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1) 마우스 ROSA26 유전좌위(locus)에 NF-κB RE(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells response element)를 암호화하는 뉴클레오티드 서열 및 리포터 유전자(reporter gene)를 포함하는 유전자 카세트를 삽입하여 타겟팅 벡터를 제조하는 단계;2) 상기 단계 1)에서 제조된 타겟팅 벡터를 마우스의 배아줄기세포에 삽입하여 마우스 배아줄기세포 클론을 제조하는 단계;3) 상기 단계 2)에서 제조된 마우스 배아줄기세포 클론을 야생형 마우스에서 분리된 배반포(blastocyte)에 삽입하는 단계;4) 상기 단계 3)의 클론이 삽입된 배반포를 대리모 마우스의 자궁에 이식하여 착상시키는 단계; 및5) 상기 단계 4)의 대리모 마우스에서 태어난 마우스를 야생형 마우스와 교배하여 이형접합성 마우스(heterozygous mouse)를 제조하는 단계;를 포함하는 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 단계 1)의 타겟팅 벡터는 하기의 뉴클레오티드 서열을 순차적으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법:(a) CAG 프로모터(promoter);(b) 두 개의 loxP(locus of X-over P1) 부위 사이에 전사 종결 코돈(transcription stop codon) 부위가 위치한 유전자 절편;(c) NF-κB RE를 암호화하는 뉴클레오티드 서열;(d) TA 프로모터;(e) 루시퍼레이즈(Luciferase)를 암호화하는 뉴클레오티드 서열;(f) UBC 프로모터;(g) 티디토마토(tdTomato)를 암호화하는 뉴클레오티드 서열;(h) BGH poly A; 및(i) 네오마이신(Neomycin) 내성 유전자
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제1항에 있어서,상기 단계 1)의 리포터 유전자는 루시퍼레이즈(Luciferase), β갈락토시다제, 녹색 형광 단백질(Green Fluorescent Protein: GFP), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced Green Fluorescent Protein: eGFP), 엠플럼(mPlum), 엠체리(mCherry), 티디토마토(tdTomato), 엠스트로베리(mStrawberry), 제이-레드(J-Red), 디에스레드(DsRed), 엠오렌지(mOrange), mKO, 엠시트린(mCitrine), 비너스(Venus), YPet, 증강된 황색 형광 단백질(enhanced yellow fluorescent protein: EYFP), 에메랄드(Emerald), CyPet, 시안 형광 단백질(cyan fluorescent protein: CFP), 세루리안(Cerulean), 티-사파이어(T-Sapphire), 알칼린 포스파타제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나를 암호화하는 유전자인 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 단계 2)는 마우스 배아줄기세포 클론에 네오마이신(Neomycin) 처리하고 서던 블롯(southern blot)을 수행하여 타겟팅 벡터가 삽입된 마우스 배아줄기세포 클론을 선별하는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법
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제1항에 있어서,상기 단계 4)의 대리모 마우스의 임신 기간은 착상 후 15 내지 20일인 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 5)의 야생형 마우스는 C57BL/6 마우스인 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법
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제1항의 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델의 제조방법으로 제조되는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델
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제7항에 있어서,상기 마우스 모델은 세포 또는 조직 특이적으로 Cre 재조합효소(Cre recombinase)를 발현하는 유전자변형마우스와 교배하여 세포 또는 조직 특이적으로 염증 신호가 발현되는 마우스를 제조하는 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델
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제8항에 있어서,상기 세포 또는 조직 특이적으로 Cre 재조합효소를 발현하는 유전자변형마우스는 MMTV(mouse mammary tumor virus promoter)-Cre 마우스, Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1)-Cre 마우스, Foxp3(forkhead box P3)-Cre 마우스, CD4(cluster of differentiation 4)-Cre 마우스, CD8(cluster of differentiation 8)-Cre 마우스, CD11c(cluster of differentiation 11c)-Cre 마우스, Vil(villin 1)-Cre 마우스, Alb(albumin)-Cre 마우스, AQ(adipoq)-Cre 마우스, AP2(adipocyte protein 2)-CreERT2(Cre recombinase fused to a mutant estrogen ligand-binding domain(ERT2)) 마우스, Lyz2(lysozyme 2, LysM)-Cre 마우스, Ins2(insulin 2)-Cre 마우스 및 DAT(dopamine transporter)-Cre 마우스로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 염증 신호 생체 영상화 마우스 모델
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1) 제7항의 마우스 모델과 세포 또는 조직 특이적으로 Cre 재조합효소(Cre recombinase)를 발현하는 유전자변형마우스를 교배하여 제조된 마우스에 피검물질을 처리하는 단계;2) 상기 피검물질을 처리한 마우스의 NF-κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells)의 활성 정도를 측정하는 단계; 및3) 대조군와 비교하여, 상기 측정된 NF-κB의 활성 정도가 감소한 피검물질을 선별하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는, 항염증 물질 스크리닝 방법
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제10항에 있어서,상기 단계 1)의 세포 또는 조직 특이적으로 Cre 재조합효소를 발현하는 유전자변형마우스는 MMTV(mouse mammary tumor virus promoter)-Cre 마우스, Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1)-Cre 마우스, Foxp3(forkhead box P3)-Cre 마우스, CD4(cluster of differentiation 4)-Cre 마우스, CD8(cluster of differentiation 8)-Cre 마우스, CD11c(cluster of differentiation 11c)-Cre 마우스, Vil(villin 1)-Cre 마우스, Alb(albumin)-Cre 마우스, AQ(adipoq)-Cre 마우스, AP2(adipocyte protein 2)-CreERT2(Cre recombinase fused to a mutant estrogen ligand-binding domain(ERT2)) 마우스, Lyz2(lysozyme 2, LysM)-Cre 마우스, Ins2(insulin 2)-Cre 마우스 및 DAT(dopamine transporter)-Cre 마우스로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 항염증 물질 스크리닝 방법
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제10항에 있어서,상기 단계 2)에서, NF-κB의 활성 정도는, 루시퍼레이즈(luciferase), β갈락토시다제, 녹색 형광 단백질(Green Fluorescent Protein: GFP), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced Green Fluorescent Protein: eGFP), 엠플럼(mPlum), 엠체리(mCherry), 티디토마토(tdTomato), 엠스트로베리(mStrawberry), 제이-레드(J-Red), 디에스레드(DsRed), 엠오렌지(mOrange), mKO, 엠시트린(mCitrine), 비너스(Venus), YPet, 증강된 황색 형광 단백질(enhanced yellow fluorescent protein: EYFP), 에메랄드(Emerald), CyPet, 시안 형광 단백질(cyan fluorescent protein: CFP), 세루리안(Cerulean), 티-사파이어(T-Sapphire), 알칼린 포스파타제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 리포터 유전자의 발현 정도로 측정하는 것을 특징으로 하는, 항염증 물질 스크리닝 방법
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