1 |
1
Single guide RNA(sgRNA) 영역과 small interfering RNA(siRNA) 영역을 갖는 복수 개의 제1 반복단위를 포함하는 폴리리보뉴클레오티드; 및상기 sgRNA 영역에 결합된 복수 개의 뉴클레아제 단백질(nuclease)을 포함하는 폴리리보뉴클레오티드-단백질 복합체로서,상기 폴리리보뉴클레오티드-단백질 복합체는 자기조립되어 나노입자를 형성하는 것인 복합체
|
2 |
2
청구항 1에 있어서, 상기 뉴클레아제 단백질은 Cas9 단백질 또는 Cpf1 단백질인 복합체
|
3 |
3
삭제
|
4 |
4
삭제
|
5 |
5
청구항 1에 있어서, 상기 나노입자는 일정한 크기를 갖는 것인 복합체
|
6 |
6
청구항 1에 있어서, 상기 나노입자는 10 내지 1000nm의 직경을 갖는 것인 복합체
|
7 |
7
청구항 1에 있어서, 상기 sgRNA는 표적 유전자와 혼성화할 수 있는 것으로서, crRNA 영역, 연결 고리(linker loop) 및 tracrRNA 영역을 포함하는 것인 복합체
|
8 |
8
청구항 7에 있어서, 상기 표적 유전자의 뉴클레오티드 서열은 sgRNA와 상보적인 뉴클레오티드 서열 및 프로토간극자 적합 모티프(protospace adjacent motif; PAM)의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 복합체
|
9 |
9
청구항 7에 있어서, 상기 sgRNA는 상기 표적 유전자와 상보적인 20개의 뉴클레오티드를 포함하는 것인 복합체
|
10 |
10
청구항 1에 있어서, 상기 폴리리보뉴클레오티드는 상기 제1 반복단위가 일정한 패턴으로 반복되는 것인 복합체
|
11 |
11
청구항 2에 있어서, 상기 Cas9 단백질은 스트렙토코커스 속(Streptococcus genus)으로부터 유래된 것이고, Cpf1 단백질은 악시다미노코커스 속(Acidaminococcus)으로부터 유래된 것인 복합체
|
12 |
12
청구항 11에 있어서, 상기 스트렙토코커스 속은 스트렙토코커스 피오젠스 (Streptococcus pyogenes)이고, 상기 악시다미노코커스 속은 악시다미노코커스 sp
|
13 |
13
청구항 1의 폴리리보뉴클레오티드-단백질 복합체를 포함하는 조성물로서, 상기 조성물은 진핵 세포에서 표적 유전자의 발현을 억제하기 위한 것인 조성물
|
14 |
14
청구항 13에 있어서, 상기 조성물은 개체에 투여되어 유전자 치료를 하기 위한 것인 조성물
|
15 |
15
sgRNA 영역과 siRNA 영역을 갖는 복수 개의 제1 반복단위를 포함하는 폴리리보뉴클레오티드에 복수의 뉴클레아제 단백질을 접촉시키는 단계를 포함하는 폴리리보뉴클레오티드-단백질 복합체를 제조하는 방법으로서,상기 폴리리보뉴클레오티드-단백질 복합체는 자기조립되어 나노입자를 형성하는 것인 방법
|
16 |
16
청구항 15에 있어서, 상기 접촉시키는 단계는 주형 핵산, 상기 주형에 적어도 부분적으로 상보적인 서열을 갖는 프라이머, NTP, RNA 폴리머라제 및 뉴클레아제 단백질을 포함하는 반응 혼합물을 인큐베이션 시켜 상기 프라이머를 연장시키는 단계; 및 상기 폴리리보뉴클레오티드를 증폭시키는 단계를 포함하는 것인 방법
|
17 |
17
청구항 16에 있어서, 상기 주형 핵산은 상기 sgRNA 영역에 상보적인 뉴클레오티드 서열 및 상기 siRNA 영역에 상보적인 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 방법
|
18 |
18
청구항 16에 있어서, 상기 주형은 원형인 방법
|
19 |
19
청구항 16에 있어서, 상기 인큐베이션은 중합효소 반응인 방법
|
20 |
20
청구항 19에 있어서, 상기 중합효소 반응은 회전환 전사(rolling circle transcription) 또는 인 비트로 전사(in vitro transcription)인 방법
|
21 |
21
개체로부터 분리된 세포에 청구항 1의 폴리리보뉴클레오티드-단백질 복합체를 접촉시키는 단계를 포함하는 세포 내 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법
|
22 |
22
청구항 13의 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 개체의 질환을 치료하는 방법으로서,상기 개체는 인간을 제외한 것인 방법
|