구항 11에 있어서, 상기 분석용 표지물질은 Cy3, Cy5, Alexa, BODIPY, Rhodamine 또는 Q-dot에서 선택된 형광표지물질이 결합된 스트렙타비딘(streptavidin) 또는 아비딘(avidin)을 사용하고, 형광분석을 통해 트랜스글루타미나아제의 활성도를 측정하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
13 13
청구항 11에 있어서,상기 분석용 표지물질은 알칼라인 포스파타아제(Alkaline phosphatase), 호스라디쉬 퍼옥시다아제(Horseradish peroxidase) 또는 루시퍼라제(luciperase)에서 선택된 효소(enzyme)가 표지된 스트렙타비딘(streptavidin) 또는 아비딘(avidin)을 사용하고, 이를 크로모제닉 기질(Chromogenic substrate)과 반응시켜 트랜스글루타미나아제의 활성도를 측정하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정방법
14 14
말단에 작용기를 갖는 알콕시실란을 기판의 표면에 도입하는 단계와; 상기 기판의 표면에 소정의 간격으로 천공된 테이프를 부착하여 다수의 스폿(spot)이 형성된 어레이(array) 칩을 제조하는 단계; 상기 스폿의 단부에 트랜스 글루타미나아제의 기질 단백질을 도입하는 단계;를 포함하는 하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제 활성도 측정용 칩의 제조방법
15 15
청구항 14에 있어서, 상기 기판 표면에 도입되는 말단에 작용기를 갖는 알콕시실란은 아미노알킬트리알콕시실란(aminoalkyltrialkoxysilane), 머캅토알킬트리알콕시실란(Mercaptoalkyltrialkoxysilane) 또는 에폭시알킬트리알콕시실란(epoxyalkyltrialkoxysilane)에서 선택된 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
16 16
청구항 15에 있어서, 상기 아미노알킬트리알콕시실란은 3-아미노프로필트리메톡시실란(3-amonopropyltrimethoxysilane) 또는 3-2-2-아미노에틸아미노에틸아미노프로필트리메톡시실란 (3-[2-(2-aminoethylamino)ethylamino]propyl-trimethoxysilane)에서 선택된 것을 사용하고, 머캅토알킬트리알콕시실란은 3-머캅토프로필트리메톡시실란(3-Mercaptopropyltrimethoxysilane)을 사용하며, 에폭시알킬트리알콕시실란은 3-글리시독시프로필트리메톡시실란(3-Glycidoxypropyltrimethoxysilane)을 사용하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
17 17
청구항 14에 있어서, 상기 기질단백질 도입단계가: 테이프를 부착하여 형성된 스폿의 알콕시실란과 카르복실기로 개질된 라텍스 비드(carboxylate modified latex bead)을 반응시키고, 상기 카르복실기로 개질된 라텍스 비드상에 기질 단백질(substrate)을 도입하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
18 18
삭제
19 19
청구항 17에 있어서, 상기 알콕시실란과 카르복실기로 개질된 라텍스 비드의 반응은 카르복실기로 개질된 라텍스비드를 N-하이드록시쑥신이미드와 카르보디이미드 존재하에서 반응시켜 활성화 시킨 다음 이 반응 용액을 알콕시실란에 적하하여 이루어지는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
20 20
청구항 19에 있어서, 상기 라텍스 비드상에 기질 단백질을 도입하는 것이: 라텍스비드 상에 N-하이드록시쑥신이미드와 카르보디이미드 혼합용액을 적하하여 라텍스 비드의 카르복실기를 활성화시킨 다음 여기에 기질 단백질 함유용액을 적하하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
21 21
청구항 14에 있어서, 상기 기질단백질 도입단계가: 테이프를 부착하여 형성된 스폿의 알콕시실란과 양말단에 작용기를 가지면서 적어도 하나의 말단에는 기질단백질과 반응하는 알데히드기를 갖는 화합물을 반응시키고, 상기 화합물상에 기질 단백질(substrate)을 도입하는 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
22 22
청구항 21에 있어서, 상기 화합물이 glutaraldehyde 또는 benzene-1,4-dicarboxaldehyde에서 선택된 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
23 23
청구항 14 내지 17, 19 내지 22 중 어느 한 항에 있어서, 상기 기질단백질 도입단계가: 기질 단백질을 도입한 후 기질 단백질이 결합되지 않은 스폿의 빈부분을 블로킹(blocking) 용액으로 처리하여 블로킹시키는 것을 포함함을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제의 활성도 측정용 칩의 제조방법
24 24
말단에 작용기를 갖는 알콕시실란이 도입된 기판의 표면에 소정의 간격으로 천공된 테이프를 부착하여 다수의 스폿(spot)을 형성하고, 상기 스폿의 단부에 트랜스 글루타미나아제의 기질 단백질을 도입하여서 된 것임을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제 활성도 측정용 칩
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