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환원제를 이용하여 항체의 Fc 도메인 내의 디설파이드(disulfide)기를 티올(thiol)기로 환원시키는 단계; 및상기 티올기에 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 A를 연결시키는 단계를 포함하되,상기 항체와 환원제를 1:500 내지 1:1000의 몰비로 사용하는 항체 작용화(antibody-functionalization) 방법:[화학식1]R-L-A상기 식에서, R은 C6~C30의 알켄기 또는 알킨기, 또는 아자이드기를 나타내고,L은 단일결합, C1~C18의 알킬기, 알켄기 또는 알킨기, -S-S- 및 (polyethylene glycol)n(n=1~6의 정수)로부터 선택되는 연결기를 나타내며,A는 말레이미드, SCN기, OCN기, 에폭사이드 및 C5~C12의 알킬할라이드로부터 선택되는 작용기를 나타낸다
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제 1 항에 있어서, 상기 환원제가 2-머캅토에탄올 또는 다이클로로-다이페닐-트리클로로에탄(dichloro-diphenyl-trichloroethane; DDT)인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1의 R이 C6~C30의 알킨기인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 4 항에 있어서,상기 알킨기가 사이클로옥틴(cyclooctyne)기인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 사이클로옥틴기가 , , , , , , , 또는인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 1 항에 있어서,상기 화학식 1의 L이 (polyethylene glycol)4인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 1 항에 있어서,상기 화학식 1의 A가 말레이미드기인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물이 아자-디벤조사이클로옥틴-말레이미드(aza-dibenzocyclooctyne-maleimide; ADIBO-Mal), ADIBO-(폴리에틸렌글리콜)4-Mal(ADIBO-PEG4-Mal), ADIBO-S-S-Mal, N3-Mal, N3-PEG4-Mal 및 N3-S-S-Mal로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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제 1 항에 있어서,상기 항체가 IgG인 것을 특징으로 하는, 항체 작용화 방법
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나노입자의 표면에 아자이드(N3) 작용기를 도입하는 단계; 및상기 아자이드(N3) 작용기가 도입된 나노입자를 제 1 항의 방법에 의해 작용화된 항체와 구리 촉매 없이 클릭 화학(Cu-free click chemistry) 반응시키는 단계를 포함하는 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 11 항에 있어서,상기 나노입자가 실리카 나노입자 또는 실리카-캡슐화된(silica-encapsulated) 나노입자인 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 12 항에 있어서,상기 아자이드 작용기를 도입하는 단계는 아자이드 작용기를 갖는 화합물을 나노입자 표면의 하이드록시기와 반응시켜 이루어지는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 13 항에 있어서, 상기 아자이드 작용기를 갖는 화합물이 에톡시실록산 말단을 갖는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 14 항에 있어서, 상기 아자이드 작용기를 갖는 화합물이 N-[3-(트리에톡시실릴)프로필]-2-아지도아세트아미드(N-[3-(triethoxysilyl)propyl]-2-azidoacetamide; NTPA)인 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 11 항에 있어서, 상기 아자이드 작용기가 상기 화학식 1의 R과 구리 촉매 없이 클릭 화학(Cu-free click chemistry) 반응하는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 11 항에 있어서,상기 나노입자가 실리카 나노입자, 양자점, 산화철(iron oxide), 업컨버전 나노입자(upconversion nanoparticle; UCNP), 표면 증감 라만 산란 나노프로브(surface enhanced Raman scattering nanoprobe; SERS Dot), 및 형광 SERS dot으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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나노입자의 표면에 사이클로옥틴 작용기를 도입하는 단계; 및상기 사이클로옥틴 작용기가 도입된 나노입자를 제 1 항의 방법에 의해 작용화된 항체와 구리 촉매 없이 클릭 화학(Cu-free click chemistry) 반응시키는 단계를 포함하는 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 18 항에 있어서,상기 나노입자가 표면에 올레산(oleic acid) 작용기를 갖는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 18 항에 있어서,상기 사이클로옥틴 작용기를 도입하는 단계는 사이클로옥틴 작용기를 갖는 화합물을 나노입자 표면의 올레산 작용기와 반응시켜 이루어지는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 20 항에 있어서, 상기 사이클로옥틴 작용기를 갖는 화합물이 소수성 말단을 갖는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 21 항에 있어서, 상기 사이클로옥틴 작용기를 갖는 화합물이 ADIBO-PEG4-C18 또는 ADIBO-PEG2000-DSPE인 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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제 18 항에 있어서, 상기 사이클로옥틴 작용기가 상기 화학식 1의 R과 구리 촉매 없이 클릭 화학(Cu-free click chemistry) 반응하는 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼의 제조방법
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항체의 Fc 도메인 내의 디설파이드기가 환원되어 생성된 티올기에 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 A가 연결된 구조를 갖되, 상기 환원이 환원제를 1:500 내지 1:1000의 항체:환원제 몰비로 사용하여 수행된 것을 특징으로 하는, 작용화된 항체(functionalized antibody):[화학식1]R-L-A상기 식에서, R은 C6~C30의 알켄기 또는 알킨기, 또는 아자이드기를 나타내고,L은 단일결합, C1~C18의 알킬기, 알켄기 또는 알킨기, -S-S- 및 (polyethylene glycol)n(n=1~6의 정수)로부터 선택되는 연결기를 나타내며,A는 말레이미드, SCN기, OCN기, 에폭사이드 및 C5~C12의 알킬할라이드로부터 선택되는 작용기를 나타낸다
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나노입자의 표면에 제 24 항에 따른 작용화된 항체가 고정된 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼
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제 25 항에 있어서, 상기 나노입자가 실리카 나노입자 또는 실리카-캡슐화된 나노입자인 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼
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제 25 항에 있어서,상기 나노입자에 아미노산, 펩타이드, 단백질, 핵산, 비타민, 호르몬, 신경전달물질, 당, 킬레이트화제 및 형광염료로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이 추가로 결합된 것을 특징으로 하는, 나노입자-항체 결합 나노플랫폼
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