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MsrB(methionine sulfoxide reductases B) 단백질; cpYFP(circularly permuted yellow fluorescence protein) 단백질; thioredoxin 3 단백질; 링커 단백질; 및 protein G 단백질이 순차적으로 연결된,목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정할 수 있는 형광바이오 센서용 재조합 단백질
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제1항에 있어서,상기 형광바이오 센서용 재조합 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정할 수 있는 형광바이오 센서용 재조합 단백질
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제1항에 있어서,상기 MsrB 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열에서 1~139번째의 아미노산로 이루어진 것이고,상기 cpYFP 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열에서 140~381번째의 아미노산로 이루어진 것이고,상기 thioredoxin 3 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열에서 382~488번째의 아미노산로 이루어진 것이고,상기 링커 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열에서 489~521번째의 아미노산로 이루어진 것이고,상기 protein G 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열에서 522~575번째의 아미노산로 이루어진 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정할 수 있는 형광바이오 센서용 재조합 단백질
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제1항의 형광바이오 센서용 재조합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드
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제4항에 있어서,상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 폴리뉴클레오티드
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제5항에 있어서,상기 서열번호 1의 염기서열에서 MsrB 단백질을 코딩하는 염기서열은 1~417번째의 염기서열로 이루어진 것이고,상기 cpYFP 단백질을 코딩하는 염기서열은 418~1143 번째의 염기서열로 이루어진 것이고, 상기thioredoxin 3 단백질을 코딩하는 염기서열은 1144~1464 번째의 염기서열로 이루어진 것이고,상기 링커 단백질을 코딩하는 염기서열은 1465~1563 번째의 염기서열로 이루어진 것이고,상기 protein G 단백질을 코딩하는 염기서열은 1564~1725 번째의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 폴리뉴클레오티드
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제4항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현벡터
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제7항의 발현벡터로 형질전환된 형질전환체
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제1항의 형광바이오 센서용 재조합 단백질을 포함하는, 목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정할 수 있는 형광바이오 센서
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제1항의 형광바이오 센서용 재조합 단백질 및 검출 목적 단백질에 대한 1차 항체를 포함하는,목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도의 정량 검출용 조성물
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(1) 메티오닌 잔기를 함유한 목적 단백질이 포함된 시료를 준비하는 단계;(2) 상기 시료에 상기 목적 단백질에 대한 1차 항체를 처리하여 상기 항체를 상기 목적단백질과 결합시키는 단계;(3) 제1항의 형광바이오 센서용 재조합 단백질을 처리하는 단계; 및(4) 상기 형광바이오 센서용 재조합 단백질에 대한 형광스펙트럼 값을 측정하는 단계를 포함하는, 목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정하는 방법
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제11항에 있어서,상기 형광스펙트럼 값을 측정하는 것은 하기 계산식으로 계산되는 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정하는 방법;계산식 :
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제12항에 있어서,상기 목적 단백질에서 메티오닌 잔기에서의 산화가 많이 일어날수록 형광스펙트럼 값의 수치는 낮아지는 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 메티오닌 잔기에 대한 산화정도를 측정하는 방법
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시험대상에서 분리된 생물학적 시료에 제10항의 조성물을 처리한 다음, 형광바이오 센서용 재조합 단백질에 대한 형광스펙트럼 값을 정상 대조군에 대한 형광스펙트럼 값과 비교하는 단계를 포함하되, 상기 형광스펙트럼 값은 하기 계산식으로 계산되는 것을 특징으로 하는, 산화적 스트레스 관련 질환의 진단을 위한 정보를 제공하는 방법;계산식 :
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제14항에 있어서,상기 시료는 세포, 조직, 혈액, 혈장, 혈청, 타액 또는 뇨인 것을 특징으로 하는, 산화적 스트레스 관련 질환의 진단을 위한 정보를 제공하는 방법
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제14항에 있어서,상기 산화적 스트레스 관련 질환은 암, 뇌졸중, 심근경색증, 협심증, 동맥경화증, 불임, 간염, 골관절염, 백내장, 노화, 지질대사질환, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥 및 노화로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 산화적 스트레스 관련 질환의 진단을 위한 정보를 제공하는 방법
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(1) 메티오닌 잔기를 함유하는 단백질을 포함하는 시료에 산화적 스트레스를 유도하는 단계;(2) 상기 시료에 후보약물을 처리하는 단계; 및(3) 상기 후보물질이 처리된 시료에 제10항의 조성물을 처리하고, 형광바이오 센서용 재조합 단백질에 대한 형광스펙트럼 값을 후보약물을 처리하지 않은 대조군에 대한 형광스펙트럼 값과 비교하는 단계를 포함하되, 상기 형광스펙트럼 값은 하기 계산식으로 계산되는 것을 특징으로 하는, 산화적 스트레스 관련 질환의 치료제를 스크리닝하는 방법;계산식 :
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제17항에 있어서,상기 후보약물을 처리한 형광스펙트럼 값이 대조군의 형광스펙트럼 값에 비해 높은 경우, 상기 후보약물은 산화적 스트레스 관련 질환의 치료제로 판단하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 산화적 스트레스 관련 질환의 치료제를 스크리닝하는 방법
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제17항에 있어서,상기 산화적 스트레스 관련 질환은 암, 뇌졸중, 심근경색증, 협심증, 동맥경화증, 불임, 간염, 골관절염, 백내장, 노화, 지질대사질환, 심부전증, 고혈압성 심장질환, 부정맥 및 노화로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 산화적 스트레스 관련 질환의 치료제를 스크리닝하는 방법
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